么山山
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 核酸佐剂、含有所述核酸佐剂的疫苗及应用
- 本发明提供了核酸佐剂、含有所述核酸佐剂的疫苗及应用，属于免疫佐剂技术领域，所述用于制备佐剂的核酸包括1)～4)所示核酸中的一种或几种：1)新型冠状病毒的5’UTR和3’UTR直接连接得到的核酸；2)新型冠状病毒的5’UT...
- 刘东安超强梁争论李克雷毛群颖吴星么山山高帆卞莲莲刘明琛
- 第二代肠道病毒71型(EV71)抗原国家标准品的建立被引量：2
- 2021年
- 目的建立第二代肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)抗原国家标准品,用于体外效力(EV71抗原含量)质量控制。方法选取与第一代EV71抗原国家标准品相同来源的原料和冻干方法制备候选标准品(CS),经均匀性和稳定性考核合格后,分发给4个实验室,以EV71抗原国际标准品(WHO IS)和第一代EV71抗原国家标准品(NS)为标准进行协作标定及适用性研究。结果 CS与WHO IS及CS与NS均具有良好的平行性和线性。以WHO IS为标准时,CS检测的平均值为2 316 IU/mL,实验室内CV为4.3%~9.3%,实验室间CV为7.1%,95%置信区间为2 229~2 403 IU/mL;以NS为标准时,CS检测平均值为2 437 U/mL,实验室内CV为3.9%~10.7%,实验室间CV为5.3%,95%置信区间为2 355~2 519 U/mL。以CS为标准检测各企业生产的EV71收获液、原液和疫苗均具有较好的平行性和线性,且准确率均位于90%~110%之间。在2~8和37℃放置56 d,CS抗原含量稳定;CS复溶后置2~8℃保存7 d或-20℃反复冻融5次,抗原含量残留率均未超过90%~110%。结论建立了第二代EV71抗原国家标准品,赋值2 320 IU/mL(相当于2 440 U/mL)。
- 高帆卞莲莲吴星么山山王一平毛群颖梁争论
- 关键词：手足口病肠道病毒71型抗原含量国家标准品
- 沙眼衣原体疫苗的研发
- 沙眼衣原体是一种专性胞内寄生菌,为当前细菌性性传播疾病(STIs)的首要原因。据世界卫生组织估计,全世界每年生殖道衣原体感染的新发病例超过9千万。与筛查或抗生素治疗相比,疫苗接种更经济,并对全球控制沙眼衣原体感染有更大的...
- 么山山曾明
- 关键词：沙眼衣原体疫苗
- 文献传递
- O139型霍乱菌苗生产用菌株93-3稳定性研究
- 2000年
- O139型霍乱菌苗生产用菌株 93 3经过 30代连续传代 ,与原代菌株作比较 ,结果表明 :该菌传代前后表型生物学特征 (生长特性 ,生化反应 ,特异性血清学反应 ,耐药性等 ) ,及遗传学特征 (G +Cmol%测定 )均未发现明显差异 ,证明该菌株具有较好的稳定性。
- 么山山袁佩娜
- 关键词：O139霍乱弧菌稳定性
- 国内甲型副伤寒沙门菌疫苗株的16S rRNA基因序列分析被引量：2
- 2008年
- 目的对我国4株用于或拟用于疫苗生产的甲型副伤寒沙门菌的16S rRNA基因进行序列分析,考察其保守性和差异。方法提取4株菌基因组DNA,以16S rDNA通用引物进行PCR扩增,并对产物进行克隆及测序。结果4株菌均可扩增出约1500bp的目的基因片段,测序结果表明,4株菌中16S rDNA核苷酸序列一致性达99.77%。结论选择保守性高的16S rDNA区段进行序列测定,以防止种子批的变异,便于对疫苗生产用种子进行质量控制。
- 么山山王薇计国欣梁昊宇王斌曾明
- 关键词：疫苗甲型副伤寒沙门菌RDNARRNA
- 重组SARS-CoV-2蛋白疫苗抗原含量通用检测试剂盒的研制被引量：1
- 2023年
- 目的制备重组严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)蛋白疫苗抗原含量通用检测试剂盒,并进行验证。方法选用中国食品药品检定研究院(简称中检院)制备的羊抗S蛋白多克隆抗体作为包被抗体,从4株单克隆抗体(14C8、15F9、17A7和20D8)中筛选出1株具有受体结合域(receptor-binding domain,RBD)结合活性高,且广谱抗主要突变株的单克隆抗体作为酶标抗体(用HRP标记),制备重组SARS-CoV-2疫苗抗原含量的双抗体夹心ELISA法通用检测试剂盒,并采用棋盘滴定法对包被抗体稀释度(1∶125~1∶4000)和酶标抗体稀释度(1∶250~1∶32000)进行优化。验证试剂盒的专属性、线性范围、准确性、精密性及耐用性。将制备的通用检测试剂盒分发给12个实验室,检测各实验室自制的不同表达系统(CHO细胞、毕赤酵母、Sf9细胞或大肠埃希菌)和目的蛋白(RBD或S蛋白)的15批重组SARS-CoV-2蛋白疫苗原液(包括11批以WT株为参考序列设计的原液及4批以Beta、Gamma和Delta变异株设计的原液)。结果确定包被抗体最佳稀释度为1∶500,单克隆抗体20D8作为酶标抗体,最佳稀释度为1∶4000。