赵文军
- 作品数：161 被引量：739H指数：15
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 基于LFD-RPA技术的梨火疫病菌检测方法、试剂盒及其应用
- 本发明公开了基于LFD‑RPA技术的梨火疫病菌检测方法、试剂盒及其应用。本发明具体地公开了特异性检测梨火疫病菌的方法，所述方法包括：提取待测样品基因组DNA，以所述基因组DNA为模板，用检测梨火疫病菌的组合物进行LFD‑...
- 田茜赵文军张瑾逸张王斌胡白石罗来鑫
- 文献传递
- 非洲猪瘟病毒MGF-505R基因缺失株双重荧光RPA检测方法的建立及应用被引量：1
- 2023年
- 旨在建立一种快速现场筛查非洲猪瘟病毒(ASFV)基因缺失株的方法,以便鉴别我国复杂的ASFV感染情况。通过分析国内ASFV流行态势,选择MGF-505R基因及B646L基因,设计特异性引物及exo探针,对其进行敏感性、特异性分析,并进行临床应用。利用双重-重组酶聚合酶扩增(RPA)方法检测ASFV MGF-505R及B646L基因,结果显示:检测时间在15 min内,最低检测限均为10 copies/反应,且与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型等均无交叉反应;利用所建立方法对266份临床样品进行检测,结果与世界动物卫生组织(WOAH)推荐荧光PCR检测方法的符合率为100%。建立的ASFV MGF-505R基因缺失株的荧光RPA检测方法适配可移动式荧光RPA检测仪,具有快速、灵敏度高、特异性强的优点,适用于ASFV现场快速临床检测,为非洲猪瘟疫情防控提供一种新的筛查手段。
- 邓俊花吕继洲吕继洲袁向芬魏方袁向芬吴绍强
- 关键词：非洲猪瘟
- 宁夏马铃薯僵顶植原体的分子鉴定被引量：3
- 2021年
- 通过透射电子显微镜,在从宁夏回族自治区固原市彭阳县红河镇采集的表现叶片上卷、红叶、气生薯症状的马铃薯样品叶脉韧皮部筛管细胞内观察到大量直径为500~700 nm的球形植原体粒子。以提取的感病和健康马铃薯叶片总DNA为模板,应用植原体16S rRNA基因和rp基因通用引物进行PCR扩增,从感病样品中扩增得到了长度均约为1.2 kb的片段。对获得基因核酸一致性比较分析表明,马铃薯僵顶植原体宁夏株系16S rRNA基因与‘Candidatus Phytoplasma fragariae’槭树株系(MK501642)16S rRNA基因核酸一致性最高,为99.7%,rp基因与‘Ca.P.fragariae’云南马铃薯YN-2G株系(KJ144889)rp基因核酸一致性最高,为100%;基于16S rRNA基因和rp基因构建系统进化树发现,马铃薯僵顶植原体宁夏株系与16SrⅫ-E亚组成员聚在一起。基于透射电镜观察和基因序列比较分析,证明宁夏发生的马铃薯僵顶病与植原体侵染相关,该植原体在分类地位上属于植原体16SrⅫ-E亚组。
- 李正男马强张磊孙平平赵文军周洪友
- 卵叶山蚂蝗丛枝植原体的分子鉴定被引量：1
- 2019年
- 2016年在生长于海南省澄迈县的卵叶山蚂蝗上发现了丛枝、小叶等疑似植原体感染症状。利用植原体16S rRNA基因的通用引物R16mF2/R16mR1,对卵叶山蚂蝗丛枝样品进行了PCR检测,并对检测到的植原体16S rRNA基因片段(1.4kb)进行克隆测序、序列比对、虚拟限制性片段长度多态性分析和系统进化树构建分析。结果表明,卵叶山蚂蝗丛枝植原体(beggarweed witches'-broom phytoplasma,MK956144)为来檬植原体(Candidatus Phytoplasma aurantifolia,U15442)的相关株系,属于花生丛枝植原体组A亚组(16SrII-A),这是首次发现植原体感染卵叶山蚂蝗的报道。
- 段雅雯杨毅陆秋蕾肖忠良李丹阳张文珍赵文军
- 关键词：丛枝病植原体
- 苦楝丛枝植原体质粒的测定与分子特征被引量：4
- 2011年
