王丽华
- 作品数：40 被引量：69H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人角质形成细胞复合异种脱细胞真皮基质三维培养的形态学观察
- 目的 建立组织工程皮肤三维培养方法,了解人永生化KC株(HaCaT)复合异种ADM培养的组织形态学变化. 方法 采用改良法制备SD大鼠ADM,培养HaCaT.将处于对数生长期的HaCaT按2×105 个 /cm...
- 朱崇涛彭代智王丽华何斌郑必祥周新罗海水王勇刘敬
- 超声破坏载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡治疗糖尿病大鼠烫伤创面的实验研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨超声破坏载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡对糖尿病大鼠烫伤创面的治疗作用。方法制备载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡,检测其基本特性;MTT法检测其对大鼠真皮成纤维细胞活性的影响;Western-blot检测其在大鼠真皮成纤维细胞中的基因表达水平及转染效率。选取糖尿病大鼠27只,分为空白对照组、载基因纳泡组及超声破坏载基因纳泡组,超声破坏载基因纳泡组又分别于1 d、2 d、3 d、4 d、7 d、14 d及21 d观察创面愈合情况,以及bFGF及NGF蛋白表达水平及转染效率,并与空白对照组、载基因纳泡组21 d时的结果进行对照。结果所制备的阳离子纳泡形态规则,稳定性好,平均表面电位为12.7 mV;与基因结合量高达3.8mg/108个纳泡;基因结合率高达39.5%;MTT显示对细胞无明显毒性。Western-blot半定量结果显示,空白对照组和载基因纳泡组bFGF及NGF蛋白水平低;bFGF蛋白及NGF蛋白在载基因纳泡组48 h时转染效率及表达水平最高。超声破坏载基因纳泡48 h组bFGF水平在治疗第7天表达及转染率达到峰值,NGF水平在治疗第4天表达及转染率最高。结论载pcDNA3-bFGF-NGF基因纳泡能显著增强超声显影;经超声基因转染仪破坏后可定位释放基因,且基因转染效率明显提高,对糖尿病大鼠烫伤创面有较好的治疗效果。
- 王丽华宗建春刘之川简华刚余萍萍梅英
- 关键词：超声成像
- 不同质粒导入人角质形成细胞的实验研究
- 目的:研究不同质粒导入人角质形成细胞的方法和效率。方法:将四种不同分子量的质粒采用脂质体、阳离子多聚物、电穿孔及慢病毒四种转染方法导入人永生化角质形成细胞系HaCaT,同时以人胚胎肾细胞系293FT为对照,荧光显微镜观察...
- 王丽华彭代智刘敬周新王勇何升东何斌郑必祥董征学
- 文献传递
- 急性呼吸窘迫综合征新氧合指数及肺保护性通气策略的应用进展被引量：6
- 2012年
- 急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是一种严重的低氧性急性呼吸衰竭,可认为是由急性肺损伤（ALI）最严重的阶段所产生的临床综合征,常见诱因为严重的感染、烧伤、胸部创伤和多发伤等。ARDS病死率高达18.0%～54.7%[1],因此,尽早诊断ARDS,准确的病情评估,及时采取相应的治疗措施是抢救成功的关键。
- 吕波简华刚王丽华
- 关键词：急性肺损伤ARDS氧合指数肺保护性通气策略
- 慢病毒载体在人角质形成细胞基因组中的整合位点分析
- 目的 检测慢病毒载体(1entiviralvector)在人角质形成细胞基因组中的整合位点,初步分析慢病毒载体在表皮细胞基因组中的整合位点分布规律。方法 以本课题组前期研究中构建的慢病毒载体感染的人永生化角质形成细胞系为...
- 钱卫刘敬彭代智王丽华刘小玲李睿夫舒文婷何传果刘潇周新
- 组织工程皮肤种子细胞的研究
- 组织工程皮肤是至今为止最成功的组织工程产品之一,虽然已初步应用于临床,但是还面临表皮种子细胞的选择和异体表皮种子细胞的免疫原性很强等许多难题。本文介绍了我们在表皮种子细胞的分离培养
- 彭代智朱崇涛罗海水王丽华何斌郑必祥周新刘敬
- 文献传递
- 以HaCaT细胞为种子细胞构建新型人组织工程皮肤被引量：11
- 2007年
- 目的:评估以人永生化角朊细胞HaCaT为种子细胞构建新型人组织工程皮肤的可行性。方法:对HaCaT进行无血清培养(DK-SFM)及传代培养;取处于对数生长期的细胞进行接种;利用物理化学方法,采用SD大鼠网状层真皮制备(Acelluar dermal matrix,ADM);应用MTT比色法作生长曲线观察HaCaT细胞长满真皮支架所需时间。HE染色法观察脱细胞前后真皮支架和细胞单层及初步形成的细胞多层。结果:脱细胞真皮的细胞成分消失,组织疏松,为理想的组织皮肤支架;将HaCaT细胞按2×10~5/cm^2密度接种到ADM上,细胞长满支架的时间为5天。
- 朱崇涛彭代智周新刘敬罗海水王丽华王勇蒋丽莉
- 关键词：HACAT细胞MTT组织工程皮肤
- 人角质形成细胞复合异种脱细胞真皮基质三维培养的形态学观察
- 2009年
- 目的建立组织工程皮肤三维培养方法，了解人永生化KC株（HaCaT）复合异种ADM培养的组织形态学变化。方法采用改良法制备sD大鼠ADM，培养HaCaT。将处于对数生长期的HaCaT按2×10^5个／cm^2密度接种存ADM上浸没培养5d，再转为气液相培养5d。扫描电镜观察ADM及其复合HaCaT培养第1天和第5天的细胞生长情况，HE染色观察ADM及其复合HaCaT培养1、5、10d的组织学变化。结果ADM为白色，外观平整质地柔软，胶原束完整，未见细胞残留。HaCaT接种于ADM培养1d即附着并伸出伪足，5d融合成片，10d增长至3～6层并有向ADM内生长的趋势。结论SD大鼠ADM有利于HaCaT黏附及培养液渗透，可以在10d内获得复层组织工程皮肤。
- 朱崇涛彭代智王丽华何斌郑必祥周新罗海水王勇刘敬
- 关键词：真皮共同培养技术角质形成细胞形态学
- CCL20基因敲低型组织工程皮肤种子细胞的克隆筛选及其干扰效果
- 目的：采用重组慢病毒CCL20基因特异性shRNA载体感染人永生化角质形成细胞系(HaCaT),筛选出稳定干扰CCL20基因表达的细胞克隆并检测其干扰效果.方法：用CaCl2法将已构建好的3种pHSER-CCL20-sh...
- 彭代智周光前王丽华刘敬周新王勇何升东何斌郑必祥董征学
- 组织工程皮肤种子细胞的研究
- 组织工程皮肤是至今为止最成功的组织工程产品之一,虽然已初步应用于临床,但是还面临表皮种子细胞的选择和异体表皮种子细胞的免疫原性很强等许多难题。本文介绍了我们在表皮种子细胞的分离培养技术、新型表皮种子细胞的筛选性以及对其进...
- 彭代智朱崇涛罗海水王丽华何斌郑必祥周新刘敬
- 文献传递
