洪晓武
- 作品数：26 被引量：119H指数：6
- 供职机构：复旦大学基础医学院免疫学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人猿超科和旧大陆猴7种高等灵长类FKN全基因序列的测定及进化分析被引量：2
- 2008年
- 测定人猿超科(人、黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩和长臂猿)和旧大陆猴(猕猴和叶猴)7种高等灵长类FKN全基因序列,探讨其系统进化分析。用简并引物PCR(Degenerated PCR)法分别扩增FKN的3个外显子,其产物经琼脂糖凝胶回收、纯化后测序,然后用BioEdit软件剪切拼接FKN基因全序列,用DNAStar比对后比较基因和氨基酸序列同源性,Mega软件重构FKN基因进化树,应用Datamonkey分析FKN的负选择位点。序列分析发现人猿超科较旧大陆猴FKN基因除了有散在的点突变外,还有一明显的30bp的核苷酸缺失突变;人FKN基因序列与黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩、长臂猿、猕猴和叶猴的同源性分别是99.2%、98.4%、98.1%、96.5%、95.9%和93.8%,由此推导的氨基酸序列同源性分别是98.5%、98.0%、97.7%、94.7%、93.7%和90.5%;FKN基因进化树表明人与黑猩猩关系更近,FKN基因进化和通常认为的物种进化一致;Datamonkey分析结果显示FKN存在3个负选择位点53Q、84D、239N。成功获得人、黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩、长臂猿、猕猴和叶猴7种高等灵长类物种FKN全基因序列,为后续探讨FKN在高等灵长类物种进化过程中免疫学功能演变及其结构与功能的关系奠定基础。
- 洪晓武张亚平储以微高海峰蒋正刚熊思东
- 关键词：FKN测序进化分析
- 人猿超科和旧大陆猴7种高等灵长类FKN全基因序列的测定及进化分析
- 测定人猿超科(人、黑猩猩、大猩猩、红毛猩猩和长臂猿)和旧大陆猴(猕猴和叶猴)7种高等灵长类 FKN 全基因序列,探讨其系统进化分析。用简并引物 PCR(Degenerated PCR)法分别扩增 FKN 的3个外显子,其...
- 洪晓武张亚平储以微高海峰蒋正刚熊思东
- 文献传递
- 人猿超科较旧大陆猴Fractalkine基因存在30bp缺失突变
- 2007年
- 观察Fractalkine从旧大陆猴向人猿超科进化过程中基因的进化规律,为研究Fractalkine基因的进化和免疫学功能演变关系提供理论和实验基础,先用简并引物PCR(Degenerated PCR)法分别扩增Fractalkine的3个外显子,其产物经琼脂糖凝胶回收、纯化后测序,然后用BioEdit,Clustal及DNAStar软件拼接、分析各物种间基因序列的差异.发现人猿超科较旧大陆猴Fracta-lkine基因除了有散在的点突变外,在其粘蛋白样区还有一明显的30个核苷酸的缺失突变,并对突变的可能机制及其对Fractalkine可能的功能影响进行讨论.
- 洪晓武张亚平储以微邵先安蒋正刚熊思东
- 关键词：FRACTALKINE缺失突变
- 人、黑猩猩和叶猴FKN全基因的克隆及体外表达的比较研究被引量：1
- 2007年
- 目的克隆人、黑猩猩和叶猴FKN全基因及体外表达,比较研究FKN在进化过程中基因组水平和蛋白表达水平的差异。方法应用基因重叠延伸拼接PCR法(Gene splicing by overlapping extension PCR,SOE-PCR)将FKN的3个外显子编码序列依次进行前后拼接,然后插入pcDNA3.1/myc-His(-)A真核表达载体中,经酶切、测序鉴定后转染CHO细胞体外表达,RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot检测其表达产物。结果酶切、测序鉴定证实插入的基因片段为完整的FKN,RT-PCR可从转染的CHO细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段,其表达蛋白能分泌至胞外,SDS-PAGE显示其分子量约为95000,抗c-myc抗体可与载体上的c-myc蛋白特异性结合。测序显示人、黑猩猩和叶猴相比,FKN基因除了有散在的点突变外,还发现有一明显的30bp的缺失,但此缺失对FKN蛋白的表达并不影响。结论成功克隆人、黑猩猩和叶猴FKN全基因,基因组水平和蛋白表达水平的比较研究为后续探讨FKN在高级灵长类物种进化过程中免疫学功能的演变奠定基础。
- 洪晓武张亚平储以微高波邵先安蒋正刚熊思东
- 关键词：FKN基因克隆灵长类
- 地西他滨联合半量HAG方案治疗骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病被引量：13
- 2013年
- 目的探讨地西他滨治疗骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)和急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)的临床疗效及不良反应。方法收集马鞍山市人民医院血液科收治的12例MDS及AML患者,给予地西他滨联合半量HAG方法治疗,观察疗效及不良反应。结果 4例完全缓解,5例部分缓解,总有效率75%(9/12),平均无疾病进展生存时间为10.33月,3例死亡;8例出现IV度骨髓抑制,发生率为66.7%(8/12),6例并发感染,发生率为50%(6/12)。其他不良反应未发现。结论地西他滨联合半量HAG方案可以有效地治疗MDS及AML,主要不良反应为骨髓抑制及感染。
