袁颖
- 作品数：25 被引量：26H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hnRNPE2诱骗RNA逆转32D-BCR-ABL细胞四倍性的研究
- 2010年
- 目的初步探讨多聚胞嘧啶结合蛋白E2(hnRNPE2)诱骗RNA对逆转细胞的四倍体特性的作用。方法取32Dcl3细胞(小鼠正常髓母细胞),32D-BCR-ABL细胞(含人类bcr-ablcDNA的转化细胞),32DP210-pGD细胞和32DP210-pGM细胞(表达hnRNPE2诱骗RNA野生型序列pGD和突变性序列pGM的32D-BCR-ABL细胞)作为研究对象。采用流式细胞仪进行细胞的DNA倍体测定;对细胞进行染色体计数,确定染色体核型;采用Western blotting检测细胞cyclinB1和p53蛋白的表达。结果所有32Dcl3均为含40条正常染色体的二倍体细胞,32DP210-pGD细胞中,75.83%以上为二倍体细胞群;32DP210-pGM细胞与32D-BCR-ABL细胞内分别含81.25%和85.81%的四倍体细胞,含80条染色体。与32D-BCR-ABL细胞相比,32DP210-pGD细胞的cyclinB1蛋白水平表达下调,p53蛋白水平无明显变化;32DP210-pGM细胞的cyclinB1和p53蛋白表达均无明显变化。结论 hnRNPE2诱骗RNA能逆转32D-BCR-ABL细胞的四倍体特性。
- 王雅珍袁颖曾建明魏容彭智肖青陈新敏冯文莉
- HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化
- 2009年
- 目的:采用核不均一核糖核蛋白E2(hnRNP E2)decoy RNA靶向阻断CCAAT增强子结合蛋白alpha(C/EBPα)基因的异常翻译,诱导小鼠白血病样32D-P210细胞株向粒系分化,并进一步探讨其分子机制.方法:电穿孔法分别将野生型和突变型hnRNP E2 decoy RNA表达质粒转染入32D-P210细胞,经G418筛选出稳定株后,RT-PCR检测C/EBPa,粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)与髓过氧化物酶(MPO)基因的mRNA水平;WesternBlot检测C/EBPa,G-CSFR的蛋白表达水平;瑞氏染色观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激前后细胞形态;流式细胞仪检测分化抗原Gr-1,CD11b的表达.结果:筛选到分别稳定表达野生型或突变型hnRNP E2 decoy RNA的TG细胞株和TGA细胞株.与未转染组32D-P210细胞相比,TG细胞株C/EBPa mRNA水平无改变,但42ku-C/EBPa蛋白、G-CSFR mRNA和MPO mRNA水平分别升高了(43.8±4.9)%,(69.1±3.2)%和(37.8±4.2)%(P<0.05);G-CSF刺激后,TG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞形态学特征;同时Gr-1分化抗原的表达率上升至40.3%,未转染组32D-P210细胞的Gr-1表达率5.5%(P<0.05);然而CD11b在3组细胞都是高表达,没有明显的变化(P>0.05);以上各参数在TGA细胞株与未转染组32D-P210细胞株间均无显著性差异(P>0.05).结论:hnRNP E2 decoy RNA能够诱导32D-P210细胞向粒系分化,其机制可能与decoy RNA特异性阻断hnRNAE2与C/EBPα mRNA非翻译区结合,调节C/EBPα mRNA翻译,恢复42ku-C/EBPα表达,上调其下游G-CSFR和MPO等分化基因的表达有关.G-CSF可加速这一作用从而促进32D-P210细胞的分化过程.
- 魏容曾建明袁颖王雅珍黄世峰罗红伟肖青陈新敏冯文莉
- 关键词：DECOYRNA
- Apg-2对H2O2诱导的BaF3-P210细胞损伤的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Apg-2对H2O2诱导的Bcr/Abl阳性BaF3-P210细胞损伤的影响。方法以H2O2诱导的pMIGR1空载体感染细胞BaF3-MIGR1和稳定表达Bcr/Abl的BaF3-P210细胞为损伤模型,Western blot和RT-PCR检测H2O2损伤后2组细胞Apg-2表达;建立过表达Apg-2的BaF3-MIGR1细胞(BaF3-MIGR1-Apg2)和BaF3-P210细胞(BaF3-P210-Apg2)H2O2诱导的损伤模型,Western blot检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的表达,免疫荧光法检测γ-H2AX焦点数。结果 H2O2作用后的BaF3-MIGR1和BaF3-P210细胞的Apg-2蛋白和mRNA水平表达均升高(P<0.05)。H2O2作用BaF3-MIGR1和BaF3-MIGR1-Apg2细胞后其γ-H2AX蛋白表达升高,γ-H2AX焦点数亦增加;BaF3-P210和BaF3-P210-Apg2细胞H2O2损伤后γ-H2AX蛋白表达和焦点数均无明显变化。结论 Apg-2可减少H2O2诱导的BaF3-P210细胞γ-H2AX表达,从而可能降低其细胞损伤。
- 李春莉刘钉宾袁颖彭智陶崑史梦黄宗干冯文莉
- 关键词：细胞损伤
- 同源异型盒基因MSX1启动子甲基化及其在乳腺癌中抑癌功能的研究
- 目的：表观遗传学调控和遗传学调控机制共同参与肿瘤的发生发展。其中抑癌基因启动子甲基化导致的基因沉默从而失去原有的抑癌功能在多种肿瘤发病中扮演非常重要的角色。本文探讨同源异型盒基因MSX1在乳腺癌中表达水平及其表观遗传学调...
