刘兆轩
- 作品数：26 被引量：36H指数：4
- 供职机构：济南市中心医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 小鼠胚胎干细胞饲养层的制备
- 目的: 探讨建立有效的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层，用于胚胎干细胞的培养。方法:取孕10.5～18.5天的昆明小鼠胚胎，用于分离原代小鼠胚胎成纤维细胞，在体外培养体系中，观察细胞在增殖，传代，冻存及复苏等方面的条件;取购自A...
- 熊吉信刘小春刘兆轩
- 关键词：胚胎成纤维细胞胚胎干细胞细胞增殖体外培养
- 文献传递
- 转化生长因子β_1联合血管内皮细胞生长因子体外诱导胚胎干细胞向血管内皮细胞分化被引量：4
- 2007年
- 目的:观察胚胎干细胞在转化生长因子β1和血管内皮细胞生长因子体外诱导分化血管内皮细胞的能力,探讨提高诱导效率的方法。方法:实验于2004/2006在南昌大学医学院第二附属医院血液病研究所进行。实验材料:成年昆明小鼠由南昌大学医学院动物科学部提供(机构许可证号:96021),经自然交配怀孕。小鼠胚胎干细胞129×1/SvJ细胞系,购于ATCC公司。实验方法:取孕12.5～14.5d的胎鼠,制作小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养扩增胚胎干细胞。将饲养层上扩增后生长状态好的胚胎干细胞以0.25%胰酶消化,小心吹打成单个细胞悬液,以差速贴壁法将饲养层细胞去掉,按1×104L-1胚胎干细胞悬液悬滴在细胞培养皿的盖上,每滴10～20μL,不换液,3d后形成拟胚体,培养液为不含白血病抑制因子的胚胎干细胞培养液。挑选状态好的拟胚体分3组:转化生长因子β1诱导组、血管内皮细胞生长因子诱导组、转化生长因子β1+血管内皮细胞生长因子诱导组。采用RT-PCR和免疫组织化学方法证实诱导的细胞是否为内皮细胞。结果:①胚胎干细胞体外诱导生长观察:3组中拟胚体贴壁后第2天,胚体均略摊开,周围有上皮样细胞出现,第3,4天有许多卵石样细胞产生,至第6天开始出现由卵石样细胞构成的管状结构,自胚体向周围呈辐射状生长,渐呈网状,诱导时间约2周。转化生长因子β1+血管内皮细胞生长因子诱导组中产生的管样结构的拟胚体数较转化生长因子β1诱导组、血管内皮细胞生长因子诱导组多(44.67±3.88,28.17±6.08,33.00±2.68,P<0.05)。②RT-PCR法检测基因mRNA水平:3组基因表达的扩增片断分别为1086,733,265bp,与DNAmark相比较,条带位置相符。③扩增细胞的免疫组织化学染色:Ⅷ因子抗体反应显示阳性。结论:转化生长因子β1与血管内皮细胞生长因子均能诱导胚胎干细胞为内皮细胞
- 熊吉信刘小春杨春江刘兆轩
- 关键词：胚胎干细胞转化生长因子Β1血管内皮细胞生长因子内皮细胞
- 小鼠胚胎干细胞体外定向分化为血管平滑肌细胞的实验研究
- 目的：探讨体外定向诱导小鼠胚胎干细胞向血管平滑肌细胞分化的条件，为血管组织工程提供种子细胞。方法：用条件培养基体外培养小鼠胚胎干细胞增殖，构建拟胚体分化模型，用10-mol/L维甲酸、3ng/ml转化生长因子β1以及20...
