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魏令波: 作品数：25 被引量：254H指数：11; 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学理学更多>>

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鲫血清转铁蛋白cDNA片段的克隆与序列分析被引量：1: 2003年; 取体重约300g鲜活鲫(Carassiusauratus)的肝组织进行总RNA提取。从GenBank数据库查询已发表的8种鱼转铁蛋白cDNA或基因序列,根据铁离子结合转运功能位点,设计并合成了2对引物P1、P4以及P2、P3,克隆出鲫血清转铁蛋白cDNA中的从大约550bp至1450bp的核心片段,长度为0.9kb。同时,比较了几种鱼血清转铁蛋白cDNA序列的同源性,并推导出鲫血清转铁蛋白cDNA核心片段的氨基酸序列,并分析了该氨基酸序列的结构和特性。; 龙华李谷魏令波; 关键词：克隆

沙冬青抗冻蛋白热滞活性的DSC研究被引量：15: 2001年; Differential scanning calorimetry（ DSC） was used to measure the thermal hysteresis activity(THA) of plant antifreeze proteins(AFPs). The results reveal that DSC is a good method to screen and study AFPs. In the sixteen components extracted from Ammopipanthus mongolicus leaves, one(P3S1) was found to have apparent thermal hysteresis activity by DSC. As the amount of ice nuclei in the sample decreased, the THA of P3S1 increased from 0.01℃ to 0.65℃ . It is notable that the two- peak thermal hysteresis effect was observed. Two endothermic peaks appeared in the melting process of P3S1, while the freezing peak also consisted of two peaks. The peaks appeared antecedently showed larger thermal effect. This phenomenon shows P3S1 has two different kinds of interaction with water and ice crystal. It is probably an important property of a class of AFPs.; 周晓蕾陈滔滔王保怀李芝芬高素琴费云标魏令波; 关键词：抗冻蛋白热滞活性沙冬青抗冻性差示扫描量热法

构树形成层活动周期中过氧化物酶和酯酶同工酶的变化被引量：10: 1995年; 同工酶分析表明：在构树（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａｐａｐｙｒｉｆｅｒａ（Ｌ．）Ｖｅｎｔ．）形成层活动周期中，形成层区域和木质部中过氧化物酶酶带变化最大，参与ＩＡＡ浓度调节的酶带在晚材形成前出现，当其它生长停止、韧皮部仍在分化时又消失，完全休眠后，所有酶带又都出现。在周皮、形成层区域和木质部中，酯酶同工酶酶带变化明显与形成层活动有关。; 崔克明魏令波李绍文李正理李举怀; 关键词：构树过氧化物酶同功酶

分离和鉴定沙冬青抗冻蛋白质(英文)被引量：25: 1999年; 采用经典的蛋白质色谱技术，纯化沙冬青（Ａｍｍｏｐｉｐｔａｎｔｈｕｓｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ（Ｍａｘｉｍ．）Ｃｈｅｎｇｆ．）叶片中的抗冻蛋白质，然后经非变性ＰＡＧＥ胶分离、回收，得到具有热滞活性的两条带：Ｂ１和Ｂ３。前者在８ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４６ ℃，并在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上分离出两条带（分子量为６７ｋＤ和２１ｋＤ）；后者在１０ｇ／Ｌ时热滞活性为０．４５ ℃，在ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ胶上只有１条带（分子量为３９．８ｋＤ）。Ｂ１和Ｂ３均不能被Ｓｈｉｆｆ试剂染色，也不具有典型糖蛋白的紫外吸收特征。; 江勇魏令波费云标舒念红高素琴; 关键词：沙冬青抗冻蛋白色谱

aroAIn融合基因载体的构建、表达及对烟草的转化被引量：5: 2004年; PCR扩增突变的 5′ 烯醇丙酮酸莽草酸 3 磷酸合成酶 (5′ enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthetase ,EPSPS)cDNA全长序列 ,插入 pLitmus2 8得到 pLEPSPS ,进而通过反向PCR在EPSPS 2 35 /2 36aa之间将其打断为无功能的片段。选用人工构建的具有顺式和反式剪接功能的mini型蛋白内含子SspDnaB和RmaDnaB ,插入被打断的aroA(抗除草剂基因 ) ,构建了质粒 pLEBC、pLEBT、pLERC和 pLERT。将 4种重组质粒中的aroA In(蛋白内含子Intein插入aroA)融合基因插入 pET 32得到表达载体 pETLEBC、pETLEBT、pETLERC和 pETLERT ,IPTG诱导后 ,SDS PAGE分析显示其能在DE3 中有效表达并发生相应的蛋白剪接。将aroA cisSspDnaB和aroA cisRmaDnaB融合基因分别插入 pLYM中进一步构建成植物表达载体 ,农杆菌叶盘法转化烟草。基因组PCR分析表明融合基因整合入植物核基因组 ;RT PCR分析显示其可在高等植物细胞中成功表达。结果说明蛋白内含子基因可以转化高等真核细胞 ,蛋白剪接技术可应用于高等植物细胞。; 赵瑾高素琴费云标魏令波; 关键词：EPSPS 转基因烟草

