陈德喜
- 作品数：275 被引量：664H指数：13
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 细胞间粘附分子5(ICAM-5)在HIV相关神经损伤中的保护性作用
- 2013年
- 为探究细胞间粘附分子5(intercellular adhesion molecule 5,ICAM-5)在HIV相关神经认知损伤中的作用,用ELISA法测定HIV感染者脑脊液样本和体外动物神经细胞培养体系中可溶性细胞间粘附分子5(ICAM-5s)的含量;蛋白印迹法检测ICAM-5蛋白表达;免疫荧光法观察神经细胞形态学变化;用CytoTox 96非放射性细胞毒性实验检测神经细胞死亡率.抗ICAM-5单克隆抗体Cy3标记的免疫荧光染色结果显示,ICAM-5可在神经元细胞的胞体和突起表达,且经HIV神经毒性蛋白gp120 500pmol/L处理的神经细胞平均突起长度显著小于无gp120处理的对照组;体外神经细胞培养体系中,gp120+基质金属蛋白酶3(MMP3)实验组的ICAM-5s含量显著高于gp120组,且前者神经元细胞的死亡率高于后者;在HIV感染者中,HIV相关神经认知障碍(HIV associated neurocognitive disorder,HAND)患者脑脊液中ICAM-5s的水平显著高于认知功能正常的患者.结果表明,ICAM-5可能具有标记神经细胞突起的潜能,但其确切性有待进一步实验验证;ICAM-5与HIV相关神经认知功能损伤相关,具有潜在的神经元细胞保护作用.
- 宋凤丽袁霖丁渭乔录新徐树莹陈德喜张玉林
- 关键词：人类免疫缺陷病毒
- 雨课堂在传染病教学中的应用与推广被引量：4
- 2022年
- 雨课堂是由清华大学与学堂在线于2016年共同研发推出的一款智慧型教学软件。借助此教学工具,可以将移动互联网、云计算等当前最高端前沿的信息技术融入到教学课堂中,充分释放教与学的能量。当前许多国内高校的教学场景中已出现雨课堂的身影,在首都医科大学附属北京佑安医院的传染病教学中,雨课堂也逐渐被应用。总结传染病教学特点和雨课堂在其医院传染病教学中的具体应用流程和现状,针对出现的问题及解决措施进行了阐述与分析,旨在为高校师生更加合理地使用雨课堂提供借鉴和参考,从而帮助更多的师生受惠于雨课堂。
- 时红波焦彦时红林陈德喜
- 关键词：传染病教学
- 人类免疫缺陷病毒相关痴呆症的治疗
- 2012年
- 人类免疫缺陷病毒相关痴呆症（HAD）已成为HIV感染者重要的慢性并发症之一，严重威胁到病人的生命和生活质量。我们在详细叙述了该病的系统诊断^[1]的基础上，以下根据美国神经协会有关该病的诊治指南，结合最新国际研究成果重点阐述HAD的治疗。
一、治疗原则
HAD的治疗原则是：增加脑脊液药物浓度，
- 张玉林宋凤丽吴昊陈德喜
- 关键词：痴呆症慢性并发症诊治指南药物浓度
- 细胞自噬在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭中的表达被引量：8
- 2016年
- 目的利用D-氨基半乳糖／脂多糖（D—GalN／LPS）诱导的小鼠急性肝衰竭模型，研究细胞自噬在肝衰竭疾病进展过程中的表达及其作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射nGalN／uIS建立小鼠急性肝衰竭模型。动物实验分组：对照组、D—GalN／LPS诱导肝衰竭模型2h组、D-GalN／LPS诱导肝衰竭模型4h组和D-GalN／LPS诱导肝衰竭模型6h组。检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）评价肝脏功能，观察肝脏组织病理变化评价肝脏损伤情况，实时荧光定量PCR检测自噬相关基因表达，Westernblot测定小鼠肝组织中自噬相关蛋白表达，荧光显微镜观察肝衰竭进展过程中自噬体的表达情况。多组样本均数的两两比较采用One-wayANOVA分析（方差齐者用LSD—t检验，方差不齐者用Games-Howell法），尸〈0．05为差异有统计学意义。结果急性肝衰竭模型组肝功能随着D—GalN／I鹧刺激的进展逐渐受损：ALT、AST在4h后显著增高，肝脏组织病理损伤随时间逐渐加重，6h达到急性肝衰竭标准；自噬相关基因ATG-7、ATG-5、Beclin-1、Lamp-1和LC3amRNA和蛋白在急性肝损伤早中期（2h和4h）表达增高，而进展至肝衰竭（6h）后表达下降；荧光显微镜观察发现给予D—GalN／LPS在4h时间点自噬体的表达最多。结论在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导急性肝损伤早中期，自噬表达逐渐增强，而进展至肝衰竭后自噬表达下降，因此细胞自噬可能在急性肝衰竭的发病机制中发挥着重要作用。
