公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

转录因子p53通过激活Ⅰ型干扰素通路抑制登革病毒感染被引量：2: 2014年; 目的：探讨转录因子p53在登革病毒感染中的作用。方法用逆转录病毒载体介导的RNA干扰技术构建p53低表达的人肝癌细胞株HepG2，并采用Western blot 进行鉴定。设定野生组和干扰组，分别用2型登革病毒感染。采用Vero细胞噬斑法检测病毒滴度；间接免疫荧光检测病毒增殖；流式细胞术检测病毒感染后细胞凋亡；酶联免疫吸附试验检测IFN-β分泌。结果与野生组比较，干扰组p53表达明显下调，表明构建p53低表达的HepG2细胞株成功。登革病毒感染24 h后，干扰组病毒滴度比野生组高100倍；免疫荧光显示干扰组发绿色荧光的细胞数明显多于野生组，说明p53抑制了登革病毒的感染。但是，登革病毒感染24 h后两组凋亡细胞的数目并没有明显差异，而野生组IFN-β分泌量增加6倍。结论转录因子p53抑制登革病毒感染可能不是通过促进细胞凋亡，而是通过激活Ⅰ型干扰素通路来发挥作用。; 李国利张俊磊胡艳玲孙厚良石中全李小山刘佳饶贤才胡福泉; 关键词：登革病毒 P53 细胞凋亡干扰素

登革-日本脑炎嵌合病毒样颗粒的设计与构建被引量：2: 2011年; 目的设计构建登革-日本脑炎嵌合蛋白表达载体,制备嵌合病毒样颗粒。方法根据登革病毒样颗粒的形成机制及日本脑炎病毒中和性抗原表位的分布,设计并构建登革-日本脑炎嵌合蛋白表达载体,转染BHK-21细胞,筛选能表达目标蛋白的G418抗性克隆,收集细胞培养上清,纯化病毒样颗粒,用Western-blot和电镜检测病毒样颗粒的形成。结果用RT-PCR扩增、酶切和连接等分子生物学方法成功构建了序列及阅读框均正确的重组表达质粒pCI-SMEJ-14#;将该质粒转染BHK-21细胞,经0.6 g/LG418筛选获得4个能表达目标嵌合蛋白的克隆,从培养的细胞上清中能纯化出直径30~100 nm的病毒样颗粒。结论所设计的登革-日本脑炎病毒嵌合蛋白能在BHK-21细胞中产生病毒样颗粒,为制备新一代登革-日本脑炎嵌合型疫苗奠定了良好基础。; 胡珍尚伟龙张俊磊朱军民杨杰刘佳方昕袁文常程航胡晓梅饶贤才; 关键词：登革病毒日本脑炎病毒病毒样颗粒

中药荷叶铁线蕨提取液体外抑菌活性研究被引量：10: 2011年; 目的对荷叶铁线蕨的体外抑菌作用进行初步研究。方法用管碟法测定荷叶铁线蕨提取液的抑菌圈大小进行抑菌实验,并采用二倍稀释法测定其对敏感菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果荷叶铁线蕨提取液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌无抑菌作用,而对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌具有明显的抑菌作用,其中对铜绿假单胞菌作用较强。结论荷叶铁线蕨提取液对革兰阴性菌具有一定抑菌作用。; 李国利陈洪源孙厚良胡艳玲张俊磊刘佳; 关键词：荷叶铁线蕨抑菌最低抑菌浓度

微泡增强的超声空化阻断肿瘤微循环的初步研究: 目的研究微泡增强的超声空化阻断肿瘤微循环的可行性。方法 26只皮下VX2肿瘤荷瘤兔随机分为超声微泡组、单纯超声组及假照组。超声微泡组经耳缘静脉推注微泡联合超声辐照肿瘤,单纯超声组以生理盐水代替微泡,假照组超声假照。各组治...; 高顺记李佩倞赵洋刘政刘佳张婵谭开彬高云华; 关键词：微泡空化肿瘤新生血管; 文献传递

