张英霞
- 作品数:42 被引量:133H指数:5
- 供职机构:海南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金海南省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 黑眶蟾蜍皮肤白蛋白的纯化及胰蛋白酶抑制活性被引量:2
- 2009年
- [目的]探讨黑眶蟾蜍皮肤白蛋白的纯化及胰蛋白酶抑制活性。[方法]通过离子交换层析和凝胶过滤层析,从黑眶蟾蜍皮肤中得到其白蛋白,命名为BufomA-skin。65nmol/L的BufomA-skin分别与30nmol/Ltrypsin在25℃不同保温时间(0.25—24h)下测定胰蛋白酶抑制活性,计算剩余酶活力。[结果]BufomA-skin为单链蛋白,分子量约为66.7kDa。但在非还原状态下,50~66kDa条带呈弥散样。该蛋白有抑制胰蛋白酶水解小肽底物的活性,但对其他丝氨酸蛋白酶如凝血酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶无抑制。BufomA-skin与胰蛋白酶保温24h后,胰蛋白酶活性无恢复。[结论]黑眶蟾蜍皮肤白蛋白具有稳定的胰蛋白酶抑制活性,在黑眶蟾蜍防御天敌捕食的过程中发挥重要作用.
- 满初日嘎张英霞
- 关键词:黑眶蟾蜍血清白蛋白胰蛋白酶抑制剂
- 一种具有抗白色念珠菌活性的短链抗菌肽及其应用
- 本发明提供了一种具有抗白色念珠菌活性的短链抗菌肽及其应用,抗菌肽为从海南斑腿泛树蛙中获得的抗菌肽改造后的衍生肽Pm‑2W;属于肽类抗生素的应用领域,通过对抗菌肽进行改造,得到衍生肽Pm‑2W;本发明的Pm‑2W具有高效的...
- 张英霞胡芳
- 黑眶蟾蜍皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2012年
- [目的]克隆黑眶蟾蜍皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂基因。[方法]从海南海口产黑眶蟾蜍皮肤中抽提总RNA,经mRNA纯化后构建黑眶蟾蜍皮肤cDNA文库。根据已报道的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)序列,设计寡核苷酸引物用于筛选、克隆、测序。[结果]从所构建的cDNA文库中得到1个Serpin基因,命名为BmSP。对cDNA序列推导出的氨基酸序列分析表明,该BmSP蛋白属于Serpin家族中SERPIN B亚家族,与鼠鳞状细胞癌抗原2(SCCA2)同源。该蛋白C末端含有一个RCL环(Reactive center loop regions)和一段高度保守的五肽。[结论]与SERPIN B亚家族中其他类型蛋白氨基酸序列比较结果表明,黑眶蟾蜍BmSP与SERPIN B亚家族中其他类型成员氨基酸序列相似度较高,具有高度的保守性,可能在其防御天敌捕食的过程中发挥重要作用。
- 韦双双关怀郑继平周海龙张英霞
- 关键词:胰蛋白酶抑制剂黑眶蟾蜍CDNA文库
- 花狭口蛙海南亚种皮肤cDNA文库的构建及鉴定
- 2017年
- 在两栖动物,尤其是蛙皮肤中已分离得到多种生物学活性物质.而构建皮肤c DNA文库,有助于筛选活性组分,并保存其功能基因.本试验以花狭口蛙皮肤组织为材料,根据Trizol法提取皮肤总RNA后,使用Creator?SMART?c DNA文库构建试剂盒,运用SMART技术构建文库,经反转录反应合成c DNA第一链,LD PCR法将第一链产物扩增再合成双链c DNA;经蛋白酶K和Sfi I消化后,用CHROMA APIN-400分离双链c DNA;将合适大小的ds c DNA通过T4DNA连接酶16℃过夜孵育连接到经过相同酶切的p DNR-LIB载体中,体外包装后转染DH5α宿主菌,构建形成原始文库,进行滴度测试.研究表明,构建的花狭口蛙皮肤c DNA文库原始文库滴度为1.18×108 PFU/m L,插入片段大小不同,没有特异性,构建的文库不符合要求,不可用于大规模的功能基因分析,但可为花狭口蛙皮肤抗菌肽基因的前期研究提供借鉴.
- 满初日嘎张英霞王思珍
- 关键词:CDNA文库SMART技术
- 一种抗菌肽在制备抗金黄色葡萄球菌感染的药物中的用途
- 本发明提供了一种抗菌肽在制备抗金黄色葡萄球菌感染的药物中的用途。在金葡菌感染的肺炎小鼠模型中,GHb3K和GHbK4R的治疗效果比万古霉素更好,能显著减轻炎症反应,并且体内毒性低于万古霉素。GHb3K和GHbR能显著促进...
