丁渭
- 作品数：32 被引量：51H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pcDNA-GPC3真核表达载体的构建及鉴定
- 2012年
- 目的构建人类GPC3重组真核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因序列,应用T克隆载体及pcDNA真核表达载体重构,将质粒转化进入HLE人肝癌细胞系,进行荧光免疫方法检测。结果 测序结果序列正确,荧光染色转染质粒的HLE细胞可见细胞浆和细胞膜上有GPC3的表达。结论成功构建真核表达载体pcDNA-GPC3,并在真核细胞中可以表达。
- 李莉李庆乔路新丁渭吕福东
- 关键词：GPC3基因表达融合蛋白
- 核苷类似物对小鼠肝脏线粒体DNA D-loop区突变的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨长期使用核苷类似物(NA)是否导致肝脏线粒体DNA(mt DNA)D-loop区损伤。方法选取7周龄Balb/C小鼠25只,将其随机分为对照组和4个NA实验组。对照组腹腔内注射双蒸水,各实验组分别给予司他夫定(D4T)50 mg/kg、齐多夫定(AZT)100 mg/kg、拉米夫定(3TC)50 mg/kg和去羟肌苷(DDI)50 mg/kg,分别腹腔内注射,每周5次,共12周。取各组小鼠肝组织,通过激光捕获显微切割获取肝细胞,对mt DNA D-loop区克隆和测序。结果 DDI组肝组织中mt DNA拷贝数(0.440±0.040)和肝细胞中mt DNA拷贝数(0.464±0.013)均较对照组[(1.000±0.080)、(1.000±0.058)]显著减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区与参考序列的平均距离为(0.0037±0.0019),3TC组为(0.0031±0.0017),DDI组为(0.0035±0.0028),与对照组(0.0018±0.0017)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区平均同义替换率(d S)为(0.0060±0.0010),3TC组为(0.0050±0.0007),与对照组(0.0030±0.0007)比较差异有统计学意义(P<0.05)。DDI组肝细胞D-loop区平均错义替换率(d N)为(0.0020±0.0010),与对照组(0.0008±0.0003)比较差异有统计学意义(P<0.05)。AZT组肝组织D-loop区的"A→G"转换率(0.001 90)较对照组(0.000 62)高,差异有统计学意义(P<0.05)。D4T组肝细胞D-loop区的"T→C"转换率为0.001 28,3TC组为0.001 75,较对照组(0.000 58)显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长期暴露于核苷类似物可导致小鼠肝细胞mt DNA D-loop区病变,主要突变类型为转换,主要的转换为"A→G"和"T→C"。
- 张维乔录新丁渭陈德喜张玉林
- 关键词：D-LOOP区线粒体DNA肝细胞核苷类似物
- 多重定量荧光PCR快速检测染色体非整倍体疾病被引量：3
- 2012年
- 目的探讨多重定量荧光PCR快速检测染色体非整倍体标本疾病的价值。方法利用21,18,13号及X染色体上15个STR(短串联重复序列)位点进行多重PCR扩增,在24h内快速检测染色体非整倍体标本。通过建立两个多重PCR体系,对921例临床标本(包括外周血、绒毛膜及羊水标本)进行检测。结果 921例标本中915例结果与染色体核型结果相符,其中2例45,X外周血标本,2例21-三体综合征标本、1例46,XX标本未检出,1例羊水标本分析失败,与传统染色体核型分析方法相比,其灵敏度及特异度分别为97.64%、99.85%。结论多重定量荧光PCR技术可用于快速诊断非整倍体疾病。
- 江帆丁渭王霞袁玉枝屈艳霞陈桂兰卢航陈华云
- 关键词：21-三体综合征
- 司他夫定中枢神经毒性研究
- 目的探讨核苷类抗HIV药物司他夫定(D4T)的中枢神经毒性。方法原代培养小鼠大脑皮层神经细胞,应用不同浓度D4T作用于细胞,活细胞Calcein-AM/PI染色法检测神经细胞凋亡;免疫荧光法检测神经元细胞形态学变化;实时...
