刘晓玫
- 作品数:21 被引量:17H指数:3
- 供职机构:中国科学院苏州生物医学工程技术研究所更多>>
- 发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理更多>>
- 近红外荧光蛋白标记乳腺癌细胞外泌体的构建及鉴定被引量:6
- 2016年
- 外泌体(Exosomes)是一种大小为30~100am的细胞外膜囊泡,与细胞的生物学功能及细胞间的信号传递有着密切的关系,尤其在癌症的诊断及治疗等领域发挥重要作用。为将外泌体更好地应用于乳腺癌肿瘤传递机制的研究,本文首先通过分子克隆手段将近红外荧光蛋白iRFP682基因和外泌体标记蛋白CD63基因克隆到含腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)末端倒置重复序列(Inverted repeat terminal,ITR)的质粒载体上,构建融合表达近红外荧光蛋白和CD63蛋白的重组真核表达载体。然后再与辅助质粒共转染AAV-293细胞,包装重组腺相关病毒、纯化测量滴度后用于感染乳腺癌细胞,最后通过荧光筛选出稳定表达近红外荧光蛋白的乳腺癌细胞株。通过对乳腺癌稳定株的分离、纯化及鉴定,最终得到一个新型生物标记物:iRFP682标记的乳腺癌细胞来源的外泌体,为后续研究外泌体在乳腺癌肿瘤微环境中的分布及信号传递提供保障。
- 李泰明蓝文俊黄灿张春刘晓玫
- 关键词:外泌体CD63乳腺癌
- 重组鲎三因子试剂及其检测内毒素的方法
- 本发明公开了一种重组鲎三因子试剂,其包含如下组分:无内毒素水;无热源Tris缓冲液;吐温‑20;荧光底物;重组鲎C因子;重组鲎B因子;重组鲎凝固酶原因子。本发明提供一种重组鲎三因子试剂及其检测内毒素方法,通过利用昆虫杆状...
- 张春张轶岭祁静刘晓玫
- 基于AAV-ITR的基因表达微载体及其构建方法和应用
- 一种基于AAV-ITR的基因表达微载体及其构建方法和应用。该微载体包括用于表达外源基因的基因表达框,所述基因表达框两端分别连接有AAV基因组的ITR序列。其中,所述基因表达框优选采用线性表达框,包含在两段ITR序列之间依...
- 张春平菡刘晓玫
- AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法
- 本发明提供了一种AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法,其包括:构建含有外源基因的第一重组质粒,并将其包装得到第一rAAV;构建含有AAV Rep78的第二重组质粒,并将其包装得到第二rAAV;第一rAA...
- 刘晓玫张春姜岩袁运魏静王东鑫王飞飞魏峥曹金晶
- 文献传递
- 制备外源功能基因定点整合的人神经干细胞的方法
- 本发明公开了一种制备外源功能基因定点整合的人神经干细胞的方法,所述细胞株为定点整合有外源功能基因,且能稳定表达外源功能基因的人神经干细胞株;通过构建一种高效表达外源功能基因的质粒载体,然后用此质粒包装的重组腺相关病毒(r...
- 张春张金菊张云刘晓玫栾佐蓝文俊
- 文献传递
- AAV介导的RNAi对SARS-CoV-2 S基因表达的抑制作用
- 2022年
- 旨在研究AAV介导shRNA在体内、体外特异性抑制SARS-CoV-2 S基因的表达,为抑制SARS-CoV-2感染提供参考。设计了7条靶向SARS-CoV-2 S基因的shRNA,分别构建了shRNA1-7的质粒表达载体,与S基因表达载体共同转染体外培养细胞,通过qRT-PCR和Western blot分析其对S基因表达的抑制作用,筛选出抑制效率最高的shRNA1;构建包装表达shRNA1的重组腺相关病毒(rAAV)载体,将rAAV-shRNA1与S基因表达质粒共同转导293T细胞,S基因表达的抑制率为65.6%;两者通过滴鼻或肌肉注射方式共同转导小鼠,qRT-PCR检测其在体内对S基因表达的抑制率分别为36.8%和90.3%。
- 刘晓玫王东鑫张春魏双施
- 关键词:刺突蛋白RNA干扰腺相关病毒
- 基于双链微载体将CAR基因定点整合至T细胞AAVS1位点的方法
- 本发明公开了一种基于双链微载体将CAR基因定点整合至T细胞AAVS1位点的方法,其包括用来携带CAR基因的双链微载体,命名为CELiD<Sup>CAR</Sup>;帮助微载体定点整合至人19号染色体AAVS1位点的质粒,...
- 张春张云刘晓玫张轶岭
- 文献传递
- 血液制品经济与可持续发展——值得选择的未来
- 血液制品主要指的是通过血浆分离或者重组DNA技术得到的蛋白治疗剂,在临床手术和罕见病、出血性疾病、免疫缺陷症患者的治疗上具有不可替代的作用。血液制品既是一个传统产业,也是一个新兴产业,现代生物技术,特别是基因重组技术和制...
- 蒙青林刘晓玫张春
- 关键词:血液制品可持续发展
- 文献传递
- 血液制品经济与可持续发展——值得选择的未来
- 血液制品主要指的是通过血浆分离或者重组DNA技术得到的蛋白治疗剂,在临床手术和罕见病、出血性疾病、免疫缺陷症患者的治疗上具有不可替代的作用。血液制品既是一个传统产业,也是一个新兴产业,现代生物技术,特别是基因重组技术和制...
- 蒙青林刘晓玫张春
- 关键词:血液制品可持续发展
- CRISPR/Cas系统的核酸诊断技术应用进展
- 2021年
- 建立快速、灵敏、特异的核酸分析方法,对于精准的疾病诊断和有效的临床治疗具有重要意义。规则成簇间隔短回文重复序列(CRISPR)系统被认为是具有广泛医学应用潜力的通用型基因组编辑工具。近几年,由于CRISPR/Cas系统高度的灵活性、敏感性和特异性而被开发用于病原体检测、肿瘤早期诊断、单核苷酸多态性(SNP)分析等。本文概括介绍了CRISPR/Cas系统核酸检测技术及其应用进展。
- 刘晓玫魏双施于农
- 关键词:核酸检测病原检测肿瘤诊断