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猪圆环病毒2型疫苗研究进展被引量：6: 2010年; 猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄～12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为国内外学者的研究焦点。迄今为止,西欧与美国已有PCV-2疫苗注册上市,主要为灭活疫苗与亚单位疫苗。由于灭活疫苗与亚单位疫苗成本高,且注射次数多,容易造成机体应激,因此,弱毒疫苗、活载体疫苗及核酸疫苗等新型疫苗是目前研究的重点,并取得了长足的进展。论文主要概述了PCV-2疫苗研究的最新进展,以期为PCV-2疫苗研究提供一定的参考资料。; 黄红亮邵定勇罗满林陈瑞爱; 关键词：猪圆环病毒疫苗

一种猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达载体及其构建方法和应用: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达载体及其构建方法和应用，该表达载体是猪圆环病毒2型ORF2基因经过优化后得到的优化密码子克隆至pET-28a载体中所获得的表达载体。本发明能够构建出高效表达猪2型圆环病毒主要...; 陈瑞爱黄红亮张开岳任常宝唐满华佘峥单玉飞谢小雨邓小雄; 文献传递

一种重组猪伪狂犬病毒TK/gE双基因缺失株: 本发明分离了一株猪伪狂犬病毒GDXX株，并以该分离株为母本，通过分子生物学手段，依次缺失胸腺嘧啶核苷酸激酶（TK）基因和gE基因，获得重组病毒PRV/TK－/gE－。以该重组病...; 邵定勇黄红亮陈瑞爱韩静芳唐兆新谢小雨任常宝梁桂益; 文献传递

猪圆环病毒2型ORF2重组腺病毒的构建与鉴定及其免疫效果研究被引量：6: 2010年; 为了研究含有猪圆环病毒2型(porcinecircovirus type 2,PCV2)的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,本试验根据GenBank中猪圆环病毒2型基因序列,设计了1对引物,用于猪圆环病毒2型ORF2基因的扩增。将目的基因T/A克隆后,亚克隆至腺病毒转移载体pShuttle-CMV,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ORF2。经PCR方法和限制性内切酶酶切法及测序证明该基因已成功连接后,重组腺病毒转移载体经PmeⅠ酶切线性化,在BJ5183细菌中与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-CMV-ORF2。经PCR方法和PacⅠ酶切方法及测序鉴定表明该重组腺病毒载体已构建成功。PacⅠ酶切线性化pAd-CMV-ORF2,脂质体法转染AD293细胞进行病毒的包装和扩增。PCR及RT-PCR、IFA、Westernblotting检测目的基因及其表达。结果表明,本试验成功构建了重组腺病毒pAd-CMV-ORF2。3次噬斑试验纯化重组腺病毒,测得其TCID50为10-8.75/0.1mL。将重组腺病毒接种SPF级雌性BALB/c小鼠,用ELISA抗体检测试剂盒检测特异性抗体水平。小鼠免疫试验测得其特异性抗体水平较高,为PCV2重组腺病毒基因工程疫苗的进一步研究打下基础。; 刘根梅谭实勇陈瑞爱黄红亮郑念广罗满林; 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2 重组腺病毒

一种重组腺病毒及其应用: 本发明公开了一种重组腺病毒，其是将PCV2的免疫原性蛋白基因ORF2与去除信号肽的猪γ干扰素基因融合连接后重组至腺病毒载体获得。本发明将PCV2的主要免疫原性蛋白ORF2与去除信号肽的猪IFN-γ融合后在腺病毒中表达，从...; 罗满林陈瑞爱刘根梅陈钜豪黄红亮

一种重组伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法: 本发明涉及一种重组伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂，其由按照重量百分数计的如下组分制成：明胶2-3％、聚乙烯吡咯烷酮K-301-2％、海藻糖0-4％、蔗糖2-5％、甘露醇0.1-0.5％、黄芪多糖0-0.5％、甘氨酸1-1...; 谢小雨黄红亮陈瑞爱任常宝佘峥邓小雄

一种重组猪伪狂犬病毒TK/gE双基因缺失株: 本发明分离了一株猪伪狂犬病毒GDXX株，并以该分离株为母本，通过分子生物学手段，依次缺失胸腺嘧啶核苷酸激酶（TK）基因和gE基因，获得重组病毒PRV/TK－/gE－。以该重组病...; 邵定勇黄红亮陈瑞爱韩静芳唐兆新谢小雨任常宝梁桂益; 文献传递

猪圆环病毒2型流行株的分离及其感染性克隆的构建被引量：2: 2014年; 【目的】通过分离一株猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株,并构建其感染性克隆,为研究PCV2基因功能提供操作平台。【方法】通过PCR方法,从疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的仔猪淋巴结中鉴定为猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)2型阳性。把阳性病料接种PK-15细胞传代培养,在培养物中扩增出PCV2的全基因序列。对扩增出的全序列进行序列测定,并与GenBank中公布的5株广东PCV2分离株(GD-pz、GD-gj、GD-jm、GD-ss和GD-sz)进行同源性分析。通过EcoRⅠ和SalⅠ将PCV2全基因组序列克隆进pUC18载体中,获得含PCV2 GD-zq株全基因组单拷贝的重组质粒pPCV2-GD-zq,再通过SalⅠ和HindⅢ把另一个全长拷贝克隆进pPCV2-GD-zq质粒中,使PCV2 GD-zq株基因组DNA以头尾相接的双重复方式克隆进pUC18载体中,获得重组质粒pPCV2-2GD-zq。将pPCV2-2GD-zq DNA纯化和定量后转染PK-15细胞,拯救PCV2 GD-zq病毒。【结果】从PMWS感染的猪淋巴结中分离到了一株PCV2,命名为GD-zq株;序列分析结果显示,GD-zq株全基因组为1 767 bp,与GenBank中公布的5株广东PCV2分离株ORF1核苷酸一致性为97.1%-99.7%,编码氨基酸一致性为98.7%-100%;ORF2核苷酸一致性为93.2%-99.6%,编码氨基酸一致性为92.3%-99.1%;全基因一致性为96.0%-99.6%。pPCV2-2GD-zq质粒转染PK-15细胞后,其通过间接免疫荧光实验(IFA)能从转染细胞及其传代细胞中,检测到拯救出的病毒。【结论】分离了一株PCV2广东株GD-zq,成功构建了PCV2 GD-zq株的感染性克隆。; 陈瑞爱邵定勇同戈黄红亮李延鹏黄文科; 关键词：猪2型圆环病毒全基因感染性克隆

畜禽部分重要疾病疫苗生产关键技术创新与产业化: 陈瑞爱徐家华练炳洲唐满华张文炎林绮萍贺东生赖汉漳黄红亮; 属兽用生物制品科学领域。为了提升兽用疫苗品质，促进传统兽用疫苗生产转型升级，课题组对疫苗生产的关键技术进行了攻克，并应用于产业化生产，丰富了疫苗品种，提升了疫苗品质。具体如下：在禽用鸡胚灭活疫苗方面：在国内率先实现全自动...; 关键词：; 关键词：兽用生物制品兽用疫苗生产工艺

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黄红亮

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