构树维管分生组织发育过程的观察被引量：1: 1994年; 以构树的成长芽为材料，利用电镜详细观察了构树芽原形成层和形成层的发育过程，原形成层出现于茎端剩余分生组织环，细胞成束排列。在初生长后期，原形成层束位于原生木质部和原生韧皮部之间的细胞发生平周分裂，产生径向排列的细胞层。由观察得出，构树形成层是从原形成层逐渐发育而来，次生木质部的出现是形成层分化的主要特征。; 崔克明魏令波; 关键词：发育显微结构构树形成层

沙冬青热稳定抗冻蛋白的分离纯化及其部分性质研究被引量：11: 2007年; 加热处理后的沙冬青提取液依次经过DEAE-cellulose A52层析,Sephacryl S300层析,高效液相Poros20HP2层析和高效液相Source 15Q层析,分离纯化到抗冻蛋白amAFP28.amAFP28能修饰冰晶形态.在SDS-PAGE和IEF中,纯化的amAFP28显示单一蛋白染色带,其分子量约为28 kDa,等电点是6.68.经Schiff试剂检验,amAFP28不含碳水化合物.氨基酸组成分析表明,amAFP28富含亲水性氨基酸.圆二色谱(CD)显示amAFP28的二级结构组成为:α-螺旋17.2%,平行β-折叠和β-转角4.1%,反平行β-折叠39.7%,无规卷曲和γ-转角34.4%,-S-S-和芳香氨基酸4.6%.DTT对amAFP28的二级结构没有影响.; 王维香魏令波张虎; 关键词：抗冻蛋白沙冬青分离纯化

朱顶红精细胞超微结构观察: 1996年; 精细胞是双受精作用的直接参与者，是生殖生物学中的重点研究对象之一。以往的研究表明，应用连续超薄切片和计算机辅助三维重组技术，结合免疫荧光定位，发现两个精细胞在体积和细胞器含量上存在着差异，即精子的二型性，而且与营养细胞核三者构成紧密功能单位即雄性生殖单位（ＭＧＵ），微管对精细胞的性状的确定、运动和维持ＭＧＵ的动态结构稳定具有重要的作用。本文应用透射电镜，详细观察了朱顶红花粉管中精细胞的超微结构，并着重微管结构及其分布的观察。朱顶红成熟花粉为两细胞型。成熟花粉于２６℃、黑暗条件下，在液体培养基（含１０％蔗糖和１００ｐｐｍ硼酸）中培养１３－１８小时，然后收集花粉管，固定，供电镜观察并照相。朱顶红成熟花粉培养１３小时后，生殖细胞在花粉管中完成核分裂和胞质分裂等两个过程。形成两个精细胞。初形成的两个精细胞前后排列，营养核前导并靠近花粉管顶端。领头的精细胞的细胞质以很大的表面与营养核相互贴合（图版Ⅰ－１，２），有时营养核与两个精细胞彼此穿插、缠绕（图版Ⅰ－３）。两精细胞之间的共同壁上具有很多胞质通道和含均质电子密度中等的基质（图版Ⅱ－４）。精细胞质在核与共同壁之间的区域染色较深，经高倍放大，观察到此处含丰富的微管，基?; 蔡雪魏令波; 关键词：朱顶红花粉精细胞超微结构

杨树形成层发生的研究: 魏令波; 关键词：过氧化物酶超微结构构树形成层原形成层

马尾松随机扩增多态性DNA标记的分离研究被引量：15: 1996年; 马尾松随机扩增多态性ＤＮＡ标记的分离研究魏令波，唐谦，郑先武，顾万春（中国林业科学研究院林业研究所北京１０００９１）李小兵（中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室北京１０００１２）关键词马尾松，ＲＡＰＤ，Ｍｅｎｄｅｌｉａｎ分离随机扩增多态性ＤＮＡ...; 魏令波唐谦郑先武顾万春李小兵; 关键词：马尾松随机扩增多态性 DNA

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