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潘杰彦: 作品数：24 被引量：126H指数：7; 供职机构：南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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表达鸡传染性支气管炎病毒SD/97/01株S1蛋白的重组杆状病毒的构建被引量：7: 2002年; 采用BAC TO BAC 杆状病毒表达载体系统构建了表达鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)呼吸型毒株SD/ 97/ 0 1S1蛋白的重组杆状病毒 .含SD/ 97/ 0 1株S1基因的重组质粒pMDSD970 1S1用BamHI和SalI双酶切后 ,回收目的片段并克隆到杆状病毒转座载体pFASTBAC HTa中多角体基因启动子的下游 ,筛选出重组转座质粒pFASTSD970 1S1并转化大肠杆菌DH10 BAC 后 ,获得重组穿梭质粒rBacmidSD970 1S1.用重组穿梭质粒DNA转染昆虫Sf9细胞 ,获得了含SD/ 97/ 0 1S1基因的重组杆状病毒rAcSD970 1S1.重组病毒感染Sf9细胞后 ,用SDS PAGE、Westernblot和IFA对细胞表达产物进行检测和分析 .结果表明 :构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达SD/ 97/ 0 1的S1蛋白 ,该蛋白具有天然蛋白的抗原性 .; 戴亚斌陈德胜丁铲潘杰彦刘兴友芦银华刘梅陈溥言蔡宝祥; 关键词：传染性支气管炎病毒 S1基因 S1蛋白基因重组

传染性支气管炎病毒地方分离毒株S1基因的RT-PCR方法研究被引量：6: 2000年; 以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度值分别为 1 5mmol/L ,2 0 0 μmol/L和 40 μmol/L。使用此反应体系对国内IBV地方分离毒株JS/95 / 0 3 ,SD/ 97/ 0 1等 10多个毒株的S1基因进行扩增 ,均扩增出预期 1 7kb的完整S1基因。; 陈德胜潘杰彦贾立群戴亚斌蔡宝祥陈溥言; 关键词：传染性支气管炎病毒地方分离株 S1基因

重组杆状病毒表达的2株传染性支气管炎病毒S1蛋白的免疫原性评价被引量：7: 2003年; 利用 Bac- to- Bac杆状病毒表达系统构建了 2株重组杆状病毒 r Ac JS95 0 3S1和 r Ac SD970 1S1,分别表达了 2株致病性不同的传染性支气管炎病毒的 S1基因。用感染重组杆状病毒的昆虫细胞裂解液对 2周龄的伊莎公雏进行免疫 ,根据鸡免疫后的抗体水平动态变化和攻毒后鸡肾脏和气管的保护力判定它们的免疫原性。结果显示 ,重组杆状病毒表达的 IBV S1蛋白可以诱导抗体产生和免疫保护反应 ,2毒株间也存在着一定程度的交叉免疫保护反应。; 戴亚斌丁铲刘梅陈德胜潘杰彦芦银华陈溥言蔡宝祥; 关键词：重组杆状病毒免疫原性

传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)S2蛋白基因的序列测定和分析被引量：3: 2001年; 根据GenBank上发表的IBVS2基因序列 ,自行设计了两对引物 ,分别扩增SD/ 97/ 0 2株S2基因的上游110 0bp部分和下游的 90 0bp部分 ,两段序列拼接后包含了S2全基因的序列。将此两段分别克隆入pGEMT easy载体 ,测序后将序列用分析软件DNASTAR和网上的BLAST软件进行分析 ,结果表明 ,S2基因比S1基因相对来说更保守 ,位于氨基酸第 5 6 0～ 6 0 0位很可能是与囊膜锚着的部位 ,而S2与S1的交界处以HRRRR为特征 ,这不同于常规的RRF/SRR。; 潘杰彦陈德胜戴亚斌陈溥言; 关键词：传染性支气管炎病毒基因序列分析 S2蛋白鸡病毒

