杜红飞
- 作品数：28 被引量：28H指数：3
- 供职机构：成都医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 14-3-3η蛋白联合抗MCV抗体检测在RA诊断中的应用
- 2020年
- 目的:探讨14-3-3η蛋白和抗突变型瓜氨酸波形蛋白(Mutated citrullinated vimentin,MCV)抗体在类风湿关节炎患者(Rheumatoid arthritis,RA)血清中的表达情况,评价两者联合检测对RA诊断的临床意义。方法:在同一时间段内收集50例类风湿性关节炎(RA)患者,45例骨关节炎(OA)患者,40例健康对照者(HC),应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清中抗MCV抗体和14-3-3η蛋白的含量,同时与临床常用指标抗环瓜氨酸多肽抗体(anti-cyclic peptide containing citrulline,anti-CCP)进行比较,利用SPSS22.0软件对实验数据进行统计分析。结果:RA组中的14-3-3η蛋白和抗MCV抗体阳性率分别为68.00%、74.00%,均高于OA组和HC组,单独检测14-3-3η蛋白和抗MCV抗体对RA诊断的灵敏度均远低于抗CCP抗体,但14-3-3η蛋白和抗MCV抗体联合检测,灵敏度和特异性都得到了显著性提高,其敏感性为91.68%,特异性高达99.17%。结论:14-3-3η蛋白和抗MCV抗体联合检测,并结合抗CCP抗体的表达水平,能帮助提高类风湿关节炎的诊断准确率。
- 石娇银凤至杜红飞聂芳许颖
- 关键词：类风湿性关节炎
- hepaCAM基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建表达肝细胞黏附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)基因的重组腺病毒质粒,并进行鉴定。方法以质粒pEGFP-N2-hepaCAM为模板,PCR扩增hepaCAM基因,克隆至腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV上,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,将重组腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV-hepaCAM经PmeⅠ线性化,转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中进行同源重组。重组腺病毒质粒pAdEasy-1-hepaCAM经PmeⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,包装重组腺病毒AdI-hepaCAM,经大量扩增后,检测病毒滴度。RT-qPCR及Westernblot检测感染的BIU-87细胞内hepaCAM的表达。结果酶切鉴定证实重组腺病毒质粒pAdEasy-1-hepaCAM构建正确,重组腺病毒AdI-hepaCAM滴度可达1.6×1012pfu/ml,与空载体腺病毒组比较,经重组腺病毒感染的BIU-87细胞中hepaCAM mRNA及蛋白的表达均明显升高(P<0.05)。结论已成功构建携带hepaCAM的重组腺病毒载体AdI-hepaCAM,为研究hepaCAM基因对膀胱癌细胞增殖的调控提供依据。
- 陶佳王秋菊范砚茹杜红飞宋学东罗春丽吴小侯
- 关键词：黏附分子腺病毒膀胱癌
- HepaCAM联合吡柔比星抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖被引量：1
- 2015年
- 目的:研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM)联合吡柔比星(pirarubicin,THP)对膀胱癌细胞BIU-87的增殖影响。方法:将BIU-87细胞分为空白处理组、hepa CAM过表达腺病毒(adenovirus-GFP-hepa CAM,Ad-GFPhepa CAM)处理组、THP处理组、Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因cyclin D1,CDK2的m RNA表达。将空白、空载腺病毒(adenovirus-GFP,Ad-GFP)、hepa CMA过表达腺病毒(Ad-GFP-hepa CAM)处理的BIU-87细胞分别注射于裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤情况并记录瘤体体积,4周后处死裸鼠。切取各组瘤体组织,组织切片行HE染色和免疫组化检测hepa CAM蛋白的表达。结果:Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组,与THP处理组比较,BIU-87细胞增殖受到明显抑制(F=2.702,P=0.00);细胞周期明显阻滞于G0/G1期(F=10.989,P=0.000);cyclin D1、CDK2的m RNA表达明显下调(F=5.4299,P=0.000)。Ad-GFPhepa CAM处理组的BIU-87细胞成瘤体积明显低于空白处理组(F=12.587,P=0.000)。结论:hepa CAM基因能够增强吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞的增殖抑制作用。
