商蓓
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 中国、英国、印度苹果黑星病菌SSR遗传多样性分析被引量：2
- 2010年
- 苹果黑星病Venturia inaequalis（Cooke）G.winter（无性型为Spilocaea pomi Fr.）是苹果树上危害非常严重的一种病害,在世界各苹果产区均有发生。欧洲各国对苹果黑星病菌的研究已经比较深入,
- 付洁商蓓罗泽青杨家荣
- 关键词：苹果黑星病黑星病菌遗传多样性分析SSR苹果产区
- 苹果黑星病菌的分子检测被引量：3
- 2010年
- 【目的】建立苹果黑星病菌(Venturia inaequalis(Cooke)Wint)的分子检测方法,以提高检测精确度,缩短检测时间。【方法】根据苹果黑星病菌与其他苹果病原真菌核糖体基因转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)序列间的差异,设计了1对特异性引物320A/320B,用于苹果黑星病菌的分子检测,对特异性引物扩增条件进行了优化,并验证和检验了引物的特异性和灵敏度。【结果】特异性引物的扩增条带约为320bp,优化的反应体系为:2μL MgCl2(25mmol/L),2.5μL 10×buffer,3μL dNTP(2.5mmol/L),1.2 μL引物320A/320B(10μmol/L),0.5μL聚合酶(5U/μL),1μL模版DNA(30ng/μL),加ddH2O至总体积25μL;反应程序为:94℃3min;94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸30s,35个循环;72℃延伸10min。利用该对特异性引物对包括苹果黑星病菌在内的26个苹果病原菌菌株基因组DNA进行的PCR扩增表明,只有苹果黑星病菌能扩增到1条约320bp的特异性条带,其他菌株及阴性对照的扩增产物均未检测到特异性条带。对接种苹果黑星病菌的苹果组织的检测表明,该对引物能特异性地检测到苹果黑星病菌的存在,其对苹果黑星病菌基因组DNA检测的灵敏度为100fp/μL。【结论】利用设计的特异性引物320A/320B,参考正交试验优化的体系和程序,结合简单的SDS法提取苹果黑星病菌基因组DNA,在1个工作日内即可完成对该病原菌的分子检测。
- 商蓓付洁罗泽青胡小平杨家荣
- 关键词：苹果黑星病菌转录间隔区特异性引物
- 苹果黑星病菌的ITS-PCR分子检测
- 苹果黑星病菌是世界各苹果产区的主要病害之一,主要为害叶片和果实,常引起苹果树早期落叶、果品产量剧降、品质变劣,并进而减少花芽分化和次年结果量。从学习了解前人对苹果黑星病菌的研究结果,有助于了解病菌的传播及其病害的发生、发...
- 商蓓
- 关键词：苹果黑星病菌ITS特异性引物PCR
- 文献传递
- 苹果黑星病菌的早期分子检测被引量：3
- 2009年
- 苹果黑星病(Venturia inaequalis)是中国苹果产区的重要病害之一,为了建立该病原菌的早期快速检测技术,筛选出了对苹果黑星病菌具有特异性的PCR引物。利用这对引物能从苹果黑星病菌基因组DNA中扩增出一条分子量为190 bp的特异性条带,准确地把苹果斑点落叶病、苹果褐斑病和苹果白粉病等常发性苹果叶斑病害区分开。采用改进的CTAB法,快速提取发病叶片组织的DNA,并结合PCR检测技术,可从苹果黑星病显症叶片以及未显症而处于潜育期的叶片组织中特异性地检测到苹果黑星病菌。结果表明,建立的苹果黑星病菌分子检测方法,可用于该病害的早期快速分子诊断。
- 夏明月罗泽青商蓓周书涛杨家荣
- 关键词：苹果黑星病DNA提取PCR分子检测
