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丙型肝炎双移位F蛋白抑制肝癌细胞p16、p21的表达被引量：3: 2010年; 目的:探讨丙型肝炎双移位F(DF)蛋白对肝癌细胞抑癌基因p16、p21转录与表达的影响。方法:PCR扩增HCV1b型DF基因,构建pCDNA3.0/HCV-DF真核表达载体。再转染至肝癌细胞HepG2中,G418筛选稳定表达细胞株,Western blot检测p16、p21蛋白表达及半定量RT-PCR法检测p16、p21基因转录,并以pCDNA3.0空质粒作为阴性对照。结果:重组质粒pCDNA3.0/HCV-DF蛋白在HepG2细胞中稳定表达,pCDNA3.0/HCV-DF转染细胞中p16、p21 mR-NA转录水平和蛋白表达水平较空质粒转染的细胞明显下降。结论:HCV-DF蛋白能够抑制p16、p21表达,提示可能参与肝细胞癌变发生发展。; 王昊鹏张云杨静静王洁邓小昭许可; 关键词：丙型肝炎病毒 P16 P21

丙型肝炎双移位F蛋白抑制肝癌细胞p16、p21的表达: 探讨丙型肝炎双移位F(DF)蛋白对肝癌细胞抑癌基因p16、p21转录与表达的影响。方法 PCR扩增HCV 1b型DF基因，构建pCDNA3.0／HCV-DF真核表达载体。再转染至肝癌细胞HepG2中，G418筛选稳定表达...; 王昊鹏张云杨静静王洁邓小昭许可; 文献传递

毕赤酵母木糖还原酶定点突变改善其对双辅酶的亲和力被引量：2: 2009年; 通过毕赤酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶(xylose reductase,XR)基因定点突变,获得NADH高亲和力的毕赤酵母木糖还原酶(PsXR),改善了辅酶不同而导致的酿酒酵母胞内氧化还原失衡.同时克隆了PsXR编码基因,通过BLAST工具进行同源性搜索,并用生物软件进行序列比对和结构分析,确定突变位点.用融合PCR方法进行定点突变,并在大肠杆菌表达系统中进行融合表达,且对表达产物进行HIS-TAG亲和纯化,分光光度法检测酶活性,计算比活力.本研究成功获得突变XR编码基因,并收集了纯化的突变蛋白.酶活性检测和比活力计算显示,3种突变酶对2种辅酶的亲和力在一定程度上都发生了变化.与未突变的PsXR相比,3种突变酶对辅酶NADPH的亲和力均显著下降,突变酶M3对辅酶NADH的亲和力未发生变化,而突变酶M1和M4对辅酶NADH的亲和力显著升高,其中突变酶M1对NADH的亲和力明显提高,对NADPH的亲和力明显下降,其活性主要依赖辅酶NADH,提示K270R位点在XR与辅酶结合中起关键作用.; 董莉莉邓小昭钟辉姚文娟于娟杨静静; 关键词：木糖木糖还原酶

吸毒人群中丙型肝炎患者F蛋白抗体检测被引量：4: 2010年; 目的了解丙型肝炎病毒(HCV)F抗体在南京市吸毒人群HCV感染者中的分布特点,为丙型肝炎防治及制定慢性化预防策略提供依据。方法利用pEGX-4T-2/HCV-F融合载体表达蛋白HCV-F/GST作为抗原,包被酶联反应板,ELISA间接法检测362例HCV感染者及50例正常人血清HCV-F抗体,结合其人口学特征和疾病特征,统计分析HCV-F抗体的分布情况及与HCV感染的关系。结果 362例感染HCV的吸毒者F抗体阳性率为31.5%。通过比较发现F抗体阳性率在性别、吸毒时间、吸毒方式等因素中分布无统计学差异,而F抗体阳性率与年龄、联合感染可能具有一定关联。结论南京市吸毒人群HCV感染者中存在F抗体,其可能与疾病病程相关。; 朱萍王昊鹏杨静静邓小昭郑锦锋张云; 关键词：肝炎病毒属 F蛋白吸毒人群

丙型肝炎病毒基因型及F蛋白与丙型肝炎慢性化、肝癌细胞凋亡的关系研究: 丙型肝炎病毒(HCV)感染所引起的丙型肝炎呈全球分布。据WHO估计,目前全世界约有1.8亿HCV感染者,且呈增长趋势,特别是在静脉注射吸毒人群(IDUs)中HCV的感染率远远高于一般人群,是重要的传染源。HCV感染所致的...; 杨静静; 关键词：丙型肝炎病毒 HCV基因型慢性化凋亡; 文献传递

