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祁静

作品数:10 被引量:13H指数:3
供职机构:中国科学院苏州生物医学工程技术研究所更多>>
发文基金:江苏省自然科学基金江苏省科技支撑计划项目江苏省研究生培养创新工程项目更多>>
相关领域:生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>

文献类型

  • 6篇专利
  • 4篇期刊文章

领域

  • 4篇生物学
  • 1篇自动化与计算...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 7篇病毒
  • 5篇内毒素检测
  • 5篇杆状
  • 5篇杆状病毒
  • 5篇杆状病毒表达
  • 5篇杆状病毒表达...
  • 3篇内毒
  • 3篇内毒素
  • 3篇活性
  • 3篇多肽
  • 2篇滴度
  • 2篇阳性
  • 2篇质粒
  • 2篇散射
  • 2篇主观
  • 2篇主观性
  • 2篇鲎试剂
  • 2篇细菌内毒素
  • 2篇结合活性
  • 2篇昆虫杆状病毒...

机构

  • 10篇中国科学院
  • 2篇苏州大学
  • 1篇中国药科大学
  • 1篇厦门市鲎试剂...

作者

  • 10篇祁静
  • 10篇张春
  • 6篇刘涛
  • 3篇齐兴梅
  • 3篇刘晓玫
  • 3篇潘俊杰
  • 3篇王影影
  • 3篇张轶岭
  • 1篇李泰明
  • 1篇郭玲玲
  • 1篇贡成良
  • 1篇李珍

传媒

  • 2篇生物工程学报
  • 1篇生物技术
  • 1篇基因组学与应...

