李广明
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 靶向PRRSV ORF1b基因shRNA重组腺病毒体内外抑制PRRSV复制
- 本研究利用靶向PRRSV ORF1b的2个shRNA重组腺病毒,在MARC-145细胞上观察其抑制PRRSV S1株和SY0608株复制效果,结果表明,与表达突变shRNA的rAd-mP2以及接毒对照组相比,rAd-P2...
- 李广明李玉峰王先炜王兴龙姜平
- 关键词：高致病性PRRSV重组腺病毒SHRNA
- 文献传递
- 靶向PRRSV ORF1b基因shRNA重组腺病毒体内外抑制PRRSV复制
- 本研究利用靶向PRRSV ORF1b的2个shRNA重组腺病毒,在MARC-145细胞上观察其抑制PRRSV S1株和SY0608株复制效果,结果表明,与表达突变shRNA的rAd-mP2以及接毒对照组相比,rAd-P2...
- 李广明李玉峰王先炜王兴龙姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征重组腺病毒PCR检测
- 文献传递
- 猪脑心肌炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二重RT-PCR检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 根据猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因序列设计合成了两对特异性引物,经过PCR反应条件的优化,建立了EMCV和PRRSV二重RT-PCR方法,其PCR产物大小分别为286 bp和390 bp,并具有EMCV和PRRSV特征序列。该方法对EMCV和PRRSV的最低检测量分别为10×TC ID50和1×TC ID50;而对乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的PCR检测结果均为阴性;20份临床发病仔猪样品检测结果为PRRSV阳性者15份,EMCV阳性者3份,证明我国存在EMCV感染。该方法敏感、特异,可用于EMCV和PRRSV感染的检测。
- 白娟李广明宋勤叶李玉峰王先炜张国龙姜平
- 关键词：猪脑心肌炎病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 地高辛标记cDNA探针检测猪繁殖与呼吸综合征病毒被引量：8
- 2007年
- 本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF7基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出394 bp的cDNA。用PCR纯化试剂盒纯化PCR产物,并以此为模板制备出地高辛标记的cDNA探针。特异性试验表明,该探针仅与PRRSV核酸反应,与PPV、PRV、FMDV、HCV及PCV2的核酸反应为阴性。敏感性检测表明,采用CSPD化学发光检测时,硝酸纤维素膜上最低检出量为62.5 pg;尼龙膜上最低检出量为0.5 pg。应用该探针,在尼龙膜上对10份PRRSV阳性病料的组织RNA样品进行检测,结果均为阳性,与RT-PCR检测结果一致,证明该方法可用于PRRSV临床样品检测。
- 李广明姜平李玉峰秦承学
- 关键词：地高辛标记探针斑点杂交化学发光
- 重组腺病毒载体表达的α干扰素对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的抑制作用被引量：4
- 2009年
- 目的:研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)新的防治方法。方法:利用表达猪α干扰素的重组腺病毒(rAd-IFNα),通过病毒滴度、间接免疫荧光试验和实时定量RT-PCR检测,在Marc-145细胞上观察其对高致病性PRRSV SY0608株的复制抑制作用。结果:将rAd-IFNα接种细胞后24 h,再感染PRRSV,可以有效阻止PRRSV造成的细胞病变,PRRSV滴度和mRNA水平明显降低;该抑制作用随rAd-IFNα接种剂量的增加而增强,但随病毒培养时间延长而逐渐减弱。此外,将PRRSV感染细胞后24 h,再接种rAd-IFNα,仍可以有效降低PRRSV滴度和mRNA水平,并且rAd-IFNα对PRRSV传统毒株S1株同样具有明显的抑制作用。结论:rAd-IFNα可以有效抑制PRRSV在Marc-145细胞上复制,为PRRSV的防治提供了理论依据。
- 李广明李玉峰王先炜杜以军白娟姜平
- 关键词：重组腺病毒Α干扰素
- 靶向PRRSV及其PAM细胞病毒受体基因shRNA重组腺病毒的构建与抑制PRRSV复制研究
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV）为有囊膜的单链正股RNA病毒，属于尼多病毒目动脉炎病毒科，主要引起母猪早产、流产等...
- 李广明
- 关键词：重组腺病毒发夹RNA抑制病毒复制
- 文献传递
- 免疫刺激商品断奶仔猪复制多系统衰竭综合征(PMWS)被引量：13
- 2008年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起PMWS的必需病原,与其他病原混合感染或受到外界刺激时表现PMWS临床症状。本试验将16头商品化断奶仔猪(32日龄)随机分为4组(每组4头),即对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组、PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组,用上海某猪场分离株PCV2-SH、钥匙孔血蓝蛋白(KLH)反复刺激断奶仔猪以复制PMWS。其中对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组未出现症状;PCV2攻毒组症状较轻,出现增重缓慢,伴有短暂的体温升高;而PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组出现明显的临床症状,2头猪在攻毒后第11天濒临死亡,其中1头在第12天死亡,攻毒猪宰杀后脏器出现明显的病理变化。PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组于攻毒后第4天出现病毒血症,宰杀后肺脏、淋巴结均检测到PCV2的DNA。以上结果说明,PCV2-SH感染结合免疫刺激可以引起商品化仔猪发生PMWS,为PCV2致病机理和免疫学研究提供了动物发病模型。
- 王先炜姜平韦显凯李广明李军星董信田蒋文明
- 关键词：PCV2免疫刺激断奶仔猪仔猪多系统衰竭综合征
