王佩
- 作品数：9 被引量：34H指数：4
- 供职机构：中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)基因表达的影响被引量：11
- 2015年
- 【目的】探索益生性酿酒酵母菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)表达的调节作用,为在分子水平上揭示益生菌对防御素的调控机理提供一定的理论基础及依据。【方法】首先将新鲜的绵羊瘤胃组织用PBS和抗生素处理后进行瘤胃上皮细胞原代培养,当原代细胞数量长到细胞培养瓶的85%以上时,将细胞传于12孔板用于细胞刺激试验。同时将活化并纯化后的酿酒酵母菌25℃、180 r/min有氧培养48 h后,进行5次平行平板计数试验,根据平板计数的数据处理方法,得到浓度为5.2×108CFU·m L-1的酿酒酵母菌液,再通过倍比稀释把所得菌液依次稀释成浓度为5.2×107、5.2×106、5.2×105、5.2×104CFU·m L-1的菌液,用以上不同浓度(5.2×104—5.2×108CFU·m L-1)的酿酒酵母菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞分别进行不同时间(2、4、8、12、24 h)的刺激,并设置对照组用DMEM/F12培养基代替酿酒酵母菌。然后提取总RNA,逆转录为c DNA后,利用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测瘤胃上皮细胞中SBD-1表达差异。最后用SAS 9.2软件对数据进行相关差异性分析。【结果】荧光定量PCR结果表明,在各时间组内SBD-1 m RNA的表达量随着菌液浓度的增加均呈先升高后降低的趋势,当菌液浓度为5.2×107CFU·m L-1时表达量达到最大,并与对照组和其他浓度组相比差异极显著(P<0.01)。当菌液浓度一定时,SBD-1 m RNA的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势,刺激时间为12 h时SBD-1 m RNA表达量达到峰值,之后呈下降趋势。因此,当浓度为5.2×107CFU·m L-1的菌液刺激瘤胃上皮细胞12 h后,SBD-1基因的表达量达到最高,且与此浓度下其他时间组的表达量相比差异极显著(P<0.01)。ELISA检测结果显示,SBD-1蛋白表达趋势与SBD-1 m RNA检测结果基本一致。不同浓度的菌液分别刺激绵羊瘤胃上皮细胞2、4、8、12、24 h后均
- 金鑫张曼范燕茹王佩杨银凤
- 关键词：酿酒酵母菌实时荧光定量PCR酶联免疫吸附测定绵羊
- 乳酸杆菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞内SBD-1的表达被引量：4
- 2016年
- 为了解不同乳酸杆菌的刺激对绵羊瘤胃上皮细胞中绵羊β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)的可能调节作用,本研究选用了2株具有益生作用的乳酸杆菌,即干酪乳杆菌Zhang(L.casei Zhang)和植物乳杆菌P-8(L.plantarum P-8),首先,运用实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR)检测与乳酸杆菌共培养后的绵羊瘤胃上皮细胞中SBD-1mRNA的相对表达量;其次,探讨了2株乳酸杆菌诱导SBD-1 mRNA表达的差异性,选取优势菌株;最后,运用RTq PCR技术和酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法,检测优势菌株活菌、灭活菌及其培养上清液对SBD-1基因及蛋白水平表达的影响。结果表明:2株乳酸杆菌均能促进SBD-1 mRNA的相对表达量,乳酸杆菌的浓度为107CFU/m L、刺激细胞8 h时能极显著促进SBD-1 mRNA的相对表达量(P<0.01),而L.plantarum P-8强于L.casei Zhang;进一步的研究表明L.plantarum P-8的灭活菌亦可显著诱导SBD-1的基因及蛋白表达(P<0.05),但弱于活菌。本研究结果表明L.plantarum P-8和L.casei Zhang均可诱导绵羊瘤胃上皮细胞内SBD-1的差异性表达。
- 范燕茹王佩金鑫杨银凤
- 关键词：乳酸杆菌酶联免疫吸附测定
- 中国驯鹿瘤胃上皮细胞的体外分离培养被引量：9
- 2014年