年份

  • 1篇2019
  • 2篇2017
  • 1篇2016
  • 3篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2013
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
重组鲎三因子试剂及其检测内毒素的方法
本发明公开了一种重组鲎三因子试剂,其包含如下组分:无内毒素水;无热源Tris缓冲液;吐温‑20;荧光底物;重组鲎C因子;重组鲎B因子;重组鲎凝固酶原因子。本发明提供一种重组鲎三因子试剂及其检测内毒素方法,通过利用昆虫杆状...
张春张轶岭祁静刘晓玫
文献传递
一种测定病毒滴度的方法
本发明提供了一种测定病毒滴度的方法,利用病毒感染细胞的侧向角散射的变化测定病毒的滴度。本发明的方法,避免了现有技术中测定病毒滴度普遍存在的判断结果主观性过强、测定结果不够准确的问题,可以客观的记录数据,其测定结果具有优越...
祁静刘涛张春潘俊杰
重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用
本发明公开了一种重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用。作为本发明技术方案的典型实施方案之一,其可以包括:利用蛋白质体外剪切系统,在特定位点断开鲎C因子中能与内毒素结合的功能片段,分别连接到断裂蛋白质内含子的...
张春王影影齐兴梅刘涛祁静
文献传递
重组鲎三因子试剂及其检测内毒素的方法
本发明公开了一种重组鲎三因子试剂,其包含如下组分:无内毒素水;无热源Tris缓冲液;吐温‑20;荧光底物;重组鲎C因子;重组鲎B因子;重组鲎凝固酶原因子。本发明提供一种重组鲎三因子试剂及其检测内毒素方法,通过利用昆虫杆状...
张春张轶岭祁静刘晓玫
昆虫细胞制备AAV-ITR基因表达微载体被引量:1
2015年
AAV-ITR基因表达微载体是只含有腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)倒置末端重复序列(Inverted terminal repeats,ITR)、基因表达顺式元件和目的基因,而不含有其他外源DNA序列的双链或单链DNA。本研究利用杆状病毒表达系统,制备得到两种重组杆状病毒Bac-ITR-EGFP和Bac-inrep,并将二者的P3代病毒共同感染昆虫细胞Spodoptera frugiperda(Sf9),抽提小分子量DNA,获得AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,2×107的Sf9细胞抽提可以得到100μg AAV-ITR-EGFP基因表达微载体,核酸电泳显示AAV-ITR-EGFP基因表达微载体主要以单体和二聚体的形式存在。将AAV-ITR-EGFP基因表达微载体通过polyethylenimine(PEI)转染HEK 293T细胞,24 h后荧光显微镜观察有EGFP表达,48 h后达到高峰,转化效率达到65%。
李泰明潘俊杰祁静张春
关键词:杆状病毒表达系统非病毒载体
一种测定病毒滴度的方法
本发明提供了一种测定病毒滴度的方法,利用病毒感染细胞的侧向角散射的变化测定病毒的滴度。本发明的方法,避免了现有技术中测定病毒滴度普遍存在的判断结果主观性过强、测定结果不够准确的问题,可以客观的记录数据,其测定结果具有优越...
祁静刘涛张春潘俊杰
文献传递
重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用
本发明公开了一种重组Sushi多肽的表达质粒体系、其构建方法及应用。作为本发明技术方案的典型实施方案之一,其可以包括:利用蛋白质体外剪切系统,在特定位点断开鲎C因子中能与内毒素结合的功能片段,分别连接到断裂蛋白质内含子的...
张春王影影齐兴梅刘涛祁静
文献传递
基于蛋白质反式剪接在大肠杆菌中表达鲎C因子CES多肽被引量:6
2013年
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶原,可替代鲎试剂用于内毒素检测。鲎C因子N端Cys-EGF-sushi1-sushi2(CES)片段中的sushi1区域是与内毒素结合的关键部位。本研究在sushi1结构域中的特定位点断开CES与内毒素结合的功能片段,然后分别和蛋白质内含肽Ssp DnaX的N端片段(IN)和C端片段(IC)连接,并在大肠杆菌中表达,表达产物经亲和层析纯化、复性以及内毒素去除后,利用蛋白质反式剪接系统,在体外诱导该蛋白质内含肽发生剪接,重新得到C因子的CES蛋白,并检测其活性。实验结果表明此重组CES蛋白具有结合内毒素活性,提示在大肠杆菌系统中开发低成本内毒素检测试剂的可行性。
王影影齐兴梅刘涛祁静张春郭玲玲
关键词:反式剪接内含肽
昆虫细胞表达鲎C因子内毒素活性检测的研究被引量:6
2017年
[目的]开发一种低成本的内毒素检测试剂和方法。[方法]Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达重组鲎凝血C因子,利用动态荧光法进行内毒素检测活性分析。将细胞培养基经过超滤处理,分析其对内毒素检测灵敏度的影响;分析低温储存的检测试剂在不同储存时间,内毒素的检测活性。[结果]经过超滤处理的培养基,内毒素检测灵敏度明显提高,可达到0.05 EU/mL,检测时间90 min内完成;检测试剂在-20℃保存6个月内,检测灵敏度仍可以达到0.1EU/mL。[结论]在昆虫细胞中合成的重组鲎凝血C因子,无需经过蛋白纯化,直接将培养上清用于内毒素检测,灵敏度为0.1~0.05 EU/mL,高于普通鲎试剂的检测水平。
张轶岭祁静张春刘晓玫
关键词:杆状病毒表达系统内毒素检测
Bac-to-Bac/BmNPV杆状病毒在家蚕幼虫中表达重组鲎C因子被引量:6
2014年
鲎C因子是鲎血细胞中一种对内毒素具有高亲和力的丝氨酸蛋白酶,被内毒素激活后可水解人工合成的三肽底物,因而能替代传统的鲎试剂用于内毒素检测。通过RT-PCR从东方鲎血细胞中扩增出鲎C因子基因(factor C)序列,利用Bac-to-Bac/BmNPV杆状病毒表达系统在家蚕幼虫中表达该蛋白,并对其进行活性测定。结果显示:被感染的家蚕血清稀释后能检测到Factor C活性,稀释500倍的血清可以用于内毒素检测,且其灵敏度能达到0.2 EU/mL,有望开发新型的、低成本的内毒素检测试剂。
祁静刘涛李珍贡成良吴海苹张春
关键词:家蚕幼虫
共1页<1>
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