- 吕长坤万雪莲马菲菲杜红飞杨雪罗春丽
- 关键词：HEPA吡柔比星膀胱癌CYCLINCDK2
- SIM2基因在膀胱癌组织中的表达及临床意义被引量：1
- 2022年
- 目的利用在线生物信息数据库,组织和细胞水平实验探究SIM2基因在膀胱癌中的表达及涉及的临床意义。方法通过UALCAN数据库分析SIM2基因在膀胱癌患者和正常膀胱组织中的表达差异,SIM2基因表达与膀胱癌患者淋巴结转移、分期、组织亚型等临床病理参数的关系;GEPIA数据库、HPA数据库、组织芯片和定量PCR技术验证SIM2基因在膀胱癌患者中的mRNA和蛋白表达差异;利用String数据库分析SIM2基因的蛋白相互作用及调控网络;Linked Omics数据库做SIM2相关分子的富集分析;TIMER和TISIDB数据库分析SIM2基因与肿瘤微环境免疫细胞浸润的关系。结果UALCAN、GEPIA和HPA数据库结果显示,膀胱癌组织中SIM2基因的mRNA和蛋白水平的表达明显高于正常膀胱组织(P<0.05);UALCAN在线工具分析揭示,SIM2的表达与患者的淋巴结转移、病理类型、分期密切相关;免疫组织化学及定量PCR湿实验结果显示,SIM2蛋白和mRNA表达水平在膀胱癌组织中明显升高(P<0.05),但SIM2的表达与膀胱癌患者TNM分期和病理分级无相关性;String在线分析结果提示,与SIM2具有相互作用的蛋白涉及生物过程包括参与类泛素蛋白修饰、转录调控、蛋白水解等生物学过程;LinkedOmics富集分析表明,与SIM2正相关基因涉及TNF、NF-kappa B和JAK-STA等信号通路及多种生物学功能,包括细胞黏附分子结合,G蛋白偶联受体结合和细胞因子受体活性等;免疫细胞浸润水平显示SIM2的表达与树突状细胞等呈负相关。结论通过在多种在线数据库及实验结果揭示SIM2基因在膀胱癌中高表达,可能为膀胱癌发生发展的重要分子靶点。
- 杜红飞袁鸿玲李臻玥许颖
- 关键词：SIM2膀胱癌生物信息学
- 地中海贫血基因检测结果及血液学表型分析被引量：6
- 2022年
- 目的:了解本地区人群中地中海贫血基因型分布特点,分析β-地中海贫血杂合子血液学表型与年龄的关系。方法:选取2017年6月至2021月6月于成都医学院第一附属医院检测地贫基因疑似病例1 351例,采用PCR-反向斑点杂交法检测常见α、β地中海贫血基因类型,收集确诊病例的MCV、MCH、MCHC、Hb数据。β-地中海贫血杂合子患者按照年龄分为0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组,比较各组间血液学表型的差异。结果:在1 351例检测标本中,确诊地中海贫血523例(38.71%),其中13种基因型α-地贫260例(19.25%),12种基因型β-地贫252例(18.65%),9种基因型α复合β地贫11例。MCV、MCH在0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组呈明显上升趋势,MCHC在0-18岁组最高,Hb在> 50岁组最低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:本地区α-地中海贫血以--^(SEA)/αα基因型为主,β地中海贫血以CD41-42/N、IVS-II-654/N基因型为主,且在β-地中海贫血杂合子中,MCV、MCH在0-18岁组最低、在> 50岁组最高,年龄对地中海贫血初筛中血液学参数的影响,为临床诊疗过程中提供了一定的参考价值。
- 周晓萍刘腾庞雪利杜红飞许颖
- 关键词：地中海贫血基因型
- 异常血红蛋白电泳原因分析
- 2023年
- 目的:探讨血红蛋白电泳结果异常的可能原因。方法:收集成都医学院第一附属医院2018年9月至2021年7月5696例患者的血红蛋白电泳结果,并对异常结果及临床意义进行分析。结果:486例患者结果异常(占8.53%),其中300例HbA2增高,135例HbA2降低,44例单独F增高,7例有异常血红蛋白条带。486例患者中,地中海贫血基因阳性246例(阳性率50.62%),其中α地中海贫血29例,β地中海贫血208例,α合并β地中海贫血9例。在HbA2升高的患者中,68.67%为β地中海贫血引起,3.00%为α合并β地中海贫血引起,9.33%疑为红细胞体积增大引起,6.33%疑为甲状腺功能异常引起,12.67%疑为检测方法的不确定性引起。在HbA2降低的患者中,21.48%为α地中海贫血引起,60.00%为缺铁性贫血引起,8.15%疑为甲状腺功能异常引起,10.37%疑为检测方法的不确定性引起。F单独升高的患者,地中海贫血基因检测结果均为阴性,40.91%疑为红细胞体积增大引起,27.27%疑为遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症引起,29.55%疑为部分孕妇特殊生理状况引起,2.27%疑为甲状腺功能亢进引起。7例患者检测到异常血红蛋白条带,其中4例血红蛋白D,2例血红蛋白E,1例血红蛋白J。结论:地中海贫血、缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血与非重型再生障碍性贫血等红细胞体积增大的贫血、甲状腺功能异常、遗传性持续性胎儿血红蛋白增多症、异常血红蛋白病、检测方法的不确定性均是血红蛋白电泳结果异常的重要原因。在临床工作中应综合分析患者的各项指标来判断可能的原因。