生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达被引量：7: 2003年; 分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约占菌体总蛋白的 30 %左右。 0 0 5～ 1mmol·L-1IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大 ,0 0 5mmol·L-1IPTG即可达到有效的诱导效果 ,但单位体积内的表达产量以 0 5mmol·L-1时为最高。乳糖诱导 4h(37℃ )的效果明显低于IPTG ,但当培养时间延长至 8h时 ,2 0mg·mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果 ,10和 5mg·mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果。SS N/X融合蛋白在 2 6℃表达时 ,主要以可溶性形式存在 ,占75 8% ,包涵体仅占 2 4 2 % ;而SS N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在 ,占 6 0 2 % ,可溶性蛋白仅占 39 8%。SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性。; 刘永庆刘文波潘杰彦杜念兴陈溥言赵国屏; 关键词：生长抑素基因 IPTG 动物生长

IBV青岛腺胃分离株S1纤突蛋白基因的克隆与鉴定被引量：2: 2000年; 参考Genebank发表的传染性支气管炎病毒 (IBV)S1纤突蛋白基因序列 ,自行设计合成了 1对引物 ,对IBV青岛腺胃分离株 (SD/97/0 2 )RNA进行RT PCR扩增。产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,呈现 1条 16 5 7bp的条带 ,将其克隆入pMD18 T载体中 ,并进行序列测定 ,证实为S1基因。将此重组质粒命名为pMDQXS1。; 潘杰彦陈德胜戴亚斌陈溥言; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒基因克隆

用马立克氏病病毒强毒的BamH-L片段核酸鉴定血清1型毒株: 2001年; 马立克氏病病毒 (MDV) GA强毒株的 Bam H - L 片段 DNA全长为 2 892 bp,G+C比率为 5 5 .91%。用内切酶将其亚克隆为 6个片段 :Bam H - Pst 、Pst - Pst 、Pst - Cla 、Cla - Sm a 、Sm a - Sma 和 Sm a - Bam H 。用地高辛标记 L 片段 DNA或者分别标记其 6个亚片段核酸 ,通过斑点杂交试验都可将 MDV血清 1型毒株与 2型和 3型的毒株区分开来 ,应用 PCR方法可获得相同结果。但 PCR方法更敏感、更快捷。结果表明 ,MDV GA强毒株的Bam H - L片段 DNA对 MDV血清; 陈溥言李运敏陈德胜张雪莲魏荣潘杰彦戴亚斌范伟兴姜焱丁巧玲; 关键词：马立克氏病病毒

传染性支气管炎病毒腺胃青岛株(SD/97/02)核衣壳蛋白基因的克隆与鉴定被引量：5: 2000年; 潘杰彦陈德胜王忠田陈溥言蔡宝祥; 关键词：核衣壳蛋白基因

传染性支气管炎病毒(IBV)国内分离毒株的分子流行病学分析被引量：40: 2003年; 选择9个来自我国不同地区的传染性支气管炎病毒(IBV)地方毒株,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出它们的完整S1基因,再将各扩增产物与T载体连接转化,筛选出相应毒株的阳性克隆,采用双脱氧链终止法测定基因序列。将这些国内分离毒株、我国常用疫苗毒株和国际上其他血清型的代表参考毒株一起,用DNAstar软件分别进行基因与氨基酸系统发生进化关系分析,结果将这些毒株分成3群:Ⅰ群内的毒株与疫苗毒株H120和M41的同源性很高,Ⅱ群内的毒株与其他毒株的同源性较低,Ⅲ群内的毒株与疫苗毒株有一定的同源性。3个群的毒株以疫苗毒株H120为核心,形成进化距离的梯度,提示弱毒疫苗的使用可能是我国IBV流行毒株的主要来源之一。分析结果还显示,我国IBV的分离毒株没有明显的时间和地理分布规律可循。; 陈德胜潘杰彦曹瑞兵戴亚斌陈溥言; 关键词：传染性支气管炎病毒 IBV 分子流行病学冠状病毒

传染性腺胃炎病原学研究进展被引量：8: 1999年; 自１９９４年以来，我国十多个省市先后流行了一种以腺胃肿胀、腺胃乳头溃疡为特征的传染病。关于本病的病原众说纷纭，但大多数学者认为是由冠状病毒引起的。作者结合实验室工作，并综述国内外在有关类似症候的传染病后，认为：本病的主要病原应当是网状内皮增生症病毒，但冠状病毒、呼肠孤病毒也在本病的发生中起到重要的协同作用。根据本病的共同性的症状。; 吴延功潘杰彦杜元钊朱万光; 关键词：传染性腺胃炎病原病毒

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