习杨
- 作品数：4 被引量：14H指数：1
- 供职机构：华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 特异性抑制伪狂犬病毒EP0基因表达的siRNA分子的合成与筛选
- 2006年
- EP0基因是伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的早期基因,可能与病毒复制及潜伏感染等有关。为了筛选特异性抑制EP0基因表达的siRNA序列,本研究按照Ambion公司公布的siRNA分子设计原则,设计并合成了3个针对PRVEa株EP0基因的siRNA模板EP04、EP08和EP12,分别克隆到以CMV启动子的siRNA表达载体pSilencer4.1-CMVneo中,构建相应的重组表达质粒p4.1-EP04、p4.1-EP08和p4.1-EP12。同时,将EP0基因的编码区克隆到真核表达载体pEGFP-N3中,按照读码框架与EGFP基因的5’端融合,获得重组表达质粒pEP0-EGFP。将p4.1-EP04、p4.1-EP08、p4.1-EP12和阴性对照质粒p4.1-NK分别与pEP0-EGFP共转染IBRS-2细胞,荧光显微镜观察、流式细胞仪和半定量RT-PCR检测结果表明,三个siRNA分子均能不同程度地抑制EP0基因的表达,抑制效率从高到低依次为EP08、EP12和EP04;在进一步的病毒感染实验中也得到了与细胞转染模型一致的结论。这为深入研究EP0基因在PRV复制和潜伏感染中的作用奠定了基础。
- 习杨周锐郭洪胡勤芹方六荣陈焕春
- 关键词：SIRNA伪狂犬病毒EPO
- 伪狂犬病毒EP0基因特异性siRNA分子的合成与筛选及对病毒复制的影响
- 伪狂犬病毒/(Pseudorabies virus，PRV/)是一种嗜神经的α疱疹病毒，引起猪的繁殖障碍和多种家畜与野生动物的致死性感染，严重危害世界养猪业的健康发展。一旦感染猪群即可在神经组织中建立潜伏感染。在潜伏感染...
- 习杨
- 关键词：伪狂犬病毒抗体制备SIRNA
- 文献传递
- 伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布被引量：14
- 2008年
- 潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒(PRV)gG-/LacZ+标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪,建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型,再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示,阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势,而注射地塞米松后,阳性细胞数量在上述组织中显著增加。
- 龙晓婷刘俊磊郭洪习杨邱德新陈焕春周锐
- 关键词：伪狂犬病毒地塞米松免疫组织化学染色
- 特异性抑制伪狂犬病毒EPO基因表达的siRNA分子的合成与筛选
- 2009年
- EPO基因是伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的早期基因,可能与病毒复制及潜伏感染等有关。为了筛选特异性抑制EPO基因表达的siRNA序列,本研究按照Ambion公司公布的siRNA分子设计原则,设计并合成了3个针对PRVEa株EPO基因的siRNA模板EP04、EP08和EP12,分别克隆到以CMV启动子的siRNA表达载体pSilencer4.1-CMVneo中,构建相应的重组表达质粒p4.1-EP04、p4.1-EP08和p4.1-EP12。同时,将EPO基因的编码区克隆到真核表达载体pEGFP-N3中,按照读码框架与EGFP基因的5'端融合,获得重组表达质粒pEPO-EGFP。将p4.1-EP04、p4.1-EP08、p4.1-EP12和阴性对照质粒p4.1-NK分别与pEPO-EGFP共转染IBRS-2细胞,荧光显微镜观察、流式细胞仪和半定量RT-PCR检测结果表明,三个siRNA分子均能不同程度地抑制EPO基因的表达,抑制效率从高到低依次为EP08、EP12和EP04;在进一步的病毒感染实验中也得到了与细胞转染模型一致的结论。这为深入研究EPO基因在PRV复制和潜伏感染中的作用奠定了基础。
- 习杨周锐郭洪胡勤芹方六荣陈焕春
- 关键词：SIRNA伪狂犬病毒EPO
