李冰
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
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- 相关领域：生物学理学更多>>
- ConA与PHA在猪染色体制备中的比较被引量：5
- 2006年
- 以13/17罗伯逊易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]、杂合子猪[2n=37,XY或XX,rob(13;17)]、正常猪为实验材料,用刀豆素A(ConA)和植物血球凝集素(PHA)两种不同的刺激源刺激外周血淋巴细胞来制备染色体,并对两种刺激源的最佳使用浓度进行了研究:ConA的最佳浓度为:0.2 mg/ml,PHA的最佳浓度为:1 mg/ml,二者同样在最佳浓度时,ConA的制片效果显著优于PHA,t检验结果为:t0.05(18)=2.101
- 耿克祥闫守庆李冰孙金海
- 关键词：罗伯逊易位CONAPHA染色体
- 猪单条13/17罗伯逊易位染色体的显微分离与LA-PCR扩增被引量：4
- 2007年
- 以13/17罗伯逊易位纯合子猪[2n=36,XY或XX,rob(13;17)]为试验材料,制备其有丝分裂中期染色体,利用显微分离技术对13/17罗伯逊易位染色体进行分离,并将单条染色体进行LA-PCR扩增,其扩增片段大小主要在200～2800bp;对LA-PCR扩增产物用猪13、17号染色体近着丝点微卫星标记SWR1941和SWR1120与Southern杂交2种方法进行鉴定,结果表明LA-PCR产物来源于13/17罗伯逊易位染色体。该方法的成功建立为进一步从分子水平上研究家猪13/17罗伯逊易位所引起的表型效应的遗传机制以及筛选猪13和17号染色体上新的分子遗传标记奠定了基础。
- 耿克祥闫守庆李冰孙金海
- 关键词：罗伯逊易位显微分离微卫星
- 家猪Fosmid基因组文库的构建被引量：6
- 2007年
- 本研究采用蛋白酶K和苯酚抽提法提取基因组DNA，通过物理方法随机剪切DNA，经T4DNA聚合酶和T4多聚核苷酸激酶末端修饰，琼脂糖凝胶电泳回收大小为25-40kb的片段，与pCC1FOS载体连接，噬菌体包装蛋白体外包装，转染大肠杆菌EP1300，构建了家猪Fosmid基因组文库。文库容量为8．50×10^9CFU／ml，平均插入片段大小约25kb，用家猪MC1卫星DNA做探针对文库进行初步筛选，获得含该卫星DNA的阳性克隆，该文库的构建为进一步筛选并研究猪卫星DNA序列奠定了基础。
- 李冰闫守庆孙金海
- 关键词：FOSMID文库卫星DNA
- 貉微卫星DNA富集文库的构建与鉴定被引量：2
- 2008年
- 貉基因组DNA经限制性内切酶MboI酶切,用2.0%琼脂糖凝胶电泳回收200～800bp的DNA片段,与MboI连接头连接,连接产物与生素物标记的(AC)n微卫星探针变性及退火,再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉,经吸附、洗涤及洗脱,然后以洗脱产物为模板,通过PCR扩增,与pUCm-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,构建貉(AC)n微卫星DNA富集文库,经测序分析表明该文库含重组克隆约2800个,其中含有(AC)n微卫星DNA序列的阳性克隆占71.4%。
- 闫守庆李冰祝万菊
- 关键词：微卫星
- 蓝狐α-卫星DNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2007年
- 利用限制性内切酶酶切蓝狐基因组,经琼脂糖凝胶电泳,对特异性亮带进行克隆、测序及序列分析。结果获得42个卫星DNA序列,该卫星DNA单体大小为737 bp,G+C含量为51.9%,单体之间同源性为91%～97%;每个单体由3个约245 bp的亚重复串联构成,亚重复之间的同源性为49%～55%;在物种进化过程中,该卫星DNA有G+C含量逐渐降低而A+T含量逐渐上升的趋势;该卫星DNA为犬科动物种属所特有,与犬着丝粒相关卫星DNA为同类卫星DNA,同源性为74%,命名为α-卫星DNA。
- 闫守庆祝万菊张雪梅李冰孙金海
- 关键词：犬科动物蓝狐卫星DNA
