目的:为了研究表达IL-6的重组K562细胞对自然杀伤细胞(NK)细胞的扩增数量、表型和功能的影响。方法:根据人类IL-6 c DNA的5'端序列,设计PCR引物以K562细胞c DNA文库的DNA为模板进行扩增,表达,转染,在K562细胞上表达IL-6基因,构建重组的K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增。流式细胞仪分析NK细胞表型。将NK细胞作用到K562细胞,对其杀伤性进行功能分析,51Cr释放实验检测NK细胞对K562细胞杀伤水平的影响。结果:成功构建了表达IL-6的重组K562细胞,和PBMC共同孵育后,培养体系经过21 d的刺激后,IL-6重组K562细胞诱导PBMC扩增,CD56+CD16+CD3-细胞数量比诱导前扩增了(760±18)倍,CD56+CD16+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的6%±0.4%,扩增后第3组结果比未扩增的多了91%±2%。细胞毒实验表明,在NK效应细胞∶K562靶细胞为5∶1时,扩增的NK细胞的杀伤率达到了92%±2%。结论:本方法以重组K562为刺激细胞,能够实现NK细胞体外的大规模制备,建立了优化的NK细胞体外扩增方法,且扩增的细胞杀伤K562细胞的活性较好。对于NK的大量扩增和应用于临床具有重要的指导意义。
目的：探讨河北地区受激活调节正常 T 细胞表达和分泌因子（regulated upon activation normal T cell ex－pressed and secreted factor，RANTES）基因－403G／A 和－28C／G 单核苷酸多态性（SNP）与结核性脓胸的关系。方法采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）方法检测300例结核性脓胸患者和300例对照人群RANTES基因－403G／A 和－28C／G 的基因型。结果 RANTES 基因－403G／A SNP 基因型频率和等位基因频率在结核性脓胸组和正常组间差异有统计学意义（ P ＝0．004和 P ＝0．008），与 GG 基因型相比，携带 AG ＋AA 基因型可增加结核性脓胸发病风险（OR ＝1．40395％，CI ＝1．015～1．939）。 RANTES 基因－28C／G SNP 基因型频率和等位基因频率在结核性脓胸组和正常组间差异无统计学意义（ P ＝0．128和 P ＝0．064），与 CC 基因型相比，携带 CG ＋GG 基因型与结核性脓胸发病风险无关（OR ＝1．31495％，CI ＝0．891～1．936）。结论 RANTES 基因－403G／A SNP 可能与结核性脓胸的发病风险有关，即携带 AG ＋AA 基因型增加结核性脓胸发病风险；RANTES 基因－28C／G SNP 可能与结核性脓胸发病风险无关。
