林丽芳
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：福建省立医院更多>>
- 发文基金：福建省科技厅社会发展重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人皮肤成纤维细胞分离培养的研究被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨人包皮成纤维(human foreskin fibroblast,HFF)细胞分离培养方法,通过分析HFF细胞体外培养条件,建立稳定的HFF细胞系。方法:用0.25%dispaseⅡ酶消化包皮环切术后皮肤组织,分离表皮和真皮,真皮组织用0.1%Ⅰ型胶原酶消化,收集细胞于含20%胎牛血清的DMEM培养液中,置CO2培养箱孵育,待细胞长成单层后消化传代。结果:消化法得到的人皮肤成纤维细胞24h内贴壁,刚开始贴壁时细胞多数呈圆形,HFF细胞随贴壁时间延长,逐渐伸展成梭形或多边形。传代后的成纤维细胞12h开始贴壁,24h内完全贴壁。HFF细胞采用SABC法染色细胞浆呈棕色,前10代细胞活力均在98%以上。结论:该方法可获得高产量、高活力的HFF细胞,是一种可靠的HFF细胞培养方法。
- 王孟丽沈晓丽林真林丽芳
- 关键词：成纤维细胞多能干细胞细胞分离
- 慢病毒载体感染人皮肤成纤维细胞的研究
- 2009年
- 目的:建立慢病毒-绿色荧光蛋白载体有效感染人包皮成纤维细胞的方法,为利用慢病毒载体介导外源基因导入人包皮成纤维细胞,后者直接诱导分化为多能干细胞的研究奠定基础。方法:采用0.1%Ⅰ型胶原酶冷消化联合组织块贴壁法培养人包皮成纤维细胞,在细胞培养液中分别加入不同感染复数的慢病毒和具有促进病毒感染的细胞增强液,并于感染48h后观察慢病毒转导情况。结果:成功建立人包皮成纤维细胞培养模型,当慢病毒对人包皮成纤维细胞的感染复数为20及在培养基中加入细胞增强液时,感染效率可以达到80%,能满足后续实验的需要。结论:慢病毒较易感染人包皮成纤维细胞,是具有发展潜力的多能干细胞细胞技术研究的新载体。
- 王孟丽沈晓丽韩莉莉林丽芳浦晓东
- 关键词：慢病毒载体皮肤成纤维细胞多能干细胞