- 张英霞满初日嘎韦双双靳肖
- 中美高校本科生“生物化学”教学的比较分析——以海南大学和美国密苏里州立大学为例被引量:1
- 2017年
- 通过参加海南大学组织的"国际化双语教学培训项目",观摩了美国密苏里州立大学本科生"生物化学"课程.以海南大学药学专业本科生"生物化学"课程为例,比较分析了中美两国高校在"生物化学"课程的教学安排、教学方法、考核方式等方面的差异,为国内高校本科生"生物化学"教学改革提供参考与借鉴.
- 张英霞
- 关键词:生物化学教学改革
- 花狭口蛙海南亚种皮肤分泌物的溶血活性研究
- 2011年
- [目的]观察花狭口蛙海南亚种皮肤分泌物溶血活性并探讨不同因素对其溶血活性的影响。[方法]采用花狭口蛙皮肤分泌物对健康小鼠红细胞进行溶血试验,并分析了渗透性保护剂、糖类、金属离子以及抗氧化剂等不同因素对其溶血活性的影响。[结果]渗透保护剂明显抑制花狭口蛙皮肤分泌物的溶血活性,而糖类、抗氧化剂和金属离子等几乎都无抑制作用。[结论]花狭口蛙海南亚种皮肤分泌物通过在细胞膜表面形成孔道而发挥溶血活性。
- 陈聪伟迟婷婷韦双双关怀满初日嘎张英霞
- 关键词:红细胞溶血活性
- 耳鲍血淋巴抗菌活性的研究
- 2009年
- 用溶藻弧菌诱导后,收集耳鲍血淋巴,利用微量测定法进行抗菌活性分析。结果发现,耳鲍血淋巴具有抗革兰氏阴性菌-溶藻弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌的活性,对革兰氏阳性菌的抑制活性较低。利用胰蛋白酶对耳鲍血淋巴水解后.其抗菌活性消失,表明其中抗菌成分为蛋白质。将耳鲍血淋巴在不同温度(37-95℃)和不同pH(2.5~5.0)下保温,发现其抗菌活性成分对热及酸耐受性较强。耳鲍血淋巴在低浓度无溶血活性。该抗菌组分在耳鲍的免疫防御中具有一定的作用。
- 张英霞满初日嘎
- 关键词:耳鲍血淋巴抗菌肽
- 抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗菌稳定性及其抗菌机理被引量:6
- 2017年
- Lc-NKlysin-1是从海洋鱼类——大黄鱼(Larimichthys crocea)中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和研究其结构与功能的关系,本文截取了其N末端的12个氨基酸残基,设计并合成了抗菌肽Lc-NKlysin-1a,同时,通过琼脂板打孔法,对其抗菌活性,不同温度、pH值、盐浓度等对其抗菌活性的影响,其溶血活性,最低抑菌质量浓度,其抗菌特征等进行了研究,并在扫描电镜下观察了其对细菌形态结构的影响.结果表明:抗菌肽LcNKlysin-1a对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌、副溶血弧菌、铜绿假单胞菌、抗链霉素大肠杆菌)均具有抗菌活性;但对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和抗链霉素大肠杆菌的抗菌活性最好,其最低抑菌质量浓度(MIC)在15.62531.25μg·mL^(-1)之间;相对于Lc-NKlysin-1,Lc-NKlysin-1a的抗菌活性明显增强;Lc-NKlysin-1a在15.62531.25μg·mL^(-1)时,其溶血率为3.80%7.37%,溶血活性较低;Lc-NKlysin-1a对温度、pH和盐等具有良好的耐受性,且稳定性高.此外,通过扫描电镜还观察到,抗菌肽Lc-NKlysin-1a作用于细菌后细菌的形态发生了明显改变,其细胞膜出现了褶皱和塌陷的现象,最终导致了内溶物外泻而死亡.改造后的抗菌肽其相对分子质量小,活性高,稳定性强,更易于被开发成抗菌肽类药物.
- 罗文杰钟亨任何露露邵佳琪宋彦廷张英霞
- 关键词:抗菌肽大黄鱼抗菌活性稳定性
- 海南产沼蛙皮肤temporin家族抗菌肽抗菌活性及稳定性研究被引量:5
- 2016年
- 用化学合成法合成了4种抗菌肽,并测定了其抗菌活性及温度、热处理时间和p H值等不同因素对抑菌活性的影响,结果表明:temporin-GHa^GHd对革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA);革兰氏阴性菌:大肠杆菌(Escherichia coli,D 31);真菌:白色念珠菌(Monilia albican)均具有抗菌活性.对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最低,分别为6.8,6.8,12.9和12.7μmol·L-1.除temporin-GHb对温度稍敏感外,temporin-GHa,temporin-GHc和temporin-GHd在25~100℃范围内,均具有较强的热稳定性,即使在80℃加热80 min,100℃加热20 min,其抗菌活性仍基本保持不变.4种抗菌肽在p H 2~10范围内稳定,即使在极端p H条件下(p H 2~3或9~10),其抗菌活性仍变化不大.
- 董柱钟亨任罗文杰宋彦亭邓世明张英霞
- 关键词:沼蛙抗菌肽抗菌活性