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组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275显著改变肝癌HepG2细胞中exosome的免疫相关分子种类和含量被引量：3: 2012年; 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275修饰的肝癌细胞exosome所含肿瘤抗原和免疫分子的变化。方法采用蔗糖梯度离心联合超滤技术分离和纯化肝癌HepG2细胞在MS-275处理前后分泌的exosome，并用免疫电镜和Westemblot杂交技术分别观察exosome表达热休克蛋白70、人类白细胞抗原（HLA）-Ⅰ、HLA—Ⅱ、NY-ESO-1和CD80等免疫分子的变化。MS-275处理前后样本均数的比较用配对f检验。结果经MS-275处理后，肝癌HepG2细胞分泌exosome的数量和总蛋白含量均较处理前显著增加，分别为（303．0±3．2）×10^6个／ml比（236．0±2．8）×10^6个／ml和（1．37±0．18）mg比（0．78±0．11）mg，t值分别为27．29和4．85，P值均〈0．01。免疫电镜下，100个exosome所含免疫分子HSP70、HLA—I、HLA-DR和CD80胶体金颗粒数均明显增加，分别为（79．8±5．2）个比（60．2±3．2）个、（65．6±6．3）个比（38．4±2．7）个、（26．9±2．7）个比（3．0±0．16）个和（42．7±5．2）个比（28．9±1．9）个，t值分别为5．56、6．87、15．3和4．32，P值〈0．01或〈0．05；NY—ESO-1所含胶体金颗粒数无明显变化[（40．2±4．6）个比（32．2±4．5）个，t=2．15，P〉0．051。Westernblot结果也证实了上述免疫电镜的发现。结论MS-275修饰肝癌细胞能显著改变exosome各种免疫分子的含量和种类，有利于增强exosome的免疫刺激作用，为体外大规模制备抗肝癌亚细胞瘤苗提供了新思路。; 李秋文肖文华萨仁高娃董伟伟赵惠霞段昕妤朱建华康欢荣付艳郝怡鑫王如良宋林萍叶明; 关键词：肝细胞组蛋白去乙酰化酶抑制剂 EXOSOME

转录水平RNA干扰肝素酶基因对肝癌细胞侵袭能力的影响: 2014年; 目的探讨转录水平基因沉默(TGS)技术和转录后水平基因沉默(PTGS)技术对肝素酶(HPA)基因干扰效果及其对肝癌SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。方法从HPA基因启动子区和编码区分别设计并合成TGS和PTGS的小干扰RNA(siRNA),并转染肝癌细胞SMMC-7721;实时半定量PCR和Western blotting检测TGS和PTGS siRNA转染后48、72和96h HPA的表达,并设空白组作为对照;Transwell小室实验检测干扰后SMMC-7721细胞的侵袭能力。结果 TGS和PTGS两种技术在转染48h后,从mRNA和蛋白水平上均能成功干扰HPA表达;转染后72h,PTGS组HPA恢复表达,而TGS组仍保持沉默;转染后96h,两组HPA均恢复表达。Transwell小室实验表明,TGS和PTGS组HPA基因均能使SMCC-7721的穿膜细胞数减少,TGS组效果更明显。结论 TGS技术沉默肝癌SMMC-7721细胞中HPA基因的能力优于PTGS技术,并使肝癌细胞的侵袭能力显著降低。; 张彩虹肖文华董伟伟赵惠霞段昕妤李秋文郝怡鑫王如良朱建华叶明; 关键词：肝素酶基因肝癌细胞

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赵惠霞

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