薛冰华
- 作品数：12 被引量：12H指数：2
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 基础培养液和小分子对猪类胚胎干细胞建系效率的影响
- 2015年
- 猪是人类疾病模型的重要候选动物之一,建立真正的猪胚胎干细胞系将极大地推动该领域的进展。培养液和细胞信号通路是目前限制猪胚胎干细胞系建立的两个主要影响因素。该研究探索了基础培养液(KO-DMEM和DMEM/F12)和小分子(PD0325901和CHIR99021,简称2i)对猪类胚胎干细胞建系效率的影响。实验结果显示,发育至6 d的体外受精胚胎在KO-DMEM培养液中贴壁率和原代克隆形成率显著高于DMEM/F12培养液;添加2i后,两种培养液中的胚胎贴壁率和原代克隆形成率均下降。在KO-DMEM培养液中可获得稳定传代的细胞系,获得的细胞系呈碱性磷酸酶阳性,核型正常,表达Oct4、Sox2和Nanog,不表达Cdx2。细胞系可成功进行转基因操作。结果表明,以KO-DMEM为基础培养液的培养体系可以获得猪类胚胎干细胞,2i不利于胚胎贴壁和原代克隆形成。该研究为猪胚胎干细胞建系培养体系的选择及推断猪胚胎干细胞多能性细胞信号调控通路提供了重要的实验依据。
- 李妍薛冰华张雪赫义龙伟人悦刘忠华
- 关键词：小分子抑制剂
- 猪类胚胎生殖细胞体外诱导分化为神经细胞的研究
- 2013年
- 【目的】探讨猪类胚胎生殖细胞向神经细胞分化的潜能。【方法】采用性腺-中肾区基质细胞与猪原始生殖细胞共培养的方法得到猪类胚胎生殖细胞,通过直接分化的方法进行神经细胞定向诱导。【结果】(1)与小鼠成纤维细胞作为饲养层相比,性腺-中肾区基质细胞作为饲养层同样能够支持猪类胚胎生殖细胞生长,二者对猪类胚胎生殖细胞的增殖能力不存在显著影响;(2)猪类胚胎生殖细胞有较强的碱性磷酸酶活性,Q-PCR结果显示多能性基因Oct4、Sox2及Nanog表达,增殖能力呈现"S"型,即生长的潜伏期、对数期及平台期,猪类胚胎生殖细胞经体外悬浮培养能够形成拟胚体;(3)经过诱导猪类胚胎生殖细胞能够分化形成表达神经干细胞、神经元及神经胶质细胞标记物的多种神经细胞类型。【结论】从早期性腺中成功分离培养得到了猪类胚胎生殖细胞,通过简单、快速的神经细胞分化的诱导体系证实了猪类胚胎生殖细胞具有体外定向分化为多种神经谱系细胞的能力。
- 丛义梅马婧孙瑞珍王健宇薛冰华胡魁尹智刘忠华
- 关键词：体外诱导神经细胞
- 糖浓度对三维培养体系下小鼠胚胎干细胞成骨分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨明胶海绵作为小鼠胚胎干细胞(ESCs)成骨诱导支架材料的可行性,并考察葡萄糖浓度对三维培养体系下小鼠ESCs骨向分化的影响。方法:体外培养小鼠ESCs,将消化所得的单细胞接种到可降解明胶海绵上,分别于高糖骨诱导培养液和低糖骨诱导培养液中进行培养,同时设立自然分化对照组。结果:诱导后第7、14天茜素红染色结果显示,高糖组矿化结节数少于低糖组。结论:明胶海绵可以作为小鼠胚胎干细胞体外成骨诱导的培养支架;在骨诱导过程中高葡萄糖浓度抑制了小鼠胚胎干细胞的骨向分化能力。
- 高雨蔚张宇邢舰誉王屹博丁超薛冰华吕嘉伟史久慧刘忠华
- 关键词：小鼠胚胎干细胞明胶海绵成骨分化
- 黑线姬鼠成纤维细胞异种核移植研究
- 2014年
- 为探讨优化黑线姬鼠-小鼠异种核移植技术体系,采用Piezo辅助胞质内体细胞核注射的方法进行克隆胚胎的重构,比较了不同供体细胞来源.不同浓度TSA以及不同供体细胞传代次数对重构胚的卵裂率和囊胚率产生的影响.结果表明,同种核移植试验中获得重构胚的卵裂率、囊胚率均显著高于异种核移植试验(P<0.05);传15代次的细胞作为供体细胞进行核移植,所得异种重构胚的囊胚率显著低于其他组别(P<0.05);50nmol/L和80nmol/LTSA处理组的囊胚率分别为6.06%和6.31%,显著高于其他各处理组及对照组的囊胚率3.13%(P<0.05).