- 魏琳琳张向颖张莉杨蓉蓉时红波温韬陈德喜段钟平任锋
- 关键词：自噬肝脏脂多糖类
- 1型HIV感染多重PCR检测方法的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立检测人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的多重巢式PCR（nPCR）和多重逆转录PCR（RT-PCR）方法。方法针对HIV-1的gag、pol和gp41区设计3套引物，分别建立检测HIV DNA的多重nPCR和检测HIV RNA的多重RT—PCR方法；以建立的PCR方法对150例HIV抗体阳性患者及50例阴性患者进行检测，以ELISA／免疫印迹实验（Westen blot，WB）相结合的抗体检测结果（ELISA／WB）为金标准，计算所建立的PCR方法的检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确性、可重复性；分别用建立的多重nPCR和多重RT-PCR检测73份阳性标本，并与HIV-1核酸序列扩增技术（NASBA法）进行检测敏感度的比较；对43份检测阳性的DNA标本进行亚型鉴定。结果多重nPCR的检测敏感度为98．0％（147／150），多重RT—PCR的敏感度为91．3％（137／150），2种方法的特异度均为100％（50／50），多重nPCR和多重RT—PCR的阳性预测值分别为98．0％（147／150）和91．3％（137／150），阴性预测值均为100％（50／50），准确性分别为98．5％和93．5％。可重复性分别为96．7％（87／90）和93．3％（84／90）；多重nPCR的检测敏感度（97．3％）高于NASBA法（72．6％），差异有统计学意义（X^2=17．34，P〈0．01），多重RT—PCR的检测敏感度（79．5％）与NASBA法相比，差异无统计学意Y-（X。=0．94，P=0．332）；检测的43份HIV DNA阳性标本分别为37份B’亚型、5份AE亚型和1份BC亚型。结论成功地建立了多重nPCR和多重RT—PCR方法，操作简便、价格低廉，具有较高的敏感度和特异度和可重复性，能覆盖我国最主要的流行病毒株。
- 代丽丽陈德喜石英魏飞力绳波吴亚松柳雅立张洪海梁连春张彤吴昊
- 关键词：HIV感染HIV-1聚合酶链反应逆转录聚合酶链反应
- 增强型绿色荧光蛋白-神经标识真核表达载体构建及在细胞内的表达
- 2013年
- 目的构建可转染神经胶质细胞和神经元的增强型绿色荧光蛋白-神经标识（EGFP—ID）真核表达载体，为神经突起损伤活体研究提供技术方法。方法采用PCR方法分别从质粒pEGFP-N1载体和大鼠脑组织基因组DNA中扩增EGFP和ID序列。通过T4DNA连接酶将纯化后的PCR产物EGFP与经过BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切的pcDNA4．1-hisB载体连接。将经克隆测序确定的pcDNA4．1-EGFP经由NotⅠ和XbaⅠ双酶切并与纯化的PCR产物ID连接，再次克隆测序确定为pcDNA4．1-EGFP-ID。将pcDNA4．1-EGFP与pcDNA4．1-EGFP-ID在转染试剂Fugene6介导下转染人神经胶质瘤U87细胞和小鼠原代培养神经元，通过倒置荧光显微镜观察EGFP在2种细胞内的分布。此外，用50μmol／L核苷类似物司他夫定处理神经元8d，第8天末观察EGFP-ID示踪细胞突起发育情况，并与免疫荧光检测结果作比较。结果成功扩增得到EGFP和ID基因片段。重组得到EGFP-ID真核表达载体,该载体携带的EGFP基因在U87细胞和神经元内表达并布满细胞突起，示踪神经元突起形态变化的结果与免疫荧光观察结果一致。结论pcDNA4．1-EGFP-ID能够介导EGFP基因在神经元和胶质细胞突起内表达，从而直观再现神经突起形态特征。
- 乔录新张玉林丁渭徐树莹宋凤丽张彤吴昊陈德喜
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白真核表达载体神经突起形态学
