王广有
- 作品数：92 被引量：224H指数：8
- 供职机构：天津医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转人HT基因在抗异种移植免疫排斥的研究被引量：1
- 2004年
- 用脂质体转染方法将人类α1,2岩藻糖苷转移酶 (HT基因 )转入猪的血管内皮细胞中(PIEC) ,经 G4 18筛选两周获得具有抗性的克隆 ,增殖传代 ,当细胞达到一定数量时消化收集 ,流式细胞仪检测转染细胞的表达情况。结果显示 HT基因的转染是有效的 ,明显地提高了 H抗原的表达 ,同时降低了 a- Gal的表达 ,在异种移植研究中抑制超急性排斥反应 (HAR)和延迟性排斥反应 (DXR)均起到一定的作用。
- 李胜芝马志方张玥刘秉乾王广有马腾骧
- 关键词：免疫排斥流式细胞仪检测超急性排斥反应转染细胞H抗原GAL
- 一种新型的隔膜型人工膀胱被引量：2
- 1997年
- 设计一种新型的隔膜型人工膀胱并制定了相应的植入手术方法。植入１５只犬，观察１１天～６个月，进行了血与尿检测、Ｘ线检查、流体力学测试及尸检。结果表明，人工膀胱的贮尿器植入后能保持设计容量，流体力学性能良好；８５．０％以上受检肾无积水或仅有轻度积水，肾功能均正常；植入１个月后贮尿器尿液细菌学检查均为阳性，但肾盂尿阳性率仅８．３％。认为此型人工膀胱的植入为一种比较理想的尿流改道方法。
- 王广有郑秀琴马腾骧刘春雨李洪媚陆志强王媛顾汉卿陆茉珠
- 关键词：人工膀胱隔膜型
- 人DAF基因克隆与转移的研究
- 马腾骧王广有王剑鹏吴海
- 以SFFV5′LTR作为启动子，以SV40Splice/PolyA作为下游调节序列。通过目的基因片段的分离；小鼠受精卵的基因导入及胚胎移植；基因组DNA的Dot-blot及Southern-blot杂交等方法，培育出4只...
- 关键词：
- 关键词：基因克隆基因转移动物实验胚胎移植
- 转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞的活化抑制实验
- 2008年
- 目的探讨人α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因转移抑制猪动脉内皮细胞(PAEC)Ⅱ型活化的作用和机制。方法用不同条件刺激转人HT基因和正常的PAEC,在不同时段分别采用细胞酶联免疫吸附测定方法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1在细胞表面的表达。采用免疫细胞化学方法检测细胞接受刺激12h后2种PAEC核因子(NF)-κB阳性细胞百分数。结果3种刺激均可以活化PAEC,使其表面ICAM-1的表达逐步升高,并在12h左右达到峰值。实验组和对照组细胞在接受刺激4h后ICAM-1的表达差异有统计学意义(P值均<0.05),实验组细胞ICAM-1的表达量均低于对照组,细胞的活化受到抑制。在不同条件下刺激12h后2种细胞的NF-κB阳性细胞百分数差异有统计学意义(P值均<0.05),表达人HT的PAECNF-κB阳性细胞百分数比正常猪动脉内皮细胞低。结论表达人HT的PAECⅡ型活化受到抑制,人HT基因转移可能一定程度抑制异种移植急性血管排斥反应(AVR),并且可能通过NF-κB发挥作用,PAECⅡ型活化的条件是多样的。
- 马志方王广有刘秉乾李胜芝张玥马腾骧
- 关键词：基因转移技术内皮细胞
- 前列腺癌的诊断与临床分期被引量：23
- 1995年
- 回顾性分析６８例经病理学证实的前列腺癌病例，直肠指诊诊断或疑为前列腺癌的病例占８９．７％，经直肠Ｂ超检查诊断符合率为９３．８％（３０／３２），并可显示前列腺包膜、膀胱颈及精囊受累情况，前列腺活检阳性检出率可达９７；３％（３２／３３），ＣＴ检查对精囊受累及盆腔淋巴结转移的诊断有重要价值，核素骨显像是检出骨转移癌最敏感的方法。对前列腺癌的早期诊断和分期方法进行了讨论。
- 王广有马腾骧
- 关键词：前列腺肿瘤
- 肾癌临床表现在分期和诊断上的意义
- 王广有马腾骧李继学
- 关键词：肾肿瘤血尿超声波诊断红细胞增多症肿瘤分期
- 小鼠血管内皮细胞表达人DAF和CD59对其心脏在人血清灌注下做功的影响
- 2007年