- 徐纯柱郭自荣朱祥春谢桂林吴比薛冰华崔思荣
- 关键词：黑线姬鼠成纤维细胞异种核移植
- 猪原始生殖细胞生物学特性的研究
- 胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)是由胎儿原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)经体外驯化培养获得的一种多潜能干细胞.研究猪PGC生物学特性对于建立猪EG细胞系及了解...
- 马婧张宇王健宇薛冰华伟人悦李妍刘忠华
- 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞重编程
- 猪原始生殖细胞生物学特性的研究被引量：1
- 2014年
- 胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)是由胎儿原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)经体外驯化培养获得的一种多潜能干细胞。研究猪PGC生物学特性对于建立猪EGC及了解猪生殖细胞发育机制具有重要意义。该研究以原代培养的猪PGC为对象,探讨了其生长行为特征及其重编程过程中多能性、生殖系标志基因的表达模式。结果显示,26 d胚胎生殖嵴分离的PGC呈碱性磷酸酶阳性,细胞体积及核质比较大;体外培养初期呈现出较强的增殖及迁移能力,培养第5 d细胞增殖达到平台期,此时克隆高表达Oct4、Sox2、Nanog、c-Myc、Klf4和Ifi tm3(P<0.05),低表达Blimp1(P<0.05),Nanos1和Stella的表达水平与猪胎儿成纤维细胞无差异;猪PGC形成的原代克隆已经具有多向分化潜能。
- 马婧张宇王健宇薛冰华伟人悦李妍刘忠华
- 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞重编程
- 猪类胚胎生殖细胞体外诱导分化为神经细胞的研究
- 目的 探讨猪类胚胎生殖细胞向神经细胞分化的潜能。方法 采用性腺-中肾区基质细胞与猪原始生殖细胞共培养的方法得到猪类胚胎生殖细胞,通过直接分化的方法进行神经细胞定向诱导。结果 (1)与小鼠成纤维细胞作为饲养层相比,性腺-中...
- 丛义梅马婧孙瑞珍王健宇薛冰华胡魁尹智刘忠华
- 关键词：体外诱导神经细胞
- 胚胎来源的猪多能性干细胞系建立及其多能性改善研究
- 猪在机体大小、器官解剖结构、遗传和免疫学等方面与人类非常接近，同时猪又是全世界广泛饲养的肉用家畜，伦理限制相对较少，故猪被认为是最具潜力的生物医学模型动物，但猪在这些领域的应用均因猪上没有真正的胚胎干细胞而被限制。在过去...
- 薛冰华
- 关键词：诱导分化细胞核移植
- 文献传递
- 一种用于野鼠实验动物化的防咬抓取装置
- 本实用新型涉及一种用于野鼠实验动物化的防咬抓取装置。采用塑料或不锈钢等坚硬材料制成两条夹臂，连接轴在顶端将其连接，末端各安装一圆形固定网，两固定网直径不同，但中心相对，以确保闭合时能使直径较小的固定网周缘与直径较大的固定...
- 刘忠华徐纯柱李成夏玉国尹智吴比薛冰华谢桂林郭自荣
- 文献传递
- 猪多能性干细胞研究进展与前瞻被引量：3
- 2015年
- 多能干细胞具有能够分化为多种特定细胞类型的能力,主要包括胚胎干细胞、胚胎生殖细胞和诱导多能干细胞。猪因其在免疫学、形态学和生理结构上与人有着诸多类似的特点,正逐渐成为人类异种移植、细胞治疗和再生医学研究的理想生物学模型。然而,目前对猪多能干细胞的来源、特征及机制认识的不足直接阻碍了该研究领域的发展。因此,将对猪多能性干细胞的种类、鉴定标准、研究进展、亟待解决的问题进行详细地阐述,并在此基础上对猪多能性干细胞的研究进行了展望,希望为该研究领域的科研人员提供参考。
- 薛冰华刘忠华
- 关键词：多能干细胞胚胎干细胞诱导多能干细胞胚胎生殖细胞