- 熊吉信刘兆轩刘小春杨春江
- 关键词：胚胎干细胞血管平滑肌细胞血小板源性生长因子BB体外定向分化RT-PCR检测
- 文献传递
- 磁性金纳米基因载体的制备及结合DNA研究
- 2013年
- 目的制备1种高分子材料聚乙烯亚胺（PEI）修饰的磁性金纳米粒子作为新型基因载体，观察其表征及结合DNA的能力。方法应用原位合成法合成稳定的复合磁性金纳米微粒（Au-MP-PEI）,将适量FeCl3和FeS04制备纳米磁颗粒（MP-CA）分散液，加人适量PEI溶液及氯金酸（AU-C14 ·3H20）溶液沸腾制得Au-MP-PEI;通过透射电镜观察磁性金纳米粒形态，并检测该纳米粒的粒径及电位分析;采用原液及稀释1 倍的纳米载体进行磁性金纳米载体-DNA的结合实验。结果对PEI包敷的纳米磁颗粒（MP-PEI）做磷钨酸染色后电镜扫描可见每1个团聚体都有数个纳米颗粒构成,笼罩在薄薄一层灰黑色分子下，大小在90 nm左右，而在磁性金纳米颗粒电镜照片中磁颗粒表面可见较多黑色点状颗粒，此即为合成的胶体金。通过不同浓度的金磁纳米载体凝胶阻滞电泳证明磁性金纳米原液能将DNA完全结合。结论成功制备粒径均一的磁性金纳米粒子作为新型基因载体，并且凝胶电泳实验证明该基因载体对DNA具有完全结合的能力。
- 孙念峰徐伯栋胡三元田爱玲钟孝斌孟庆义王瑞华刘兆轩
- 关键词：DNA
- 主动脉弓杂交手术治疗主动脉弓分支变异合并主动脉夹层一例被引量：1
- 2011年
- 患者男，33岁，因突发腹部及后背部疼痛5h入院，入院后行主动脉强化CT检查显示：胸主动脉夹层，病变自主动脉弓开始，扩展至降主动脉、腹主动脉、双髂动脉，并累及双锁骨下动脉，破口距左锁骨下动脉开口〈1cm；主动脉弓分支变异，双颈总动脉共干，右迷走锁骨下动脉；与术中造影相同（图1～3）。
- 王瑞华孙念峰刘兆轩孟庆义
- 关键词：胸主动脉夹层自主动脉弓手术治疗左锁骨下动脉杂交背部疼痛
- 鼠胚胎干细胞体外定向分化为血管平滑肌细胞的实验研究
- 目的探讨体外定向诱导小鼠胚胎干细胞向血管平滑肌细胞分化的条件,为血管组织工程提供种子细胞。方法用条件培养基体外培养小鼠胚胎干细胞增殖,构建拟胚体分化模型,用10-9mol/L维甲酸、3ng/ml转化生长因子β1以及20n...
- 熊吉信刘兆轩刘小春杨春江
- 关键词：胚胎干细胞血管平滑肌细胞血小板源性生长因子BB
- 文献传递
- 甲状腺癌96例手术治疗分析
- 大量文献及临床研究表明95％的甲状腺癌的治疗以手术治疗为主，放疗化疗无效果(未分化癌除外)。正确的手术方式选择是病人长期生存的关键。本文对某院2002年10月至2007年5月96例甲状腺癌手术进行了总结。
- 涂群飞周卫刘兆轩
- 关键词：甲状腺癌手术治疗手术方式
- 文献传递
- TGF-β1 VEGF体外诱导胚胎干细胞为血管内皮细胞
- 目的：研究胚胎干细胞在体外不同条件下定向诱导分化血管内皮细胞的能力。
方法：实验分三组：转化生长因子β1(TGF-β1)诱导组、血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导组、TGF-β1与VEGF共诱导组。
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- 熊吉信刘小春刘兆轩杨春江
- 关键词：胚胎干细胞转化生长因子Β1血管内皮细胞生长因子内皮细胞
- 文献传递
- TGF-β1 VEGF体外诱导胚胎干细胞为血管内皮细胞
- 胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)是来自内细胞团(inner cell mass,ICM)的一种多潜能细胞,具有自我更新、高度增殖和多向分化的能力。
- 熊吉信刘小春刘兆轩杨春江
- 文献传递
- 体外定向诱导小鼠胚胎干细胞向内皮细胞分化的研究被引量：9
- 2007年
- 目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞（embryonic stemcell，ESC）向内皮细胞分化的条件，为组织工程血管提供种子细胞。方法取怀孕12．5d的昆明小白鼠1只，断颈处死，取其胚胎，培养制备小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblast，MEF）。常规复苏ESC后进行体外培养，采用悬滴-悬浮法制备拟胚体（embryoid body，EB）。将EB分两组：实验组加入含有3ng／ml转化生长因子β1、50ng／ml血管内皮细胞生长因子及1μmol／L激活素受体样激酶选择性抑制剂的EB培养基；对照组只加入EB培养基。倒置显微镜下观察细胞生长情况。采用RT—PCR及免疫组织化学染色检测诱导细胞vWF和CD34的表达，验证细胞性质。结果原代MEF生长迅速，第3天细胞融合达90％左右，细胞呈长梭形，有少量侧支，细胞核饱满，有2～3个核仁，细胞排列紧密。传至3～5代，细胞呈多角形，胞浆饱满，有3～4个核仁，细胞表面分泌较多细胞颗粒。ESC在饲养层上保持未分化状态，细胞团形态呈鸟巢样，边缘平整，单个细胞体积小，折光性强，核质比高，增长速度快。悬滴培养3d的EB肉眼可见，再经悬浮培养3d后，形成较大的透亮EB；EB贴壁后第2天，球体略摊开。实验组第4～7天，EB周围有许多圆形细胞产生，第10b14天，可见由大量圆形细胞组成的血管样结构自EB周围生长；对照组EB周围未见血管样结构生长。免疫组织化学染色见EB周围大量vWF染色阳性细胞，RT—PCR检测到vWF和CD34的表达。结论ESC在特定的条件下可以分化为内皮细胞，有可能为组织工程血管提供大量的种子细胞。
- 熊吉信刘兆轩刘小春杨春江
- 关键词：胚胎干细胞内皮细胞组织工程血管