- 袁颖
- 关键词：MSX1乳腺癌肿瘤抑制基因甲基化表观遗传学
- 文献传递
- 过表达Apg-2对H_2O_2诱导的BaF3-BCR/ABL细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的观察过表达Apg-2对H2O2所致BaF3-BCR/ABL细胞损伤的保护作用。方法以H2O2作用于逆转录病毒空载体MIGR1感染细胞株BaF3-MIGR1和稳定表达BCR/ABL的BaF3-BCR/ABL细胞为氧化应激损伤模型,RT-PCR检测H2O2作用前后Apg-2基因表达水平;用紫外分光光度法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定过氧化物歧化酶(SOD)活性;Am-blue法检测细胞存活率。结果过表达Apg-2能明显改善H2O2导致的BaF3-BCR/ABL细胞损伤,与BaF3-MIGR1细胞处理组相比,过表达Apg-2可使BaF3-BCR/ABL细胞存活率升高,LDH释放率明显降低,降低MDA含量,提高SOD活性。结论过表达Apg-2对H2O2诱导的BaF3-BCR/ABL细胞损伤具有明显的保护作用。
- 李春莉刘钉宾袁颖彭智陶崑史梦曹唯希冯文莉
- 关键词：过氧化氢细胞损伤BCR/ABL
- 采用锌指核酸酶技术破坏人bcr‑abl融合基因以抑制CML细胞增殖和促使其凋亡
- 本发明公开了一种DNA分子，其序列如SEQ ID No:2所示，还公开了该DNA分子作为靶点在抑制人bcr‑abl融合基因表达或导致人bcr‑abl基因功能丧失中的应用；抑制人bcr‑abl基因表达或导致人bcr‑abl...
- 冯文莉高淼黄宁姝黄峥兰袁颖
- 控制性低中心静脉压对肝移植术中血气的影响
- 目的观察控制性低中心静脉压(CLCVP)对肝移植术中动脉血气的影响。方法 46例行非转流原位肝移植患者,根据术中是否应用CLCVP技术,将患者分为CLCVP组(L组)和正常中心静脉压组(C组),分别于开腹前10min(T...
- 袁颖闵苏何开华
- 关键词：肝移植低中心静脉压酸中毒
- 文献传递
- 同源异型盒基因MSX1启动子甲基化其在乳腺癌中抑癌功能的研究
- 目的：表观遗传学调控和遗传学调控机制共同参与肿瘤的发生发展。其中抑癌基因启动子甲基化导致的基因沉默从而失去原有的抑癌功能在多种肿瘤发病中扮演非常重要的角色。本文探讨同源异型盒基因MSX1在乳腺癌中表达水平及其表观遗传学调...
- 袁颖
- 关键词：乳腺癌启动子甲基化发病机制
- 控制性低中心静脉压对肝移植患者肝肾的保护作用
- 目的：通过观察控制性低中心静脉压(controlled low central venouspressure,CLCVP)对肝移植患者肝肾功能生化指标和相关临床恢复指标的影响,探讨CLCVP对肝肾的保护作用。
方法...
- 袁颖
- 关键词：肝移植术低中心静脉压肝功能肾功能
- 文献传递
- H_2O_2对Apg-2与BCR/ABL蛋白亚细胞定位的影响
- 2012年
- 目的观察H2O2对Apg-2与BCR/ABL蛋白亚细胞定位的影响。方法用50μmol/L H2O2分别处理BaF3-BCR/ABL、BaF3-MIGR1及过表达Apg-2蛋白的BaF3-BCR/ABL细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内Apg-2、BCR/ABL蛋白的亚细胞定位变化。结果 Apg-2和BCR/ABL蛋白在细胞中定位于胞浆,H2O2损伤可致Apg-2和BCR/ABL蛋白在BaF3-BCR/ABL细胞中发生核转位,Apg-2蛋白过表达可引起BCR/ABL蛋白核转位。结论 Apg-2蛋白在H2O2诱导的损伤后发生核转位,可能与BCR/ABL蛋白相互作用,保护H2O2诱导的细胞损伤。
- 李春莉刘钉宾袁颖陶崑史梦冯文莉
- 关键词：BCR过氧化氢亚细胞定位
