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D1蛋白酶抑制剂先导化合物生物活性筛选研究: 本文根据研究以D1蛋白酶为靶标的新型农药为需要，从菠菜中克隆了D1蛋白酶的基因，并在大肠杆菌中进行了高效表达，通过亲和层析法对重组蛋白进行了纯化，得到了具有生物活性的种族蛋白酶。采用异硫氰酸荧光素标记的合成多肤(P-24...; 刘素芳李伟国张爱东; 关键词：先导化合物除草剂异硫氰酸荧光素标记; 文献传递

D1蛋白酶的克隆表达、纯化、生物活性测定及多克隆抗体的制备被引量：1: 2010年; 为了开发以D1蛋白酶作为靶标的新型除草剂,需要对先导化合物的生物活性进行检测和筛选。从菠菜中提取总RNA,逆转录合成cDNA,采用PCR扩增了CtpA的基因,连接至表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达,通过降低IPTG和诱导温度获得了可溶性表达的重组蛋白酶。采用Ni-NTA亲和层析和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行了纯化,SDS-PAGE和Western blotting结果证实目的蛋白为含有His-tag的融合蛋白。以合成的D1前体蛋白羧基端24肽作为模拟底物,采用高效液相色谱法测定了其水解活性,结果表明活性可达1.10nmol/(mg·min),为文献报道数据的15倍。纯化后的CtpA蛋白免疫日本的长耳大白兔制备多克隆抗体,ELISA法测定其血清抗体的效价高达1:100000。该结果为抑制剂先导化合物的筛选和酶蛋白与化合物的作用机理研究提供了必要的基础。; 李慧张巍申明霞李伟国刘艳丽刘素芳祁超; 关键词：纯化生物活性多克隆抗体

Nε-苯胺酰基-Nα-（3-取代苯基异噁唑-5-基羰基）赖氨酸类化合物的合成及其除草活性研究被引量：2: 2010年; 植物细胞内囊体中的D1蛋白酶是近年来发现的潜在的除草剂作用靶标.以异噁唑甲酰赖氨酸脲先导结构信息为基础,设计合成了未见报道的异噁唑甲酰赖氨酸类化合物11个.目标化合物分子结构经IR,1HNMR,元素分析予以确证.平皿法活体生物活性测试表明部分化合物具有中等除草活性;化合物8h的离体生物活性测试表明其对D1蛋白酶有一定的抑制作用.; 胡德金刘素芳黄统辉涂海洋李伟国朱晓磊张爱东

基于溶液竞争策略的D1蛋白酶与其抑制剂相互作用的表面等离子体共振研究: D1蛋白酶(carboxyl-teminal processing protease,Ctprl )是近年来发现的可作为除草剂开发的新型作用靶标。在前期工作中，通过合理设计和化学合成，得到对Dl蛋白酶具有较好抑制活性的多...; 周绚Damra Mustafa刘素芳涂海洋范华李伟国张爱东; 关键词：抑制剂表面等离子体共振除草剂先导化合物; 文献传递

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刘素芳