王兴龙
- 作品数：22 被引量：26H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传变异与免疫控制新技术基础研究
- 姜平李玉峰王先炜蒋文明柏坤桃蔡宝祥黄娟王兴龙陈溥言杨宝收
- (1)在国内较早开展PRRSV遗传变异与分子流行病学研究，首先证明中国PRRSV流行毒株存在5种GP5糖基化位点变化类型，发现中国存在高致病性PRRSV，PRRSV流行毒株间存在自然基因重组现象；(2)利用重组腺病毒系统...
- 关键词：
- 关键词：兽药
- PRRSV GP5蛋白糖基化位点对免疫应答的影响
- 猪繁殖与呼吸综合征给养猪业造成了巨大的经济损失，是危害养猪业的重要传染病之一。由于现有疫苗不能提供完全的保护，猪免疫后仍能感染PRRSV。持续性感染可能是控制该病的一个最大的障碍。对于一些病毒来说，如HIV、SIV和HB...
- 蒋文明姜平李玉峰杜以军王兴龙王先炜
- 关键词：重组腺病毒中和抗体免疫应答猪繁殖与呼吸综合征
- 文献传递
- 我国华东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒流行株NSP2基因的遗传变异分析被引量：3
- 2011年
- 为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在我国华东地区的遗传变异情况和发展趋势,本研究对2004年～2009年分离鉴定的38株PRRSV流行株NSP2基因高变异区进行序列测定及分析。38株PRRSV分离株核苷酸同源性为71.6%～99.6%,推导的氨基酸同源性为63.7%～98.3%,共分为5种基因缺失类型。系统进化分析表明:38个分离株按基因序列可分为NSP2基因亚型Ⅰ和Ⅱ,其中,28株属于NSP2基因亚型Ⅰ,各病毒株均具有至少30个氨基酸的缺失,基因同源性为92.9%～99.2%;10株属于NSP2基因亚型Ⅱ,均具有1个或不具有氨基酸的缺失,基因同源性为76.5%～99.6%。流行株显示由基因亚型Ⅱ逐渐向基因亚型Ⅰ变异的趋势,并且NSP2核苷酸的缺失数量呈上升趋势。由此显示,我国PRRSV流行株NSP2基因变异较大,并不断出现新的变化,因此,加强PRRSV流行株基因变异的监测十分必要。
- 王兴龙李玉峰周业飞王先炜姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒流行病学调查NSP2基因
- 猪IL-10的原核表达及其单克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 为了制备猪IL-10的单克隆抗体(MAb),本研究根据GenBank登录的猪白细胞介素10(PIL-10)基因序列设计两对特异性引物,利用套式PCR扩增PIL-10成熟蛋白编码基因(490bp),构建原核表达载体pET28a-PIL-10,并转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,SDS-PAGE和western blot分析鉴定,证明PIL-10重组蛋白获得表达。提取纯化该重组蛋白包涵体,免疫BALB/c小鼠,经过3次细胞融合,间接ELISA方法筛选,获得一株能稳定分泌抗猪IL-10MAb的杂交瘤细胞,将其命名为2F4。Western blot结果证明该MAb能够与重组蛋白发生特异性反应。间接ELISA测定细胞上清抗体效价为1∶1024,腹水效价为1∶128000,该MAb为IgG3亚型,轻链为λ型。杂交瘤细胞连续传代20代,分泌抗体的效价基本一致,从而为进一步建立猪IL-10的检测方法奠定了物质基础。
- 刘婷婷王兴龙李玉峰宋艳华张国龙姜平
- 关键词：原核表达单克隆抗体
- 猪Toll样受体3、7和8基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2010年
- 为了对猪Toll样受体(TLR)3、7和8基因进行克隆与序列分析,本实验从猪肺泡巨噬细胞(PAM)中,利用RT-PCR方法分片段扩增猪TLR3、7、8基因,并克隆于pMD18-T载体中。根据测序结果分析,猪TLR3、7和8基因的ORF分别为2718bp、3153bp和3087bp,并分别编码906、1051和1029个氨基酸。同源性分析结果显示,它们与GenBank中登录的猪TLR的相应序列同源性达99%以上;与牛、马、羊和人的同源性较高,与鼠的同源性次之,与鸡的同源性最低,其蛋白分子结构预测表明猪TLR3、7、8均为跨膜蛋白。
- 张莉莉白娟王先炜李玉峰王兴龙姜平
- 关键词：TLR克隆
- 猪圆环病毒2型SH毒株免疫原性稳定性研究
- 猪圆环病毒2型（PCV2）是影响世界养猪业的重要病原之一。目前我国尚无预防PCV2感染的疫苗。本研究用D-氨基葡萄糖处理PK-15细胞，将PCV2-SH分离株增殖传代至第50代，测定病毒滴度TCID50均为10-6.25...
