杨子义
- 作品数：10 被引量：58H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用15肽随机肽库确定抗TNF单抗表位的研究被引量：12
- 1999年
- 利用抗ＴＮＦ的Ｔ５单抗作为筛选配基，对经ＤＮＡ碱基组成分析证明具有良好随机性的１５肽库进行亲和筛选．经过三轮筛选后，以硝酸纤维素膜斑点印迹法观察到良好的富集效果．由第三轮挑选出的３１个克隆进行ＤＮＡ测序，结果推出的优势克隆的短肽为ＣＹＲＲＰＡＧＧＬＰＧＩＣＳＡ等，竞争性ＥＬＩＳＡ实验证明带有以上短肽的噬菌体与ＴＮＦ能竞争性地与Ｔ５单抗结合．
- 杨子义董家新王鑫姚志建沈倍奋
- 关键词：噬菌体随机肽库单克隆抗体表位TNF
- 人巨细胞病毒单克隆抗体识别的抗原表位的筛选被引量：5
- 1998年
- 目的找出人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）单克隆抗体识别的抗原表位以进行ＨＣＭＶ多肽疫苗的研制。方法通过链亲和素－生物素的作用将ＨＣＭＶ单抗固定在酶联板上，加入噬菌体随机六肽文库，经过三轮捕捉、洗脱、扩大培养的筛选过程，并逐轮增加冲洗强度，与ＨＣＭＶＭｃＡｂ具有亲合力的噬菌体得到了富集；从最后得到的三级库中，随机挑选１６个单克隆，测定其所携带的外源ＤＮＡ的序列，找出一致序列并进行同源性查询。结果１６个克隆中有１５个序列相同，５＇－ＡＧＴＧＣＴＧＧＴＴＧＧＧＣＴＴＣＴ－３＇，对应的氨基酸序列为Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｇｌｙ－Ｔｒｐ－Ａｌａ－Ｓｅｒ，此序列同源性查询结果显示与ＨＣＭＶ病毒膜糖蛋白ＵＬ０１有７８．８％的同源性，其中有４个氨基酸残基（ＡＧＷＡ）是完全相符的。结论所筛选到的六肽序列可能为ＨＣＭＶ抗原表位。
- 杨淑静卜凤荣王全立杨子义
- 关键词：单克隆抗体抗原多肽疫苗
- 抗人重组IL－1单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 1995年
- 以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定；抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ｌｇＧｌ；免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带；ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α、ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无交又反应；放射免疫测定结果证实，３株抗体分别识别ＩＬ－１分子上两个不同的抗原决定簇。
- 于鸣孙瑛勋杨子义孙启鸿沈倍奋
- 关键词：白细胞介素-1单克隆抗体
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的研究被引量：9
- 1996年
- 目的 进行重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的临床前研究和Ⅰ期临床试验。方法在动物模型上进行ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的药理、毒理、药代和药效研究，并在人体上进行安全性评价和初步疗效观察。结果体外实验证明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血祖细胞有促增殖作用；在６０Ｃｏｒ射线照射造成的白细胞低下动物（狗和猴），显示了明显的升白细胞作用；急性毒性试验显示，ＬＤ５０大于５０００μｇ／ｋｇ；小鼠的药代动力学研究表明，注入的ＧＭ－ＣＳＦ主要从尿中排出，并不在体内蓄积；狗的慢性毒性试验表明在高于临床用量３倍时，无明显毒性反应。Ⅰ期临床试验证明，每天在２．５－７．５μｇ／ｋｇ的剂量下使用是安全的，并能升高白细胞。结论ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可用于治疗放疗与化疗引起的白细胞减少症。
