杨艳华
- 作品数:6 被引量:38H指数:4
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划上海市科学技术发展基金上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 新基因ANGPTL4的克隆及其在血管新生中的功能研究被引量:26
- 2002年
- 目的 克隆新基因ANGPTL4 ,并探讨其功能。方法 采用以细胞生长为基础的功能筛选方法筛选人胎盘cDNA文库 ,结合RACE PCR方法克隆到一个人全长新基因ANGPTL4 ,用RH PCR方法对其进行染色体定位 ;用原核表达系统对重组ANGPTL4进行蛋白表达 ;用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)试验、原代猪主动脉内皮细胞 (PAEC)体外迁移试验、PAEC体外浸润试验、PAEC体外管状试验及小鼠体内栓子形成试验探讨了新基因ANGPTL4对体内外血管新生过程的影响。结果 获取的人全长基因ANGPTL4定位于染色体 19p13 3,其原核表达产物对PAEC的体外增殖没有明显作用 (P =0 0 5 04 ) ,但ANGPTL4的 2 μg/ml剂量组对PAEC的体外迁移和浸润均有明显的促进作用 (P <0 0 5 ) ,对其管状结构形成也有程度不同的促进作用 ;对小鼠体内血管新生有较明显的促进作用。
- 朱洪新李锦军覃文新杨艳华何祥火万大方顾健人
- 关键词:血管新生体外新基因克隆人胎盘RACE
- E.coli中Salmonella typhimurium ytl2同源基因的功能研究新型大肠杆菌分泌表达系统的构建与改造
- 该论文的研究工作围绕上述两个问题展开.论文共分两部分,每一部分均由综述和论文组成.第一部分综述"大肠杆菌的染色体和质粒分配机制"介绍了大肠杆菌染色体和质粒分配分子机制研究领域的最新成果;论文"E.coli中Salmone...
- 杨艳华
- 关键词:大肠杆菌
- 肝癌相关蛋白HCAP1的表达、抗体制备及其亚细胞定位被引量:3
- 2003年
- 目的 :肝癌相关基因HCAP1蛋白产物的表达、抗体的制备及其亚细胞定位。方法 :原核表达HCAP1蛋白 ;纯化的HCAP1蛋白免疫新西兰大白兔 ,制备多抗血清 ;Westernblot分析其在肝癌细胞株的表达 ;通过荧光免疫细胞化学进行亚细胞定位。结果 :获得了较纯的HCAP1表达蛋白和高效价的、高特异性的抗HCAP1的多抗血清 ,并且发现HCAP1大部分位于胞浆 ,少量分布于核仁。结论 :表达的HCAP1蛋白和抗HCAP1的多抗血清可用于HCAP1基因功能的研究 ;HCAP1功能场所可能位于核仁。
- 王俊茹覃文新李锦军杨艳华潘勇万大方顾健人
- 关键词:肝癌抗体亚细胞定位
- ANGPTL4基因对大鼠胶质瘤细胞系C6血管通道形成的影响被引量:10
- 2002年
- 目的 研究ANGPTL4基因对C6细胞形成血管通道的影响。方法 将ANGPTL4蛋白进行原核表达 ,用MTT试验观察ANGPTL4对C6细胞增殖的影响 ,用体外迁移试验 ,体外侵袭试验和体外管状形成试验等体外血管新生研究模型观察ANGPTL4基因对C6细胞形成血管通道的影响。结果 ANGPTL4对C6细胞的增殖没有显著性作用 ;ANGPTL4基因可促进C6细胞的体外迁移 ,侵袭和管状形成。结论 ANGPTL4能够促进C6细胞形成血管通道。
- 朱洪新李锦军杨艳华万大方顾健人
- 关键词:血管新生恶性胶质瘤C6细胞血管通道
- 肝癌相关基因pp1158的表达及功能研究被引量:11
- 2002年
- 目的 对pp115 8基因的蛋白表达和体内外功能进行研究。方法 用pET 32a融合表达载体在大肠杆菌BL2 1(DE3)对该基因进行表达 ,制备兔源性多克隆抗体 ;用体外细胞集落形成试验、裸鼠体内成瘤实验、免疫组化及蛋白印迹 ,检测该基因对肿瘤细胞生长的影响及表达差异 ;用Northernblot检测pp115 8在组织中的表达差异。结果 pp115 8对BEL 74 0 2肝癌细胞系的体外集落形成有明显抑制作用 ,抑制率为 5 8.3% (P <0 .0 1) ;对BEL 74 0 2细胞的成瘤有明显抑制作用 (P <0 .0 5 )。蛋白印迹结果显示 ,转染pCMV Script pp115 8的BEL 74 0 2细胞表达pp115 8蛋白。免疫组化结果显示 ,pp115 8基因在人组织中的表达为 :正常肝组织≥癌旁肝组织 >肝癌组织。Northernblot结果显示 ,pp115 8在人胎盘组织中高表达 ,在心、肝、骨骼肌、胰腺、肺等脏器中度表达 ,而在脑和肾组织中表达很低。结论 pp115 8为肝细胞性肝癌的候选抑瘤基因。
- 朱洪新李锦军万大方杨艳华覃文新葛超姚明顾健人
- 关键词:肝肿瘤肝细胞癌免疫组织化学