荷叶铁线蕨水提液对人胚肝细胞增殖和功能的影响被引量：4: 2011年; 目的:研究荷叶铁线蕨对人胚肝细胞增殖和功能的影响。方法:人胚肝细胞L-O2 96孔板104/孔培养,经质量浓度为1 g.mL-1荷叶铁线蕨水提液梯度稀释后处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖情况;溴甲酚绿比色法检测白蛋白分泌水平;酶标仪法测定乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果:荷叶铁线蕨水提液可以促进人胚肝细胞增殖,且具有剂量依赖性;在药物质量浓度为100 g.L-1时细胞白蛋白分泌量达到最高2.14 g.L-1,并显著降低了LDH的活力(P<0.05)。结论:荷叶铁线蕨水提液可以促进人胚肝细胞增殖,增强细胞保肝降酶作用。; 李国利陈洪源孙厚良胡艳玲张俊磊刘佳; 关键词：荷叶铁线蕨人胚肝细胞细胞增殖肝功能

病毒介导的P53低表达HepG2细胞株的建立: 2012年; 目的构建干扰P53的逆转录病毒载体,建立稳定低表达P53的HepG2细胞株。方法合成干扰P53基因的寡核苷酸序列插入pMSCV-hyg-U6质粒,转化受体菌DH5α,经酶切测序鉴定后瞬时转染HepG2细胞,通过半定量RT-PCR方法检测P53 mRNA表达水平评估干扰效果;选择干扰效果最好的重组质粒转染PT67细胞进行病毒包装,获得逆转录病毒颗粒感染HepG2细胞,通过Hygromycin筛选获得多个细胞克隆,Western blot检测P53蛋白的表达情况;选择P53表达水平最低的细胞克隆。通过5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导凋亡实验,检测P53低表达的HepG2细胞p53通路介导的细胞凋亡情况。结果经酶切和测序验证成功构建重组病毒载体;瞬时转染HepG2细胞后P53 mRNA表达下调;病毒颗粒感染HepG2细胞后P53的mRNA、蛋白表达下调;用5-FU处理后P53低表达HepG2细胞凋亡水平明显低于对照。结论成功构建了干扰P53的逆转录病毒载体,建立了P53低表达HepG2细胞株,明显阻断了P53通路依赖的细胞凋亡。; 刘佳张俊磊李庆伟韩俊峰徐小峰王嘉丽陈炜饶贤才李国利; 关键词：逆转录病毒 P53 HEPG2

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a相互作用蛋白的筛选被引量：6: 2010年; 目的通过建立细菌双杂交技术,筛选MRSA中与PBP2a相互作用的蛋白。方法利用PCR扩增,获得PBP2a蛋白转肽酶活性区(TPase)的编码基因,插入pRBR构建成诱饵质粒pBR-PBP2a。提取MRSA N315株基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到pRAC质粒的BamHⅠ位点,获得基因组DNA表达文库;将文库质粒转化入含诱饵质粒pBR-PBP2a的报告菌株KS1,利用细菌双杂交技术进行筛选,获得与诱饵质粒编码的融合蛋白相互作用的猎物,对猎物中编码序列进行DNA测序和生物信息学分析,确定与PBP2a发生相互作用的蛋白质或多肽。结果成功构建了pBR-PBP2a诱饵质粒,可表达PBP2a TPase与大肠埃希菌RNA聚合酶α亚单位N端序列的融合蛋白。所构建的MRSA N315株基因组文库覆盖率达9倍,满足文库筛选的需要。将文库转化含诱饵质粒和报告基因的KS1宿主菌,利用细菌双杂交技术经3次筛选,共获得9个猎物克隆,其报告基因的活性均升高2倍以上,对9个猎物质粒进行了测序,信息学分析表明它们均来自于MRSA N315株基因组,插入片段最长者648 bp,最短者334 bp,9个插入片段中含14个编码基因,其中10个功能未知,1个编码二氢吡啶二羧酸合酶、1个编码二氢吡啶二羧酸还原酶,2个编码染色体解离稳定(SMC)蛋白。9个克隆中介导与PBP2a相互作用的多肽由14～46个氨基酸组成。结论利用细菌双杂交技术从MRSA基因组文库中成功筛选到与PBP2a相互作用的多肽。; 原薇薇杨杰王冬梅胡珍朱军民陈志瑾张俊磊王嘉丽刘佳饶贤才; 关键词：蛋白质间相互作用

全选清除导出

共1页<1>

刘佳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

刘佳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