叶翠莲
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：重庆理工大学药学与生物工程学院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理生物学化学工程更多>>
- 防止皮肤感染的高分子聚合物液体敷料
- 姜和蔡家利吴胜昔胡仁建叶翠莲黄明宪
- 1、课题来源与背景：该项目是引进国外的过期专利技术，进行改进设置的研究课题，由重庆理工大学和重庆科莱生物技术有限公司共同承担该项目，共同出资进行研究开发。2、技术原理及性能指标：将甲基丙烯酸甲脂和甲基丙烯酸乙脂以及丙烯酸...
- 关键词：
- 关键词：动物实验
- 幽门螺杆菌HpaA蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用被引量：3
- 2011年
- 目的 制备幽门螺杆菌(H.pylori)HpaA蛋白单克隆抗体,并检测其对H.pylori黏附胃腺癌细胞AGS的抑制作用。方法应用PCR法扩增HpaA基因,构建重组表达质粒pQE30-HpaA,表达并纯化重组HpaA蛋白;以其为抗原免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选阳性杂交瘤细胞株,采用间接ELISA和Western blot法检测单抗的特异性,间接ELISA检测细胞株培养上清和腹水抗体效价,并对其进行亚型鉴定和杂交瘤细胞株稳定性分析;扫描电镜观察重组HpaA蛋白单抗对H.pylori黏附AGS细胞的抑制作用。结果重组表达质粒pQE30-HpaA经双酶切、PCR及测序证明构建正确;表达的重组HpaA蛋白相对分子质量约为30 000,可溶性蛋白含量约占65%,纯化后纯度达85%以上;经细胞融合及筛选克隆获得了2株能稳定分泌抗HpaA单抗的杂交瘤细胞株,2株单抗与其他肠道细菌均无交叉反应,能与H.pylori全菌体发生特异性反应;乳胶凝集试验证明,该单抗属IgG3、κ型;2株单抗细胞培养液的抗体效价分别为1∶128～1∶256和1∶64～1∶128,腹水抗体效价分别可达1∶6 400～1∶12 800和1∶1 600～1∶3 200;杂交瘤细胞经反复冻存、复苏及多次传代,仍能稳定分泌高效价抗体;单抗可抑制H.pylori对AGS细胞的黏附作用。结论已成功制备了H.pylori HpaA蛋白单克隆抗体,为建立新的H.pylori现症感染诊疗方法奠定了基础。
- 叶翠莲姜和蔡家利邱容蓉邹姝姝王颖
- 关键词：HPAA