- 论如何提升医学博士研究生的科研执行力被引量：1
- 2016年
- 提升医学博士研究生的科研执行力对于医学科研事业的发展至关重要。分析了医学博士研究生执行力欠缺的原因并提出了提升医学博士研究生科研执行力的措施和保障。
- 谢放黄成宋晨朝陈德喜
- 关键词：博士研究生
- 3Δ40p53对p53促肿瘤细胞凋亡作用的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨p53亚体Δ40p53对p53促肿瘤细胞凋亡作用的影响。方法体外培养HCT116-p53-/-结肠癌细胞系（内源性表达Δ40p53）、HCT116-p53＋/＋结肠癌细胞系（内源性表达野生型p53）和H1299肺癌细胞系（p53缺失），感染p53腺病毒使p53过表达，转染Δ40p53质粒使Δ40p53过表达。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Δ40p53和p53 mRNA，实时荧光定量PCR检测Δ40p53对p53转录水平的影响，Western blot检测相关蛋白的表达，免疫共沉淀检测Δ40p53与p53相互作用关系，Calcein-AM/PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果Δ40p53在HCT116-p53-/-细胞中能够稳定转录并表达。实时荧光定量PCR和Western blot检测显示，Δ40p53对p53的转录及表达水平无影响。免疫共沉淀检测显示，Δ40p53与p53能相互结合。Calcein-AM/PI染色显示，H1299-Control组、HCT116-p53-/--Control组、H1299＋p53组、HCT116-p53-/-＋p53组、H1299＋奥沙利铂（Oxa）组、HCT116-p53-/-＋Oxa组、H1299＋p53＋Oxa组和HCT116-p53-/-＋p53＋Oxa组的细胞凋亡率分别为（2.50±0.47）%、（2.40±0.32）%、（5.20±0.58）%、（4.10±0.18）%、（22.40±1.73）%、（19.30±1.11）%、（29.90±1.15）%和（39.30±2.26）%。H1299＋p53＋Oxa组与HCT116-p53-/-＋p53＋Oxa组的细胞凋亡率差异有统计学意义（t＝3.721，P＝0.021）。Calcein-AM/PI染色显示，H1299-Control组、H1299＋Δ40p53组、H1299＋p53组、H1299＋p53＋ Δ40p53组、H1299＋Oxa组、H1299＋Δ40p53＋Oxa组、H1299＋p53＋Oxa组和H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率分别为（2.60±0.35）%、（2.20±0.17）%、（4.80±0.49）%、（4.90±1.10）%、（20.30±1.10）%、（19.60±1.45）%、（27.90±1.39）%和（35.20±1.43）%，H1299＋p53＋Oxa组与H1299＋p53＋Δ40p53＋Oxa组的细胞凋亡率差异有统计学意义（t＝3.629，P＝0.022）。流式细胞术检测显示，H1299-Control组、H1299＋Δ40p53组、H1299＋p53组、H1299＋p53＋Δ40p53组、H1299＋
- 王贵士赵红伟乔录新单军奇侯庆生陈德喜郭洪亮
- 关键词：肿瘤P53凋亡
- 小型集合HIV RT-PCR方法的建立及其在MSM人群窗口期检测中的应用
- 目的建立的小型集合艾滋病病毒(HIV)RNA逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),并将其应用于男男同性恋及其他高危人群窗口期的检测。方法将10份待测标本混合组成一个集合,高速离心富集病毒,提取病毒RNA;设计针对覆盖我国...
- 刘志英陈德喜焦艳梅魏飞力徐萌张彤黄晓婕徐小宁吴昊
- 慢性肝病患者营养评价与干预创新体系的建立及推广应用
- 孟庆华于红卫李娟侯维赵娟朱跃科王金环刘海霞董金玲时淑云谢放李雪梅陈德喜刘雪梅王克菲
- 中国有慢性乙肝和丙肝患者约1.03亿人,每年因各种肝病死亡人数超过30万。肝硬化营养不良发病率高达65％～90％,是影响肝病预后的重要因素。课题组经过10余年研究,创建了慢性肝病患者营养评价及营养干预体系,有力推动了中国...
- 关键词：
- 关键词：慢性肝病