- 杨柳舒航吴冠宇谷和先张波洪有军邓娜洪晓武
- 关键词：地西他滨骨髓增生异常综合征急性髓系白血病
- 大黄提取片对高脂饮食诱导肥胖大鼠脂代谢及相关基因表达的影响被引量：23
- 2006年
- 目的:观察大黄提取片对高脂饮食诱导肥胖大鼠脂代谢、骨骼肌脂联素受体1(AdipoR1)和过氧化物酶体增殖物激活受体a(PPARa)基因表达的影响,以探讨大黄的减肥作用机理。方法:给饮食诱导肥胖大鼠灌服低、中、高剂量(200,400,800mg.kg-1.d-1)大黄提取片,测定血脂、脂联素,应用Real-time PCR检测大鼠骨骼肌中AdipoR1和PPARa mRNA表达水平。结果:大黄提取片呈剂量依赖性的增强降脂作用,高剂量大黄提取片能显著降低肥胖大鼠血总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA),显著增加骨骼肌组织PPARa mRNA表达水平,但3种剂量大黄均不能明显改变脂联素和骨骼肌AdipoR1mRNA水平。结论:大黄提取片可通过增加肥胖大鼠骨骼肌PPARa表达、降低血脂水平而促进机体减肥。
- 查兵兵李益明焦东海洪晓武万睿马春姑马端
- 关键词：大黄提取片脂联素脂联素受体
- mGM-CSF重组质粒的构建、表达及活性鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的 构建pc mGM CSF重组质粒载体 ,为mGM CSF基因治疗肿瘤的研究奠定基础。方法 采用RT PCR方法从小鼠脾脏中获得目的基因mGM CSF ,克隆于 pcDNA3 .1/Myc His( -) (A )质粒上 ,成为pc mGM CSF ,用PCR、酶切进行鉴定 ,然后用脂质体转染小鼠骨髓瘤细胞SP2 / 0 ,用G 418筛选后通过RT PCR和SDS PAGE鉴定 ,将转染SP2 / 0上清加入NFS 60细胞 ,检测蛋白活性。结果 重组质粒中含有mGM CSF基因 ,在SP2 / 0中有表达 ,且表达产物能分泌到肿瘤细胞外 ,分泌到细胞外的产物用mGM CSF依赖株NFS 60细胞检测证明具有生物学活性。结论 成功构建含mGM CSF真核表达重组质粒 。
- 洪晓武窦骏陈国兵陈峻崧赵枫姝
- 关键词：重组质粒活性鉴定基因治疗粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 基于表位多肽的抗TRIM22抗体的制备及其初步应用被引量：1
- 2008年
- 目的制备抗TRIM22多肽抗体及鉴定其性能。方法将TRIM22 N端15个氨基酸的多肽(MDFSVKVDIEKEVTC)与钥孔嘁血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫新西兰白兔制备抗血清;将TRIM22多肽与Affi-Gel 10偶联制备免疫亲和层析柱,兔抗血清经亲和层析纯化后得到TRIM22多肽特异性抗体;采用ELISA测定抗体效价、Western blot鉴定抗体特异性,并利用该抗体通过间接免疫荧光实验来检测TRIM22蛋白的细胞内定位。结果获得了抗TRIM22特异性抗体。Western blot结果显示该抗体能特异识别真核及原核表达的TRIM22蛋白。利用该抗体进行的间接免疫荧光实验发现TRIM22蛋白主要定位在HepG2细胞核中。结论该抗体的制备为TRIM22分子的功能研究提供了有力的工具。
- 高波段志坚高震洪晓武徐薇熊思东
- 关键词：多肽抗体WESTERNBLOT间接免疫荧光
- GM-CSF基因免疫治疗小鼠骨髓瘤的实验研究
- 2006年
- 目的:探讨mGM-CSF基因免疫小鼠是否可以诱发小鼠对肿瘤的免疫应答。方法:用SP2/0肿瘤细胞皮下接种Balb/c小鼠建立肿瘤动物模型,再以皮下或肌肉注射空质粒或重组质粒4次,共400μg。8周后观察小鼠的抑瘤率、肿瘤质量、肿瘤组织淋巴细胞的浸润情况,检测血清中IFN-γ和IL-2浓度,MTT法体外检测CTL、NK细胞活性。结果:基因免疫Balb/c小鼠8周后,重组质粒皮下注射组肿瘤质量[(0.880±0.405)g]轻于对照组[(1.548±0.221)g,P<0.01];重组质粒肌肉注射组肿瘤质量[(0.378±0.411)g]明显轻于对照组[(1.554±0.249)g,P<0.001];重组质粒肌肉注射组肿瘤组织可见淋巴细胞浸润;IFN-γ和IL-2的浓度及CTL、NK细胞活性显著高于对照组。结论:GM-CSF基因免疫能诱发小鼠抗肿瘤作用,肌肉注射比皮下注射效果好。
- 洪晓武窦骏赵枫姝陈峻崧陈国兵张爱凤
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因免疫荷瘤鼠抗瘤活性
- TIM家族成员对Th细胞分化的调节作用被引量：1
- 2006年
- TIM(T-cell immunoglobulin mucin,TIM)是新近发现的一个基因家族,其中TIM-3、TIM-1分别选择性的表达于Th1与Th2细胞,TIM家族在Th细胞分化过程中扮演了重要的角色,其在免疫调节中的作用初见端倪。
- 洪晓武储以微熊思东
- 关键词：TIMTH细胞分化免疫调节