- 目的探讨联合转入衰变加速因子(DAF)和CD59基因对小鼠心脏在人血清灌注下做功及组织结构的影响。方法采用受精卵显微注射技术,将人DAF和CD59基因注入昆明小鼠受精卵的原核中,选取注射后仍健康的受精卵植入假孕母鼠的输卵管中待分娩。提取足月产小鼠(G_0代)基因组DNA,以聚合酶链反应(PCR)及Southern印迹杂交确定外源基因整合情况,应用流式细胞术检测人DAF和CD59在转基因小鼠白细胞上的表达,免疫组织化学染色检测人DAF和CD59在转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的表达。取出转基因成功小鼠的心脏,在体外以人血清进行灌注,测定其做功能力,HE染色及免疫组化染色观察灌注后心脏的组织学变化以及补体C3c的沉积情况。以单一转DAF基因的小鼠为对照。结果共获得G_0代小鼠135只,经PCR及Southern印迹杂交分析,11只(8.1%,11/135)整合有人DAF和CD59外源基因,其中6只的白细胞膜表面人DAF和CD59表达阳性,强度分别为(86±6)%和(85±8)%,单转人DA F基因者(87±7)%,差异无统计学意义。人DAF及CD59仅表达于转基因小鼠心脏、肝脏及肾脏组织中的血管内皮细胞上。在人血清灌注后60min内,普通小鼠的心脏做功急剧下降,接近40min时心脏停止搏动;转DAF基因小鼠的心脏做功也下降,但仍维持在最大值的20%以上;转DAF和CD59双基因小鼠的心脏做功维持在最大值的40%以上。在人血清灌注的10～60min,转基因小鼠心脏做功能力明显强于普通小鼠心脏(P<0.05);灌注20～60min时,转双基因小鼠的心脏做功能力明显强于转DAF基因小鼠心脏(P<0.05)。普通小鼠心脏在人血清灌注后组织裂解较多见,肿胀严重,而转基因小鼠心脏组织的病理改变明显轻于普通小鼠,转双基因者的病理变化又明显轻于单一转DAF者,心肌血管中人C3c的沉积也明显少于单一转DAF者。结论血管内皮细胞特异性表达人DAF和CD59,可明显阻抑其心脏在�
- 张志宏马腾骧王广有李胜芝张月刘思金劳为德李光三
- 关键词：小鼠做功
- 使用人粘附分子-2启动子的衰变加速因子重组基因表达载体的构建及意义被引量：1
- 2001年
- 目的 :构建含人粘附分子 -2(ICAM -2)启动子的人衰变因子 (DAF)重组基因的真核细胞表达载体 ,运用于转基因动物克服异种器官排斥的研究。方法:双酶切本室已构建质粒pGEM -7Zf-DAF ,得到含人ICAM -2启动子及DAFcDNA序列的插入片段 (3.7Kb) ;双酶切pcDNA3真核表达载体 ,得到不含病毒启动子、含筛选基因Neo的一段DNA作为载体序列 (4.4Kb) ;两段DNA进行连接反应后转化细菌 ;阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定。根据人的ICAM -2启动子、DAFcDNA序列 ,设计引物行PCR特异扩增检验。结果:特异性3组酶切重组表达载体 ,产生符合设计的相应条带 ;PCR扩增出特异的318bp及1.7Kb的DNA片段 ,符合设计要求。结论 :含人ICAM
- 姚旭东马腾骧张泽李志欣李胜芝张玥王广有
- 关键词：异种器官移植衰变加速因子基因重组
- 肾盂切开气压弹道碎石术治疗肾复杂性巨大鹿角形结石被引量：6
- 2004年
- 张志宏马腾骧王广有
- 关键词：肾结石
- 人类α-1,2-岩藻糖苷转移酶在猪血管内皮细胞的表达及作用
- 2005年
- 目的:探讨人类α-1,2-岩藻糖苷转移酶(HT)基因在猪血管内皮细胞(PIECs)的表达及意义。方法:将人HT基因重组质粒通过脂质体转染进猪血管内皮细胞,经G418筛选(500mg/L),用流式细胞仪检测HT的表达,表达阳性细胞与人血清共同孵育检测细胞的生存率。结果:流式细胞仪检测结果显示,未经转染HT基因的PIECS的H抗原表达率是13.80%,平均荧光强度很低是32.39,α-Gal表达率是99.98%,平均荧光强度是1347.09;转HT基因的PIECS其H抗原表达率是40.17%B平均荧光强度是143.66,α-Gal表达率是41.15%B平均荧光强度是158.72。转HT基因的细胞在人血清的作用下生存率明显高于未转染的细胞。结论:转染HT基因的PIECs明显提高了H抗原的表达,同时降低了α-Gal的表达,为转基因动物实验探讨克服异种移植超急性排斥反应(HAR)提供理论依据。
- 李胜芝马志方刘秉乾张玥王广有马腾骧
- 关键词：转基因异种抗原
