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新基因ANGPTL4的克隆及其在血管新生中的功能研究被引量：26: 2002年; 目的　克隆新基因ANGPTL4 ,并探讨其功能。方法　采用以细胞生长为基础的功能筛选方法筛选人胎盘cDNA文库 ,结合RACE PCR方法克隆到一个人全长新基因ANGPTL4 ,用RH PCR方法对其进行染色体定位 ;用原核表达系统对重组ANGPTL4进行蛋白表达 ;用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)试验、原代猪主动脉内皮细胞 (PAEC)体外迁移试验、PAEC体外浸润试验、PAEC体外管状试验及小鼠体内栓子形成试验探讨了新基因ANGPTL4对体内外血管新生过程的影响。结果　获取的人全长基因ANGPTL4定位于染色体 19p13 3,其原核表达产物对PAEC的体外增殖没有明显作用 (P =0 0 5 04 ) ,但ANGPTL4的 2 μg/ml剂量组对PAEC的体外迁移和浸润均有明显的促进作用 (P <0 0 5 ) ,对其管状结构形成也有程度不同的促进作用 ;对小鼠体内血管新生有较明显的促进作用。; 朱洪新李锦军覃文新杨艳华何祥火万大方顾健人; 关键词：血管新生体外新基因克隆人胎盘 RACE

高通量肿瘤血管新生研究技术平台的建立被引量：17: 2001年; 目的建立高通量肿瘤血管新生研究的体内外技术平台。方法以VEGF,bFGF为血管新生因子,以Thalidomide血管新生抑制因子对体外培养的血管内皮细胞系(RF/6A,SVEC)应用MTT试验,迁移试验,浸润试验和管状形成试验检测内皮细胞的各种特性;体内实验以鸡胚和C57BL/6小鼠为实验动物检测血管新生因子和抑制因子在体内对血管新生的影响。结果VEGF和bFGF在体内和体外均有促进血管新生的作用,体外试验表明VEGF和bFGF对内皮细胞的增殖活性,迁移,浸润和管状结构形成均有明显的促进作用(P＜0.01);小鼠体内栓子试验和鸡胚绒毛尿囊膜试验结果均表明,VEGF和bFGF对体内血管新生同样具有促进或刺激作用,和阴性对照相比主要表现在新生血管密度高、管腔大、管壁完整等;而Thalidomide在体内外均有明显抑制血管新生的作用。结论本技术平台是一个高通量、经济、简便易行、实用的血管新生研究技术平台。; 李锦军葛超朱洪新万大方顾健人; 关键词：肿瘤血管新生 VEGF 动物实验

人细胞生长相关5个新基因的染色体定位及其基因结构被引量：3: 2002年; 基因的染色体定位对我们研究基因相互关系、基因的组织与进化及理解基因与疾病关系具有重要的意义。本文采用RH -PCR方法及生物信息学方法对PP3898、PP115 8、PP75 3、SP2 6 0、HC5 6等 5条人细胞生长相关新基因进行染色体定位 ,并分析了其基因结构。PP3898及PP115 8定位于 19p13 3,PP75 3及SP2 6 0定位于 1q2 1 1,HC5 6定位于 17p13 3。PP3898含有 19个外显子和 18个内含子 ,可读框为 2 5 6 5bp ;PP115 8含有 7个外显子和 6个内含子 ,可读框为 12 18bp ;SP2 6 0含有 10个外显子和 9个内含子 ,可读框为 6 90bp ;HC5 6为单外显子 ,可读框为3141bp。另外。; 何祥火覃文新王俊茹胡建朱洪新万大方顾健人; 关键词：染色体定位基因结构人类基因组

血管生成素及其在肿瘤血管新生中的作用被引量：2: 2002年; 血管生成素是新近发现的一个与血管新生密切相关的蛋白家族 ,其共同受体是Tie2。由于Ang1和Ang2在体内具有与VEGF共同调节生理性和病理性血管新生的功能 ,其研究进展受到广泛关注。本文综述了血管生成素家族中主要成员Ang1,Ang2 ,Ang3 ,Ang4等在克隆、生化性质 ,血管生成素受体Tie2在信号转导中的作用。; 朱洪新李锦军万大方; 关键词：血管生成素肿瘤血管新生 TIE2 信号转导

人细胞生长相关5个新基因的染色体定位及其基因结构: 基因在染色体上的位置及其排列顺序对研究基因之间相互关系、基因的组织与进化、比较基因组学至关重要,可以促进我们对基因的结构与功能及基因与疾病尤其是遗传性疾病与癌症之间关系的深入理解.同时,基因的染色体定位又是人类基因组计划...; 何祥火覃文新王俊茹胡建朱洪新万大方顾健人; 关键词：基因功能染色体定位基因结构遗传性疾病荧光原位杂交; 文献传递

ANGPTL4基因的克隆及其功能研究: 通过以细胞生长为基础的功能筛选方法筛选人胎盘cDNA文库结合RACE-PCR方法克隆到一个人全长血管生成素（angiopoietin,Ang）相关新基因,起初命名为pp1158,现已由HUGO统一命名为ANGPTL4（a...; 朱洪新; 关键词：分子克隆 RACE 血管新生血管生成素肝细胞癌转染; 文献传递

肝癌相关基因pp1158的表达及功能研究被引量：11: 2002年; 目的　对pp115 8基因的蛋白表达和体内外功能进行研究。方法　用pET 32a融合表达载体在大肠杆菌BL2 1(DE3)对该基因进行表达 ,制备兔源性多克隆抗体 ;用体外细胞集落形成试验、裸鼠体内成瘤实验、免疫组化及蛋白印迹 ,检测该基因对肿瘤细胞生长的影响及表达差异 ;用Northernblot检测pp115 8在组织中的表达差异。结果　pp115 8对BEL 74 0 2肝癌细胞系的体外集落形成有明显抑制作用 ,抑制率为 5 8.3% (P <0 .0 1) ;对BEL 74 0 2细胞的成瘤有明显抑制作用 (P <0 .0 5 )。蛋白印迹结果显示 ,转染pCMV Script pp115 8的BEL 74 0 2细胞表达pp115 8蛋白。免疫组化结果显示 ,pp115 8基因在人组织中的表达为 :正常肝组织≥癌旁肝组织 >肝癌组织。Northernblot结果显示 ,pp115 8在人胎盘组织中高表达 ,在心、肝、骨骼肌、胰腺、肺等脏器中度表达 ,而在脑和肾组织中表达很低。结论　pp115 8为肝细胞性肝癌的候选抑瘤基因。; 朱洪新李锦军万大方杨艳华覃文新葛超姚明顾健人; 关键词：肝肿瘤肝细胞癌免疫组织化学

ANGPTL4基因对大鼠胶质瘤细胞系C6血管通道形成的影响被引量：10: 2002年; 目的　研究ANGPTL4基因对C6细胞形成血管通道的影响。方法　将ANGPTL4蛋白进行原核表达 ,用MTT试验观察ANGPTL4对C6细胞增殖的影响 ,用体外迁移试验 ,体外侵袭试验和体外管状形成试验等体外血管新生研究模型观察ANGPTL4基因对C6细胞形成血管通道的影响。结果　ANGPTL4对C6细胞的增殖没有显著性作用 ;ANGPTL4基因可促进C6细胞的体外迁移 ,侵袭和管状形成。结论　ANGPTL4能够促进C6细胞形成血管通道。; 朱洪新李锦军杨艳华万大方顾健人; 关键词：血管新生恶性胶质瘤 C6细胞血管通道

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朱洪新