- 为了建立驯鹿瘤胃上皮细胞的体外分离及培养方法，试验将驯鹿瘤胃组织进行钝性分离得到上皮层，用0．25％Trypsin-0．02％EDTA消化液37℃连续振荡消化上皮组织3～4h，每30min更换新的消化液，从消化第4次起过滤消化液，离心收集细胞，采用含有15％FBS的M199培养液培养和传代，在显微镜下观察其细胞形态进行形态学鉴定以及采取免疫细胞化学的方法检测细胞内的角蛋白CKl9进行化学鉴定。结果表明：用上述试验方法可以获得能够用于培养的细胞，并能将这些细胞成功地进行了原代和传一代的体外培养。通过细胞形态学观察和免疫细胞化学检测，证实所培养的细胞为上皮细胞。说明试验基本建立了驯鹿瘤胃上皮细胞在体外分离培养的方法。
- 范燕茹王佩金鑫王冠玉邱凯王秀芳苏日古格余兴邦杨银凤
- 关键词：瘤胃上皮细胞原代培养体外培养
- 减源对密植夏玉米品种抗倒伏性能及产量的调控效应被引量：2
- 2022年
- 于2019年和2020年采用二因素裂区试验设计,主区为不同耐密性高产品种:郑单958(紧凑型)和正大12(半紧凑型);副区为减源强度:在花前一周从上至下分别移除植株1片叶(D1)、2片叶(D2)、3片叶(D3)和4片叶(D4),以不做任何处理为对照(CK)。对乳熟期和蜡熟期的玉米植株形态、基部第3节间的穿刺强度、折断力及籽粒产量构成因素等指标进行分析,探究密植玉米植株抗倒伏性能及籽粒产量对叶源减少的响应。结果表明:乳熟期,D1、D2处理的株高、穗位高和穗位系数较CK分别显著降低1.03%、3.03%,2.29%、6.17%和1.32%、4.17%,茎粗和单位茎长干物质量较CK分别增加4.15%、33.94%和1.91%、5.72%。蜡熟期,D2处理时郑单958的穿刺强度和折断力较CK分别提高了26.51%和32.44%,正大12的穿刺强度和折断力较CK分别提高了55.28%和21.53%。灌浆期,郑单958和正大12的D2处理可溶性糖含量较CK分别增加2.91%和10.83%,木质素含量分别增加2.74%和6.90%,D3、D4处理的纤维素含量较CK分别降低1.17%和0.47%、11.57%和13.72%。D2处理的总倒伏率显著降低且产量最高,郑单958达11203.90 kg·hm^(-2),正大12达11742.34 kg·hm^(-2)。可见,适度去除顶部1~2片叶可优化夏玉米株型,通过影响茎粗使节间、单位节间干物质量得到更好地分配,从而提升抗倒伏性能,改善干物质向籽粒的分配进程,最终实现产量提高。
- 肖金宝王海琦王佩王佩刘铁宁刘铁宁贾志宽
- 关键词：夏玉米密植株型抗倒伏
- β-防御素在感染和炎症过程中的作用被引量：1
- 2015年
- 防御素(defensins)在整个进化过程中构成了动物体内最大的一组宿主防御肽,这些富含半胱氨酸的阳离子肽具有广谱的抗微生物活性,能有效杀灭细菌、酵母和病毒等微生物。因此,防御素是生物体内先天性免疫的一个主要组成部分。防御素在免疫调节中的功能已被广泛研究,文章综述了β-防御素的免疫调节活性及β-防御素在感染和炎症过程中作用的最新进展。
- 金鑫张曼范燕茹王佩杨银凤
- 关键词：Β-防御素先天性免疫免疫调节活性炎症
- 生产素(Ghrelin)对胃肠道的保护和治疗作用被引量：3
- 2015年
- 生长素（Ghrelin）最初是由日本学者Kojima等[1]从人和鼠的胃中分离出来的且是一种主要来源胃的脑肠肽[2]。Ghrelin是生长激素促分泌素受体1a（growth hormone secretagogue receptor 1a,GHS-R1a）的惟一的一个内源性配体,与垂体前叶作用后能够强烈的促进生长激素的释放,并呈剂量依赖性[1]。Ghrelin除了具有刺激生长激素释放作用外,还能够促进食物吸收和胃的排空以及调节能量消耗等多种生理功能,并且对胃肠道具有保护和促进愈合的作用。本文主要综述了Ghrelin对动物和人类胃肠道的保护和治疗作用最新研究进展。
- 张曼金鑫范燕茹王佩杨银凤
- 关键词：GHRELIN胃肠道损伤内源性配体再灌注损伤脑肠肽
- 不同信号通路抑制剂对酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的影响
- 2016年
- 为了探索核因子-kB(nuclear factor-k-gene binding,NF-kB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)通路是否介导益生性酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae,SC)诱导绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(sheep beta-defensin-1,SBD-1)基因表达的调控机制。首先建立绵羊瘤胃上皮细胞培养体系作为体外试验模型,将传代细胞分为4个试验组(SC+PDTC、SC+PD98059、SC+SB202190、SC+SP600125)、4个阴性对照组(PDTC、PD98059、SB202190、SP600125)、1个阳性对照组(SC)和1个空白对照组。