通用检测试剂盒与严重急性呼吸综合征(SARS)和中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)病毒的重组S蛋白无交叉反应;第1代重组SARS-CoV-2蛋白疫苗抗原国家标准品(简称国家标准品)浓度在0.16~2.50 U/mL范围内,与A450/630呈良好的线性关系,线性方程为:y=0.791 x-0.1004,R2=0.9937;0.16~2.50 U/mL国家标准品重复6次检测结果回收率均在95%~104%之间,变异系数(coefficient of variation,CV)均<15%;2名实验员在不同时间重复3次检测结果的CV为4.4%~6.6%;在不同温度及时间条件下检测结果回收率均在80%~120%范围内。15批重组SARS-CoV-2蛋白疫苗原液抗原含量的检测结果与国家标准品均具有良好的平行性。结论本研究建立的抗原含量通用检测�
- 安超强刘东卞莲莲刘明琛么山山么山山李长贵徐康维毛群颖李长贵徐苗吴星梁争论
- 关键词：重组蛋白疫苗抗原含量
- 贝类中甲型肝炎病毒磁珠免疫沉淀提取方法的建立及其与国标方法的比对被引量：1
- 2021年
- 目的建立蛋白酶K结合磁珠免疫沉淀提取贝类中甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)的方法,并与国际标准方法(ISO15216—2017)进行比较研究。方法应用高效价的HAV单克隆抗体,采用偶联技术,通过优化参数,建立蛋白酶K结合磁珠免疫沉淀的提取方法;通过人工预加入103~105 CCID50/mL的4种甲型肝炎活病毒,计算回收率和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD),评价方法的提取效果;通过对来自5个产地的4种贝类进行病毒提取和一步法实时荧光定量逆转录PCR(quantitative real-time reverse transcriptase polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测,评价方法的适用性。结果HAV单抗效价为1×107,纯度为94.36%,与戊型肝炎病毒、乙型肝炎病毒以及同为小RNA病毒的柯萨奇病毒A16型和肠道病毒A71型均无交叉反应,特异性良好。贝类样品中HAV的平均回收率为22.02%,RSD为0.67%~5.87%,表明该方法对HAV是有效的。与国际标准提取方法相比,在不同浓度下可将HAV检测拷贝数提高10倍以上,显示出良好的剂量效应关系,并且可将不同产地间、不同品种贝类间的检测RSD从4.31%~44.75%和0.61%~29.10%,分别降低至1.76%~6.90%和0.63%~4.80%,有效降低贝类组织中干扰成分的影响。结论该方法较国际标准方法回收率高、抗干扰能力强,具有良好的重现性,提高了贝类等食品中HAV检测灵敏度、可靠性,为贝类等食品安全检测提供了关键的提取手段。
- 闫旭佳袁亚迪么山山宋丽芳孙世洋童钦高帆卞莲莲吴星王一平张洁毛群颖梁争论
- 关键词：甲型肝炎病毒前处理方法贝类
- 戊型肝炎疫苗抗原国家标准品的建立被引量：2
- 2022年
- 目的建立戊型肝炎疫苗抗原国家标准品,用于我国戊型肝炎疫苗质量控制。方法选取一批戊型肝炎疫苗原液为标准品原料制备候选标准品(编号CS),进行均匀性和稳定性检测,并分发给3个实验室进行协作标定和适用性研究。结果CS均匀性结果显示分装精度为0.7%;抗原含量均匀性CV值为6.8%;水分含量为0.4%。稳定性结果显示CS具有较好的加速稳定性和复溶稳定性。协作标定共获得16个有效数据,结果显示CS平均值为259271 YU/支[95%CI:(259271±5768)YU/支],实验室内CV值为2.8%~6.9%,实验室间CV值为4.5%。依据3个实验室完成的协作标定结果,将CS赋值260000 U/支。以CS为标准检测企业自制样品均显示较好的平行性和线性。结论本研究建立了首个戊型肝炎疫苗抗原国家标准品(300051-202101),可用于我国戊型肝炎疫苗质量控制。
- 高帆卞莲莲么山山毛群颖梁争论吴星
- 关键词：戊型肝炎疫苗抗原含量国家标准品
- 大肠埃希菌表达的重组生物制品种子批质量控制
- 2018年
- 近年来,DNA重组技术在生物医药领域获得了迅速发展。《中国药典》三部（2015版）中,对人用重组DNA蛋白制品进行了定义：人用重组DNA蛋白制品是采用重组DNA技术,对编码所需蛋白质的基因进行遗传修饰,利用质粒或病毒载体将目的基因导入适当的宿主细胞,表达并翻译成蛋白质,经过提取和纯化等步骤制备而成的具有生物学活性的蛋白质制品，用于疾病的预防和治疗。
- 赵志晶么山山王斌曾明
- 关键词：大肠埃希菌重组蛋白生物制品种子批
- 沙眼衣原体疫苗的研发被引量：2
- 2013年
- 沙眼衣原体是一种专性胞内寄生菌，为当前细菌性性传播疾病的主要原因。全世界每年生殖道沙眼衣原体感染的新发病例超过9000万。疫苗接种是降低沙眼衣原体感染率的最好办法。此文对研发针对生殖道沙眼衣原体感染疫苗的研究进展做一综述。
- 么山山曾明
- 关键词：疫苗
