刘薇
- 作品数：30 被引量：44H指数：4
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- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定
- 目的 分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，并对其进行甲苯胺蓝染色鉴定。方法 取3日龄西藏小型猪，二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞；对所分离培养的软骨细胞进行甲苯胺蓝染色。结果 成功分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，甲苯胺蓝染...
- 刘薇史俊文陈佩雯张婷婷唐华袁进顾为望肖东
- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝
- 西藏小型猪骨髓间充质干细胞分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记间充质干细胞
- 2012年
- 目的建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外分离培养及纯化方法，并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统。方法密度梯度离心法分离西藏小型猪BMSCs，差速贴壁法不断纯化，流式细胞仪检测第3代BMSCsCD45、CD90和CD105表达；此外，用携带EGFP基因的慢病毒转染BMSCs以获得EGFP标记的BMSCs，倒置荧光显微镜下观察感染情况及流式细胞术检测感染效率。结果①密度梯度分离法结合差速贴壁法所获得的细胞经鉴定符合MSCs的特性。②借助慢病毒高效率将EGFP导入BMSCs，感染效率为84．1％。结论利用密度梯度分离法结合差速贴壁法可获得高纯度的BMSCs，基于BMSCs建立了慢病毒介导的外源基因体外投递系统。
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- 关键词：西藏小型猪慢病毒
- 一种高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞的方法被引量：1
- 2015年
- 目的应用Nucleofector II核转染仪将外源基因EGFP导入西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs),并与脂质体转染的方法进行比较,寻求一种高效转染猪胚胎成纤维细胞的方法。方法使用Lonza公司的Nucleofector II核转染仪,参考已报道的转染程序与相应的转染试剂,将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入西藏小型猪PEFs,并与脂质体转染的方法进行对比研究,比较两种方法的转染效率。结果转染5 h后,核转染仪组镜下即可见绿色荧光,转染效率高达80%,远远高于脂质体转染的方法。结论用Nucleofector II核转染仪能实现西藏小型猪PEFs的高效转染,为高效制备转基因克隆西藏小型猪提供了可靠的方法。
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- 关键词：西藏小型猪胚胎成纤维细胞转染脂质体转染
- 浅谈药学毕业生就业形势的困境与机遇被引量：2
- 2009年
- 从正反两方面分析了近十年来药学专业的学生面临的就业压力和新的机遇。并针对此就业形势,浅谈几点应对的措施。
- 刘薇刘中秋
- 关键词：药学就业
- 3种腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率被引量：1
- 2012年
- 目的比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率。方法原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度;同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对PFF的转染效率随MOI值的增加而增高,MOI为103、104、105时,转染效率分别为(33.68±1.18)%、(50.80±2.59)%和(60.08±1.08)%,而其他两种血清型病毒感染效率均低于AAV2-EGFP。3种病毒转染PFF过程中,细胞生长正常,MTT显示各个转染组与对照组(未转染组)在D570处吸光度无显著差异。结论AAV2血清型载体对体外培养的猪胚胎成纤维细胞的感染效率显著高于其他几种血清型,AAV8和AAV9对PFF感染能力极差,筛选AAV2作为西藏小型猪基因打靶的最适病毒载体;同时,3类血清型病毒载体对猪胚胎成纤维细胞均无明显细胞毒性。
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- 关键词：腺相关病毒西藏小型猪胚胎成纤维细胞绿色荧光蛋白流式细胞技术
- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定
- 目的 分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，并对其进行鉴定。方法 实验采用3日龄西藏小型猪，二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞(PCCs)，同样的方法分离培养小鼠的肋软骨细胞(MCCs)，观察两个物种软骨细胞的形态，并分别以...
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- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝蛋白聚糖
- 慢病毒载体法制备遗传工程猴和小型猪的现状及应用前景展望
- 较小鼠等啮齿类动物而言，猴和小型猪等大型实验动物在亲缘关系上与人类更为接近，在解剖、生理生化代谢及疾病发病机制等多方面与人类更接近，使它们在复制人类疾病模型，研究疾病发病机制和新药研发等中有无可替代的应用。而制备遗传工程...
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- 关键词：小型猪体细胞核移植
- 西藏小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养及借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪皮肤成纤维细胞
- 目的 分离培养西藏小型猪皮肤成纤维细胞,并借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪皮肤成纤维细胞。方法 取3日龄西藏小型猪,冷胰酶消化法分离培养西藏小型猪皮肤成纤维细胞；按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒(...
- 刘薇史俊文唐华陈佩雯李静张婷婷袁进顾为望肖东
- 关键词：慢病毒绿色荧光蛋白
- 大鼠在体肠吸收穿心莲内酯的特征研究被引量：5
- 2010年
- 目的为探讨穿心莲内酯生物利用度低的原因,考察穿心莲内酯肠道吸收特性,肝肠循环和肠道酶代谢特点。方法采用大鼠在体肠灌流模型。运用HPLC法测定肠灌流液、胆汁以及经肠道酶降解后样品中穿心莲内酯的量。结果穿心莲内酯在不同肠段的吸收率,以十二指肠最高,达40%,而在结肠最低,仅有10%。穿心莲内酯在十二指肠灌流液中的生物降解最显著(1 h降解约50%),在回肠、结肠中则几乎无降解反应。穿心莲内酯有胆汁排泄,其排泄量为灌流药物总量的0.76%。结论穿心莲内酯在大鼠肠道的吸收较差,而在十二指肠中吸收表现较好是由于存在较强的肠道酶代谢作用。同时,穿心莲内酯存在明显的肝肠循环。穿心莲内酯生物利用度低的原因与肠吸收差、肠道酶代谢作用强和肝肠循环有关。
- 叶玲刘薇唐斓夏笔军龚耘刘中秋
- 关键词：穿心莲内酯
- 慢病毒载体法制备遗传工程猴和小型猪的现状及应用前景展望
- 较小鼠等啮齿类动物而言，猴和小型猪等大型实验动物在亲缘关系上与人类更为接近，在解剖、生理生化代谢及疾病发病机制等多方而与人类更接近，使它们在复制人类疾病模型，研究疾病发病机制和新药研发等中有无可替代的应用。而制备遗传工程...
- 刘薇贾俊双唐华林晓琳袁进顾为望肖东
- 关键词：小型猪体细胞核移植