- 张玉林石英乔录新张宏海孙玉丁渭张彤吴昊陈德喜
- 文献传递
- HIV-1感染者中枢神经系统的病毒学特征研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨HIV-1感染者中枢神经系统(CNS)的病毒学特征。方法通过克隆测序分析病毒亚型,观察CNS中HIV-1变异性和离散率;依据V3环11/25法则并结合10例有偿献血HIV-1感染者尸检脑组织标本免疫荧光试验分析中枢神经HIV-1复合受体的使用。结果有偿献血人群感染的HIV-1显示B和B′亚型特征,脑脊液(CSF)和外周血序列有嵌合现象;CSF C2-V5区序列变异性明显低于外周血,两者的离散率差异无统计学意义;依据11/25法则分析V3环序列可见中枢神经HIV-1大多数使用CCR5复合受体。结论 CNS HIV-1病毒变异性明显小于外周血;CNS HIV-1具有CCR5嗜性。
- 丁渭张玉林乔录新徐树莹宋凤丽陈德喜
- 关键词：中枢神经系统人类免疫缺陷病毒1型病毒学特征
- 氧化损伤在HIV相关神经认知损害中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的研究由活性氧诱导的DNA氧化损伤在感染了艾滋病毒的患者中枢神经系统组织中的积累。方法利用感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV-1)的患者的尸检脑组织的额叶皮质来分析HIV-1亚型,采用免疫荧光染色、定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和PCR克隆测序分析脑细胞中核和线粒体DNA损伤。结果中枢神经系统感染HIV会导致大脑细胞中核和线粒体DNA基因组的损伤。对HIV相关的神经认知功能障碍患者的尸检皮质组织进行检测可以发现有高水平的核和线粒体DNA 8-氧鸟嘌呤(8-hydroxyguanine,8-oxoG)损伤。在HIV相关的神经认知障碍的一个亚型脑组织中有逐渐增加的线粒体DNA突变和缺失,这与病情已经得到控制的情况大为不同。结论在HIV相关的神经认知障碍患者的中枢神经系统中高水平的氧化损伤对HIV引发神经细胞和胶质细胞的神经免疫和凋亡发挥了重要作用。
- 丁渭张玉林乔录新宋凤丽徐树莹陈德喜
- 关键词：活性氧人类免疫缺陷病毒线粒体线粒体DNA
- 中国HIV-1感染人群神经认知损害初步筛查被引量：16
- 2012年
- 目的初步调查中国人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)感染者神经认知损害情况。方法通过国际HIV痴呆量表和神经心理评估,结合症状评分和临床相关资料对我国HIV-1感染人群HIV相关神经认知障碍(HIV-1associated neurocognitive disorders,HAND)患病情况进行初步调查。结果①我国HIV-1感染人群HAND患病率为37%;②认知障碍是主要症状,其次是行为异常;③脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)病毒载量与外周血病毒载量密切相关,但与HAND无关,同样HAND与CD4计数也无关。结论结果显示中国HIV-1感染人群HAND患病率约为37%,以认知障碍症状为主;CSF与外周血病毒载量呈一致性变化,但是CD4计数和病毒载量不能作为诊断和预测HAND病情的指标,上述结果需要进一步的大样本调查予以证实。
- 宋凤丽张玉林乔录新丁渭徐树莹张彤吴昊陈德喜
- 关键词：患病率
- 唐氏综合征无创性产前诊断的研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨应用逆转录-多重链接探针扩增技术(RT-MLPA)检测RNA-SNP进行临床无创产前诊断唐氏综合征的可行性。方法收集217例14孕周以上(含14孕周)孕妇的外周血血清,抽提胎儿游离RNA,RT-MLPA技术扩增SNP位点片段,并对其进行毛细管电泳分析,通过对杂合SNP位点峰面积比值进行判断,并选择唐氏综合征产前诊断金标准-染色体核型分析结果作为对照方法。结果检测到阳性样本61例,检测的灵敏度和特异度分别为92.42%和99.30%。结论逆转录-多重链接探针扩增技术检测RNA-SNP进行临床无创产前诊断唐氏综合征的方法在唐氏综合征的产前筛查中具有广泛的应用前景。
- 邓艳华陈华云丁渭郑芸李明
- 关键词：SNP无创产前诊断唐氏综合征
- 多重实时荧光定量PCR检测急性肝炎患者HBV和HCV方法的建立与意义分析被引量：2
- 2014年
- 目的建立一种新的可以快速筛查急性肝炎患者HBV和HCV感染的多重实时荧光定量PCR方法。方法收集596例急性肝炎患者血清或血浆样本,应用自主构建的多重实时荧光定量PCR方法同时检测HBV和HCV,同时应用HBV和HCV单管检测试剂进行检测分析。结果新建立的多重实时荧光定量PCR体系,可以有效地检测HBV和HCV的阳性质控品及阳性样本。多重实时荧光定量PCR体系特异性较好,检测HBV和HCV时,两者之间无交叉反应,且以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性;多重实时荧光定量PCR体系检测HBV、HCV的灵敏度分别为20 IU/ml、50 IU/ml;多重实时荧光定量PCR体系精密度好,检测HBV、HCV的CV值分别为0.11%、0.096%。在检测临床样本时,多重复合体系检测血清或血浆中HBV和HCV的检出率与单独检测HBV和HCV具有很好的一致性,且HBV和HCV的一致率分别达到97.7%(k=0.952)、98.8%(k=0.976);同时有6例样本出现HBV和HCV共感染。结论新型多重实时荧光定量PCR方法对快速检测及筛查HBV和HCV较快捷,而且特异性好、灵敏度高、精密度好。因此多重实时荧光定量PCR方法对2种肝炎病毒的检测具有重要意义。
- 陈泽惠李欣钰肖湘文丁渭刘淑园陈华云
- 我国HIV药物临床试验情况分析
- 2023年
- 1987年AZT成为首个被证实能抑制HIV的药物,随后抗病毒药物不断研发并应用于临床,1996年HAART的出现是人类治疗与控制艾滋病的里程碑,艾滋病从绝症逐渐转化为可防可控的慢性传染病[1]。我国目前艾滋病药物注册临床试验的相关数据十分匮乏。本研究通过分析国家药品监督管理局药物临床试验登记与信息公示平台和国产药品及进口药品数据查询系统的数据.
- 谢玉兰丁渭贾敏杨君于海滨
- 关键词：艾滋病药物