- 洪伟彬姜平王先炜李玉峰唐波王兴龙
- 关键词：猪圆环病毒2型免疫原性灭活疫苗稳定性分析
- 文献传递
- 2株猪繁殖与呼吸综合征病毒毒株对仔猪致病性的比较
- 为了比较最新分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异分离株SY0608和传统毒株S1对仔猪的致病性。本研究选择9头30日龄商品仔猪，随机分为2组，分别接种2株病毒，即S1株感染组(n=5头)，SY0608株感染组(...
- 唐波姜平李玉峰洪伟彬王兴龙
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒病毒感染致病作用仔猪
- 文献传递
- 靶向PRRSV ORF1b基因shRNA重组腺病毒体内外抑制PRRSV复制
- 本研究利用靶向PRRSV ORF1b的2个shRNA重组腺病毒,在MARC-145细胞上观察其抑制PRRSV S1株和SY0608株复制效果,结果表明,与表达突变shRNA的rAd-mP2以及接毒对照组相比,rAd-P2...
- 李广明李玉峰王先炜王兴龙姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征重组腺病毒PCR检测
- 文献传递
- 1株临床高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定
- 本研究从江苏省某猪场患有明显呼吸道临床症状和高热死亡的仔猪肺脏组织中分离到一株病毒，经病毒生物学特性测定、血清学试验、病毒基因鉴定，确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。人工猪体感染发病试验表明，该分离株可以...
- 王兴龙柏坤桃李玉峰唐波蒋文明姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒生物学特性发病机制血清学试验
- 文献传递
- 我国猪繁殖与呼吸综合征病毒NT0801分离株分子特征
- 2011年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是目前引起国内外养猪业严重经济损失的重要病原之一,病毒基因和毒力变异较大。PRRSV NT0801株分离自我国发病猪群,毒力较强,但NSP2基因不存在高致病性PRRSV 30个氨基酸的缺失。为了进一步阐明该分离株的分子特征,本研究对该毒株全基因序列进行了测定和分析,结果该毒株基因组全长15 439 bp,其中包含29 nt Poly(A)。与高致病性PRRSV毒株JXA1比较,核酸序列同源性为96.7%,推导的GP3和GP5氨基酸序列同源性分别为97.2%和98.5%,但NSP2基因无30个氨基酸的缺失;与传统型毒株ch-1a比较,推导的GP3和GP5氨基酸序列同源性分别为92.9%和91.5%;基因进化树分析结果显示其介于高致病性和传统PRRSV毒株之间。与其它不同毒力PRRSV分离株基因序列比较,未发现明显重组信号。不同毒力毒株氨基酸残基比对分析结果显示,15个位点潜在毒力相关氨基酸残基中,该毒株有9个与高致病性PRRSV毒株一致,3个与高致病性PRRSV毒株不同,但与传统型和JXA1疫苗株相同,1个位点只与JXA1疫苗株相同,2个与其它毒株都不相同。表明该分离株与高致病性PRRSV密切相关,PRRSV流行毒株变异与基因突变有关,从而为该病毒毒力基因定位研究奠定了基础。
- 陆琪王兴龙宋艳华李玉峰白娟姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒分子特征
