目的探讨生物钟基因brain and muscle Arnt-like protein-1(Bmal1)对胰岛β细胞凋亡的调节作用。方法实验分为正常对照组(含5.5mmol/L葡萄糖,NC组)、高糖组(含33.3mmol/L葡萄糖)、正常糖浓度+无关RNA转染组(含5.5mmol/L葡萄糖,NC+si RNA组)、正常糖浓度+Bmal1基因沉默组(NC+Bmal1-/-组)、高糖+无关RNA转染组(含33.3mmol/L葡萄糖,高糖+si RNA组)、高糖+Bmal1基因沉默组(高糖+Bmal1-/-组)。NC组不加干预因素。采用RNA干扰技术沉默大鼠胰岛β细胞瘤株(INS-1)Bmal1基因,应用TUNEL法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测活性氧(ROS)含量,ATP检测试剂盒测定三磷酸腺苷(ATP)含量,实时荧光定量PCR检测Bmal1、去乙酰化酶sirtuin 1(Sirt1)m RNA表达情况。结果与NC+si RNA组比较,NC+Bmal1-/-组ATP含量下降,ROS水平增加,Sirt1 m RNA表达下降(均P<0.01)。与NC组比较,高糖组ATP下降,ROS增加,Sirt1 m RNA表达下降(均P<0.01),细胞凋亡增加(P<0.05)。与高糖+si RNA组比较,高糖+Bmal1-/-组ATP下降,ROS增加,细胞凋亡增加(均P<0.01),Sirt1 m RNA表达有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。结论 Bmal1可通过调节氧化应激信号通路影响胰岛β细胞功能和凋亡。