南京地区吸毒人群丙型肝炎的常见基因型分型研究被引量：7: 2009年; 目的了解南京地区吸毒人群丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)常见基因型分布特点。方法对南京市强制戒毒所收集提供的198份抗-HCV阳性吸毒人员血清进行HCV RNA检测,对阳性标本按照Simmonds分型方法,采用5′非编码区(5′NCR)1、2、3、1b型特异性引物进行PCR扩增与分型,同时分析不同类型吸毒人员丙型肝炎感染者上述基因型分布差异。结果198份血清中,有168份为HCV RNA阳性。单一基因型占77.4%,其中1b亚型106份(63.1%),2型15份(8.9%),3型9份(5.4%);混合基因型占20.2%,其中1b/2型25份(14.8%),1b/3型5份(3.0%),2/3型4份(2.4%);未确定基因型4份(2.4%)。静脉和非静脉吸毒人群HCV基因型分布差异无统计学意义(χ2=3.614,P>0.05),单一基因型和混合基因型分布差异亦无统计学意义(χ2=0.018,P>0.05)。结论南京地区吸毒人群HCV基因型1b型为主,其他多种基因型并存,总体分布特点介于中国南北方之间。; 龚建明杨静静王昊鹏喻荣彬邓小昭张云; 关键词：丙型肝炎病毒基因型吸毒

丙型肝炎病毒基因1b型F蛋白对人肝细胞癌细胞株HepG2凋亡的影响被引量：1: 2009年; 目的研究丙型肝炎病毒（HCV）基因1b型F蛋白对人肝细胞癌细胞株HepG2凋亡的影响。方法构建真核表达重组质粒pcDNA3．0-F—EGFP，并利用Lipofectamine2000转染人肝细胞癌细胞系HepG2，同时设pcDNA3．0-C-EGFP-HepG2阳性对照、pcDNA3．0-HepG2为阴性对照及未转染HepG2为空白对照，以Act-D、TNFα诱导四组细胞系发生凋亡，Annexin V-FITC／PI双染检测肿瘤细胞凋广率，并使用细胞凋亡DNA Ladder检测，进一步验证HCV 1b型F蛋白在肝细胞凋亡的生物学功能效应。结果pcDNA3．0-F-EGFP-HepG2细胞系在发生凋亡的时间上比pcDNA3．0-C-EGFP-HepG2快，但相对空白质粒转染组及未转染HepG2细胞系有明显延迟，凋亡的发生率也明显低于阴性对照及空白对照细胞系（P〈0．001）。结论外源性基因HCV1b型F的引入及表达，对HepG2细胞的凋亡有抑制作用。; 杨静静张云邓小昭许可王忠灿王洁冯乐丁伟良; 关键词：丙型肝炎病毒 F蛋白凋亡肿瘤坏死因子Α

ApoB基因多态性与HCV感染易感性关系: 2011年; 目的探讨载脂蛋白B(ApoB)基因单核苷酸多态性C-2488T和G-4154A在病例组与对照组的分布及与HCV感染的遗传易感性关联。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,对190例HCV感染者和398例对照组人群进行C-2488T和G-4154A多态性检测,比较不同基因型与HCV感染易感性关系。结果 G-4154A位点病例组和对照组基因型为GG、GA、AA分别有160、27、3例和364、32、2例,基因型频率分别为84.2%、4.2%、1.6%和91.5%、8.0%、0.5%,差异有统计学意义(P<0.05);病例组和对照组等位基因为A、G分别有347、33例和760、34例,差异有统计学意义(P<0.05);C-2488T位点病例组和对照组基因型为CC、CT、TT分别有176、14、0例和357、40、1例,基因型频率分别为92.6%、7.4%、0.0%和89.7%、10.1%、0.3%,差异无统计学意义。结论江苏省汉族人群ApoB基因多态性改变可能与HCV感染的遗传易感性有关。; 刘燕杨静静喻荣斌王昊鹏王洁崔倩邓小昭张云; 关键词：丙型肝炎病毒载脂蛋白B基因病例对照研究

中国大陆吸毒人群HIV、HBV、HCV感染状况及其相关因素的Meta分析被引量：90: 2010年; 目的掌握中国大陆吸毒人群的基本情况,以及该人群中艾滋病病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的流行状况,探讨其相关因素。方法通过相关检索策略查找已经发表的针对中国大陆吸毒人群HIV、HBV、HCV感染状况的相关文献,整理并制作成数据库进行Meta分析。结果我国吸毒人群HIV、HBV、HCV的感染率分别为3.3%、25.0%、50.4%;吸毒人群中HIV、HBV、HCV感染与性别并无明显关联;注射吸毒是吸毒人群HIV、HBV、HCV感染的危险因素;长期吸毒可以促进HCV在吸毒人群中的流行。结论应加强对吸毒人群的健康教育和行为干预,尤其是注射吸毒人群,防止HIV、HBV、HCV在其中扩散。; 王昊鹏杨静静邓小昭许可王洁张云; 关键词：吸毒人群 HIV META分析

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杨静静

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