向试验组和阴性对照组内分别加入NFkB通路特异性抑制剂PDTC(50μmol/L)、MAPKs通路ERK 1/2特异性抑制剂PD98059(20μmol/L)、p38特异性抑制剂SB202190(20μmol/L)和JNK特异性抑制剂SP600125(20μmol/L)4种抑制剂,作用1h后,用PBS将各组细胞清洗3次,然后向试验组和阳性对照组中分别添加浓度为5.2×107 CFU/mL的酿酒酵母菌液100μL,并向阴性对照组和空白对照组中分别添加等量的DMEM/F12培养液。将以上10组细胞置于37℃、5%CO2培养箱中培养12h后提取各组细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测各组SBD-1 mRNA表达水平的变化。结果显示:与阳性对照组相比,4种抑制剂对酿酒酵母菌促进瘤胃上皮细胞SBD-1的诱导表达都具有抑制作用,且存在极显著性差异(P<0.01),而各阴性对照组与空白对照组相比差异均不显著(P>0.05);4种抑制剂的抑制效果依次表现为SB202190>PDTC>SP600125>PD98059,且SB202190抑制效果极显著高于PDTC(P<0.01),而PDTC抑制效果与SP600125、PD98059相比差异均不显著(P>0.05)。结果表明,NF-kB和MAPKs通路可能均介导酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达,但可能以MAPKs途径为主要信号通路。
- 金鑫张曼范燕茹王佩刘骄杨银凤
- 关键词：酿酒酵母菌抑制剂信号通路实时荧光定量PCR
- 枯草芽孢杆菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1表达的影响被引量：17
- 2015年
- 选用益生枯草芽孢杆菌研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外成功培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用枯草芽孢杆菌对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞进行不同浓度、不同时间的刺激,利用荧光定量PCR技术(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR)从mRNA水平检测刺激后上皮细胞中绵羊β-防御素-1(Sheep beta-defensin-1,SBD-1)基因表达水平的差异。结果表明:当菌液浓度为1010 cfu·mL-1刺激上皮细胞8h后,SBD-1的表达量达到最高;不同的菌液浓度诱导下SBD-1的表达量均有显著增加,109、1010、1011 cfu·mL-1菌液浓度刺激下,SBD-1的表达量与空白相比差异极显著(P<0.01)。结果表明,枯草芽孢杆菌能够诱导绵羊瘤胃上皮细胞内SBD-1基因的表达。
- 王佩范燕茹金鑫杨银凤
- 关键词：枯草芽孢杆菌荧光定量PCR
- 减源对密植夏玉米光合性能及根系特性调控效应研究
- 2023年
- [目的]玉米密植条件下存在叶片冗余,适度去叶有利于玉米光热资源再分配,提高玉米产量。[方法]本试验于2021年和2022年进行,选用紧凑型玉米品种郑单958,采用二因素裂区试验设计,主区为种植密度:常规密度(67500株·hm-2)和高密度(97500株·hm-2);副区为减源强度:于吐丝后7 d分别移除植株顶部2片叶、4片叶和6片叶,以不减叶处理为对照。对开花期、灌浆期、乳熟期和蜡熟期的玉米植株形态、光合性能、根系特性和产量构成因素等指标进行分析,探究玉米光合性能和根系特性对叶源减少的响应。[结果]常规密度下去叶不利于玉米叶源光合性能的改善,而高密度种植条件下去除植株顶部2片叶能够延缓剩余叶源的衰老,叶面积指数衰减程度减缓,其群体光合速率(CAP)在灌浆期仍较对照高出24.5%。常规密度种植条件下,去叶不利于深层根系生长,降低根系活性。而高密度种植条件下去2叶能够促进40~100 cm土层根系生长,蜡熟期根系干重较对照增加53.7%,根系活性增强7.0%。常规密度下去2叶、去4叶和去6叶会导致玉米产量分别下降7.5%,21.7%和26.5%,而高密度种植条件下去2叶籽粒产量较对照提高7.8%,而过度减源处理(去4叶和去6叶)产量降低幅度分别为14.5%和22.7%。[结论]由此可见,常规密度下减少叶源不利于玉米生长,而高密度种植条件下适度减少叶源能显著改善玉米光合性能,增强根系特性,最终实现玉米产量提升。
- 杨胜飞肖金宝王佩王佩杨任涛刘铁宁刘铁宁贾志宽
- 关键词：夏玉米光合性能根系特性
