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油菜中—未知BnRCH蛋白的E3连接酶活性分析被引量：4: 2012年; 利用本实验室前期以ATP6为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统筛选到的一个N端含有RINGv结构(RING-variant)的蛋白,暂命名为BnRCH,构建GTK-BnRCH表达载体在原核细胞E.coli BL21(DE3)中高效表达GST-BnRCH融合蛋白,并将纯化的融合蛋白加入体外泛素反应体系,发现BnRCH在ATP、泛素、E1、E2存在的条件下,能催化多聚泛素化形成,具有E3连接酶活性.; 陈存唐天元杨虹伟蔡黎杨毅李旭锋; 关键词：原核表达 E3连接酶

VDAC3与ABA受体蛋白相互作用的验证以及初步研究被引量：1: 2013年; 酵母双杂交技术在拟南芥cDNA文库中筛选得到了与ABA受体蛋白RCAR1,RCAR3均有相互作用的蛋白质VDAC3,并已获得VDAC3基因的全长.VDAC3蛋白包含有3个结构域,分别为Porin3结构域,DUF3442结构域和SEG片段,现根据结构域分布,将VDAC3截短为包含DUF3442的VDAC3N以及包含SEG的VDAC3C两段.将VDAC3全长以及分别截短的169个氨基酸(VDAC3N)及105个氨基酸(VDAC3C)的片段进行酵母转化实验,与RCAR1或RCAR3共同转化后,VDAC3,VDAC3N的共转酵母能够在缺陷型培养基上生长,并且使X-Gal显色为蓝色,而VDAC3C则不能.这验证了全长的VDAC3与RCAR1,RCAR3的存在相互作用,并发现决定VDAC3蛋白与RCAR1,RCAR3是相互作用的结构域位于N端的DUF3442结构域.; 蔡黎李德款刘志斌冯俊陈存李旭锋杨毅; 关键词：酵母双杂交系统

酵母双杂交筛选与脱落酸受体相互作用的蛋白质及其重转酵母的验证: 2012年; 脱落酸(abscisic acid,ABA)是一种重要的植物激素,它能使植物适应逆境胁迫,从而调节植物的生长发育状况.现今ABA受体已被公认为RCARs/PYR/PYLs家族蛋白.本实验通过拟南芥为模式植物,利用酵母双杂交系统共转化方法从拟南芥cDNA文库中筛选与RCAR3相互作用的蛋白质,获得多个阳性克隆,从中选取一个与生长素调节相关的基因NIT1的全长cDNA重新转化酵母验证,发现与RCAR3仍然有相互作用,排除了假阳性的可能.从而为下一步研究该基因与RCAR3的相互关系做好了准备.; 李鹰李德款张亮文国琴蔡黎李旭锋杨毅; 关键词：脱落酸酵母双杂交系统

一个与ABA信号通路相关未知基因AB的亚细胞定位研究: 2010年; 本研究通过构建一个与脱落酸(ABA)信号传导途径相关的未知基因AB和绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的重组质粒,利用基因枪技术将该重组质粒成功转入洋葱表皮细胞,观察并确定了该基因编码蛋白细胞核和细胞质的亚细胞定位,为进一步研究该未知基因的生物学功能及其分子机制提供了思路.; 张亮李燕杨笑瑒吴明杰蔡黎杨毅; 关键词：绿色荧光蛋白基因枪转化亚细胞定位

ABA受体RCAR1/PYL9相互作用蛋白质的筛选及初步研究被引量：13: 2011年; 使用拟南芥作为模型,采用酵母双杂交系统筛选出和ABA受体RCAR1/PYL9有相互作用的蛋白质,以更深入的研究RCAR1/PYL9的功能.首先利用反转录PCR方法获得拟南芥的cDNA,然后通过酵母双杂交系统,用拟南芥RCAR1/PYL9作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行筛选,并获得多个阳性克隆.对该菌落进行进一步的鉴定得到与RCAR1/PYL9具有相互作用的蛋白质,这对进一步研究RCAR1/PYL9及其相互作用蛋白质在ABA信号转导途径中的作用及地位奠定了基础.; 李德款张亮彭梅芳胡伟芳李鹰蔡黎李旭锋杨毅; 关键词：酵母双杂交系统 CDNA文库

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蔡黎