- 【目的】测定苦楝丛枝植原体(CWB植原体)质粒并分析其分子特征。【方法】扩增苦楝丛枝植原体质粒片段并进行系统进化分析,预测质粒编码蛋白的跨膜区、亚细胞定位;以质粒pCWBFq repA为模板制备探针,利用Southern blot方法检测苦楝丛枝植原体及其他几种植原体的质粒。【结果】测定了苦楝丛枝植原体福清株系的一个质粒pCWBFq,该质粒全长4446 bp,A+T含量为73.5%,编码6个蛋白,其中pCWBFq P2-P5五个编码蛋白分别含有3、2、1和2个跨膜区,其信号肽(Singnal Peptide,SP)信号值分别为0.989、0.505、0.918和0.914。氨基酸序列相似性比较表明:pCWBFq RepA蛋白与其他植原体质粒RepA的同源性在9.6%-85.6%之间,而pCWBFq SSB蛋白与其他植原体质粒SSB的同源性在74.0%-89.4%之间。用pCWBFq repA探针检测到苦楝丛枝植原体中质粒的存在,同时也能够检测到16SrI组的泡桐丛枝植原体(PaWBNy),海南长春花绿变植原体(PeVHn),苦楝丛枝植原体福州株系(CWBFz)和桑树萎缩植原体濮阳株系(MDPy)中的质粒,但16SrV组的枣疯植原体北京株系(JWBBj)、樱桃致死黄化西昌株系(CLYXc)和重阳木丛枝南昌株系(BiWBNc)中未能检测到任何杂交信号。【结论】苦楝丛枝植原体质粒pCWBFq编码的6个蛋白中,除与质粒复制有关的RepA和SSB外,另外4个均为含有疏水结构的分泌蛋白或膜蛋白。植原体质粒的同源基因间存在程度不同的变异,其中repA基因在所有植原体质粒上均存在,但变异性相对较大,而ssb基因仅存在于16SrI组植原体质粒中,且变异相对较小。16SrI组的CWBFq、PaWBNy、PeVHn、CWBFz和MDPy中均存在数量和大小不同的质粒,而16SrV组的JWBBj、CLYXc和BiWBNc中或含有的质粒因与pCWBFq repA探针的同源性较低而不能被检测到。
- 宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳牟海青胡佳续王曦茁郭民伟
- 关键词：质粒系统进化DNA杂交
- 蚕豆染色病毒检测用引物
- 本发明提供了一种蚕豆染色病毒检测用引物，所述引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1&2所示。本发明还进一步提供了检测蚕豆染色病毒的方法，该方法以样品总RNA为模板，利用本发明特异性引物进行RT－PCR扩增...
- 陈红运赵文军陈青李桂芬朱水芳陈洪俊
- 文献传递
- 检测番茄溃疡病菌的交叉引物恒温扩增试剂盒及专用引物
- 本发明公开了检测番茄溃疡病菌的交叉引物恒温扩增试剂盒及专用引物。本发明提供了检测或辅助检测番茄溃疡病菌的交叉引物恒温扩增引物组，由置换引物F3、置换引物B3、正向检测引物DF5B、反向检测引物DF5F、交叉引物CPR1、...
- 牟海青田茜赵文军张祥林熊玉芬张永江
- 文献传递
- 利用GICA-PCR快速检测瓜类果斑病菌被引量：2
- 2011年
- 瓜类果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)是瓜类作物上重要的病原细菌,为我国进境植物检疫性有害生物。胶体金免疫层析试纸条方便快捷,应用广泛。该方法使用不当会出现假阳性问题,仅适用于病原菌的初筛检测。本研究将Aac胶体金免疫层析方法(GICA)与PCR技术相结合,建立了GICA-PCR检测方法。检测结果表明,该方法在蛋白与核酸2个层面上从发病西瓜叶片上检测到瓜类果斑病菌,有效解决了试纸条检测的假阳性问题,提高了瓜类果斑病菌检测的准确性,值得推广应用。
- 董明明张甜甜魏梅生刘爱新朱水芳赵文军
- 关键词：瓜类细菌性果斑病菌胶体金免疫层析
- 利用数字PCR检测番茄溃疡病菌的方法及其使用的成套试剂
- 本发明公开了利用数字PCR检测番茄溃疡病菌的方法及其使用的成套试剂。本发明所提供的成套试剂由引物对Cmm和探针P组成；引物对Cmm由引物F和引物R组成；引物F、引物R和探针P的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1‑SE...
- 田茜张红梅赵文军周佩
- 双重PCR法同步检测菜豆晕疫病菌和萎蔫病菌被引量：3
- 2015年
- 为建立同步检测菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的菜豆晕疫病菌arg K基因特异性序列设计1对特异性引物PSPF1/PSPR2,将设计的引物与已发表的检测菜豆细菌性萎蔫病菌特异性引物Cff F1/CffR2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体系,并进行特异性和灵敏度验证。结果显示,采用双重PCR体系,能从菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌基因组DNA以及人工模拟带菌大豆种子样品中扩增到特异性条带,表明本研究所建立的双重PCR检测方法能同时检测出菜豆晕疫病菌和细菌性萎蔫病菌,可用于口岸进口大豆中2种检疫性细菌的检测。
- 杨万风刘艳刘翔邵沛泽谌运清赵文军
- 关键词：双重PCR