- 沈倍奋杨子义许锦良丁林茂吕秋军鲍云华吴进冬杨志刚赖春宁陈兴
- 关键词：白细胞减少粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 合成多肽为半抗原制备抗SCF受体单克隆抗体被引量：10
- 1998年
- 本文成功地建立了以合成的小分子肽与蛋白质交联的偶联物为免疫原，制备单克隆抗体（ｍＡｂ）的技术路线。选定ＳＣＦ受体特异性肽段进行人工合成，将其偶联于ＢＳＡ免疫动物，应用细胞融合技术制备了抗两肽段的杂交瘤细胞７株。ＥＬＩＳＡ法和免疫印迹结果显示，其分泌的ｍＡｂ特异性强，与偶联载体及多种多肽生长因子均无交叉反应。经ＡＰＡＡＰ法鉴定，抗胞内羧基端肽的ｍＡｂＳＢ３０４与ＳＣＦ受体表达细胞系ＨＥＬ有弱的阳性反应；免疫组化测定与胎儿皮肤基底层色素细胞及胃粘膜上皮细胞呈阳性反应，提示ｍＡｂＳＢ３０４可识别天然状态的ＳＣＦ受体。
- 孙瑛勋栾晓孙启鸿于鸣高亚兵杨子义董家新沈倍奋
- 关键词：单克隆抗体合成多肽
- 从噬菌体随机肽库中筛选IL-6抗体的识别表位被引量：5
- 2000年
- 目的 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选IL 6抗体的识别表位。方法 :利用具有IL 6中和活性的单抗C2 2 0筛选呈现于丝状噬菌体表面P3蛋白的随机 6肽文库。结果 :从噬菌体随机 6肽文库中筛选出 36株可与单抗特异结合的噬菌体克隆 ,其中多数克隆呈现核心序列SWLR ,该序列与IL 6的序列具有一定同源性。竞争结合实验和Western印迹分析 ,带有SWFNLR和HSWLRY小肽的 2株噬菌体克隆可与IL 6竞争结合单抗C2 2 0。结论 :SWFNLR和HSWLRY是IL 6单抗C2 2 0特异识别的表位。
- 陈兴王鑫杨子义董家新王建安姚志建沈倍奋
- 关键词：随机肽库IL-6单克隆抗体识别表位
- 新型葡激酶的研究进展被引量：5
- 2003年
- 本文详细阐述了新型葡激酶的结构、作用机理和改构现状。葡激酶是一种溶栓剂 ,具有纤维蛋白选择性好、溶栓效率高、价格经济等优点 ,但作为细菌源蛋白质 ,葡激酶用于患者会产生中和性抗体 ,严重影响它的治疗效果和反复应用。目前对葡激酶的研究主要致力于结构改造 ,减小其免疫原性 ,提高疗效。
- 王晓文杨子义
- 关键词：葡激酶免疫原性过敏反应溶栓剂
- 利用目的基因随机表位库筛选葡激酶抗原决定簇
- 2004年
- 目的 :用目的基因随机表位库方法寻找葡激酶 (straphylokinaseSAK)的显性表位。方法 :①SAK免疫BALB C小鼠 ,免疫亲和层析纯化抗血清后 ,抗SAK抗体用生物素标记 ;②构建SAK随机表位肽库 ,随机挑取 12个独立克隆测序 ,分析库DNA片段的分布和碱基含量情况 ;③以多抗为靶蛋白用克隆原位杂交法筛选肽库 ;④构建SAK的缺失突变体mSAK ,Westernblot分析mSAK的免疫反应性。结果 :①筛选肽库得到一个由 19个氨基酸组成的免疫显性表位区 ,命名为A1区 ;②mSAK不能与抗SAK多抗反应。结论 :用简便、有效的方法筛选得到了SAK的一个表位A1区 ,初步确定A1区是SAK引起免疫反应的重要区域。
- 王晓文杨子义王金凤蔡欣徐滔邹民吉王嘉玺
- 关键词：葡激酶表位
- 噬菌体显示技术用于抗体表位的筛选被引量：5
- 1999年
- 利用噬菌体随机肽库筛选抗ＴＮＦ单抗表位的研究中，就抗体的选择、肽库富集的检测、筛选得到的表位多肽的验证及如何提高筛选的成功率等，进行了一些初步探索．实验结果表明，由识别线性抗原位点的抗体较容易筛选到噬菌体呈现表位，具有较强中和活性的抗体，因多识别空间构型抗原位点而增加筛选难度．ＮＣ膜斑点印迹、ＥＬＩＳＡ及ＤＮＡ测序均可作为筛选富集的检测方法．用与天然抗原同源比较的方法及竞争性ＥＬＩＳＡ分析。
- 杨子义王鑫董家新姚志建沈倍奋
- 关键词：抗体表位