- 庞雪利杜红飞阳燕阳燕唐宁周晓萍许颖
- 关键词：地中海贫血缺铁性贫血甲状腺功能异常
- 乙肝肝硬化早期患者外周血环状RNA差异表达谱的研究被引量：4
- 2020年
- 目的采用微阵列芯片技术筛选乙肝肝硬化早期患者外周血中差异表达的环状RNA(circRNA),进行生物信息学数据预测和分析,为乙肝肝硬化的早期临床诊断和治疗提供理论研究基础。方法选取成都医学院第一附属医院已诊断为乙肝肝硬化早期患者3例(试验组)和健康体检者3例(对照组)作为研究对象,运用Arraystar circRNA基因芯片检测两组外周血中的circRNA表达谱,分析二者差异表达的circRNA;同时,运用数据库预测差异circRNA下游相互作用的microRNA。结果与健康对照组比较,乙肝肝硬化早期患者外周血中异常表达的circRNA共有1447个(fold change绝对值≥2.0),其中上调的777个(fold change≥2.0),下调的670个(fold change≤-2.0);生物信息分析数据提示,差异circRNA在调节基因表达、细胞代谢及RNA转录等功能方面高度富集;16个circRNA与肝硬化相关的miR-18a-5p、miR-29c-3p、miR-106b-5p、miR-185-5p等可能具有miRNA海绵作用。结论乙肝肝硬化早期患者外周血存在异常表达的circRNA,其可能参与乙肝肝硬化早期的致病调控,未来可能成为乙肝肝硬化早期诊断和治疗的新型生物学标志物。
- 杜红飞庞雪利阳燕周晓萍许颖
- 关键词：肝硬化生物信息学表达谱
- Tbx3在膀胱癌中的表达及其对肿瘤干细胞样细胞的影响被引量：1
- 2021年
- 目的研究Tbx3在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌干细胞样细胞的影响。方法利用免疫组化方法检测膀胱癌组织和癌旁组织中Tbx3蛋白水平的表达,并分析Tbx3的表达与膀胱癌临床病理参数的关系;实时荧光定量PCR方法检测Tbx3在正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,T24细胞及膀胱癌干细胞样细胞中的表达;运用干扰质粒沉默Tbx3的表达,悬浮成球试验检测Tbx3对膀胱癌干细胞样细胞的成球能力的影响。结果 Tbx3在膀胱癌组织的表达明显高于膀胱癌旁组织,且Tbx3的高表达与膀胱癌的淋巴结转移具有相关性;K-M生存分析揭示,与Tbx3低表达组比较,Tbx3高表达组具有较低生存率。细胞水平试验结果显示,与正常细胞比较,Tbx3的mRNA水平高表达于T24细胞中(P<0.05),且高表达于膀胱癌干细胞样细胞;转染Tbx3干扰质粒后,膀胱癌干细胞样细胞的成球能力明显减低(P<0.05)。结论Tbx3高表达于膀胱癌组织中,对膀胱癌干细胞样细胞的形成有促进作用,可能为膀胱癌潜在的重要靶点。
- 杜红飞庞雪利阳燕周晓萍许颖
- 关键词：膀胱癌
- 侵袭性真菌感染的分子学诊断方法
- 侵袭性真菌的感染对免疫功能不全,使用广谱抗生素,患恶性肿瘤疾病的患者的生命产生了巨大威胁。传统的侵袭性真菌诊断方法,组织病理学和血液培养鉴定方法,是临床检查真菌感染的金标准,然而,其检测结果具有低敏感性。由于临床的需要,...
- 杜红飞许颖
- 关键词：真菌PCR多重PCR
- 文献传递
- m6A甲基转移酶3在前列腺癌中的表达及其对LNCaP细胞铁死亡的影响
- 2023年
- 为探究m6A甲基转移酶3(N6-methyladenosine methyltransferase-like 3,METTL3)在前列腺癌中的表达及其对LNCaP细胞铁死亡的影响,本研究运用UALCAN在线数据库分析了METTL3和SLC7A11在正常前列腺组织和前列腺癌组织中的表达差异及其表达与前列腺癌患者临床病理特征的关系,采用TIMER在线数据库分析了METTL3与铁死亡相关基因SLC7A11表达的相关性。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测METTL3 mRNA和蛋白在不同前列腺癌细胞中的表达水平。沉默METTL3的表达后,采用透射电子显微镜观察LNCaP细胞的铁死亡变化,检测SLC7A11的mRNA及蛋白表达情况。UALCAN在线数据库结果显示,METTL3和SLC7A11均高表达于前列腺癌组织,且两者的表达均与前列腺癌患者的Gleason评分、淋巴结转移和TP53突变具有相关性(P<0.05);TIMER分析结果显示,METTL3与铁死亡相关分子SLC7A11的表达呈正相关(P<0.001)。细胞实验结果显示,METTL3在前列腺癌细胞中高表达,而干扰LNCa P细胞METTL3的表达后,细胞铁死亡增加且SLC7A11的表达降低。本研究结果表明,METTL3可能是参与前列腺癌发生铁死亡的重要分子,影响前列腺癌的发生与进展。
- 谢光素杜红飞杨红黄华翠许颖
- 关键词：前列腺癌甲基化
