吕新跃
- 作品数：26 被引量：65H指数：4
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- 树鼩载脂蛋白CI cDNA及其蛋白质结构
- 1998年
- 目的:克隆获得树鼩(tree shrew,TS)载脂蛋白CI的基因及蛋白质结构。方法:分离提取TS肝组织mRNA,以此为模板,反转录构建了TS肝组织cDNA文库。利用制备的兔抗TS载脂蛋白CI多抗血清为探针筛选该文库,获得两个阳性克隆,对其进行DNA测序及序列比较。利用相应的计算机软件对推译出的该蛋白氨基酸序列及其二级结构、亲疏水性分析和预测。结果:两克隆均为TS apoCI cDNA基因。大的克隆由380个核苷酸构成,包括21 bp、95 bp组成的5’和3’非翻译区,264 bp组成的一个完整开放阅读框架,编码翻译88个氨基酸的apoCI前体,含26个氨基酸构成的信号肽和62肽的成熟蛋白。其成熟肽长度与大鼠、小鼠和狗的相应结构一致,但较人和狒狒apoCI的成熟肽多5个氨基酸。并推测出该蛋白的功能域及蛋白质的二级结构;蛋白质的疏水性强于人的apoCI。结论:上述结果为进一步研究TS apoCI基因和蛋白质的分子结构、功能奠定了基础。
- 吕新跃王克勤陈保生
- 关键词：树鼩CDNA序列
- 北京鸭肝组织cDNA文库的构建及ApoAI cDNA克隆的筛选和测序(简报)被引量：2
- 1997年
- 吕新跃陈保生王克勤
- 关键词：CDNA克隆APOAI北京鸭
- 人载脂蛋白B基因3′端高可变区不同等位基因在真核细胞中对基因表达调控的作用被引量：6
- 1997年
- 为探讨人载脂蛋白B基因3'端高可变区（hypervariableregion，HVR）不同等位基因对真核细胞基因表达调控的作用．选取在正常人群中分本最广的HVE36小等位基因和在冠心病病人中分布占优势的大等位基因HVE44，分别克隆进含荧光素酶基因的pGL2－promoter及pGL2－control质粒中，转染Hela细胞和HepG2细胞．结果发现，在不同的细胞系中插入HVE44等位基因的重组质位表达均高于插入HVE36的重组质粒的表达。表明载脂蛋白B基因3'端高可变区不同等位基因具有调控基因表达的作用，HVE44大等位基因可上调细胞内的基因表达，这或许是以HVE44等大等位基因为主体的动脉粥样硬化患者体内载脂蛋白B升高的原因之一．
- 何平吕新跃薛红陈保生
- 关键词：载脂蛋白B基因
- 树鼩载脂蛋白AI cDNA的克隆及其组织表达被引量：1
- 1999年
- 目的克隆不易感动脉粥样硬化动物树（ｔｒｅｅｓｈｒｅｗ，ＴＳ）载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡＩ，ａｐｏＡＩ）的基因，比较分析其结构特点。方法以提取的肝组织ｍＲＮＡ为模板，反转录构建了ＴＳ肝组织ｃＤＮＡ文库。利用制备的兔抗ＴＳ载脂蛋白ＡＩ多抗血清为探针筛选该文库，对阳性克隆进行测序、序列分析及组织表达实验。结果克隆获得了ＴＳａｐｏＡＩｃＤＮＡ序列，全长序列由９００个核苷酸构成，包括２８ｂｐ组成的５′非翻译区；７９５ｂｐ组成的一个完整开放阅读框架，编码翻译２６５个氨基酸的ＴＳａｐｏＡＩ前体（含１８个氨基酸构成的信号肽、６个氨基酸的原肽片段及２４１肽的成熟蛋白）；两个终止密码ＴＧＡ、ＴＡＡ和随后７２ｂｐ的３′非翻译区。新基因已被ＧｅｎＢａｎｋ接受。对编码蛋白质的亲疏水性分析表明ＴＳａｐｏＡＩ的疏水性强于人的相应蛋白。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ显示ＴＳａｐｏＡＩ基因主要在肝脏和小肠组织表达。结论获得了不易感动脉粥样硬化动物ＴＳａｐｏＡＩ的新基因，编码的蛋白质结合胆固醇及胆固醇酯的能力可能大于人的ａｐｏＡＩ。
- 吕新跃陈保生陈保生
- 关键词：载脂蛋白A-I克隆动脉粥样硬化CDNA
- 糖皮质激素对前列腺素E_2介导的主动脉平滑肌细胞cAMP生成的影响被引量：2
- 1997年
- 目的观察地塞米松对前列腺素Ｅ２介导的离体培养兔主动脉平滑肌细胞的ｃＡＭＰ生成的影响。方法用蛋白竞争结合法测定细胞ｃＡＭＰ含量，并确定腺苷酸环化酶的活性。结果从１０ｐｍｏｌ／Ｌ到１０ｎｍｏｌ／Ｌ地塞米松对培养细胞的ｃＡＭＰ生成有明显抑制作用并呈现剂量依赖性，作用时间愈长，该抑制作用愈强。经地塞米松预处理８小时的培养细胞，其前列腺素Ｅ２介导的腺苷酸环化酶活性显著下降。结论糖皮质激素在腺苷酸环化酶水平抑制前列腺素Ｅ２介导的培养平滑肌细胞ｃＡＭＰ生成。另外还观察到地塞米松拮抗前列腺素Ｅ２的抑制培养细胞增生效应。
- 赵庆伟吕新跃
- 关键词：糖皮质激素前列腺素E类平滑肌细胞
- 树qú apoC I cDNA的克隆测序
- 吕新跃王克勤
- 关键词：CDNA文库APOAICDNA克隆
- 高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因点突变的研究被引量：1
- 2001年
- 目的：建立低密度脂蛋白－受体（ＬＤＬ－Ｒ）基因点突变监测方法，从基因水平对３０例原发性高胆固醇血症患者进行筛选、明确诊断。 方法：将聚合酶链式反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）与银染技术相结合，用１９对引物对ＬＤＬ－Ｒ基因的全部１８个外显子进行检测，３０例患者中，对筛查出的突变用ＰＣＲ产物直接测序或克隆测序的方法明确突变的性质和位置。 结果：确立的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ条件稳定，银染方法灵敏度高、重复性好，且避免了同位素污染。３０例患者中，发现１例定位于外显子１４的杂合子点突变患者，ＰＣＲ产物直接测序证实第６７１位密码子发生错义突变：ＣＣＣ→ＣＧＣ，导致脯氨酸→精氨酸；１例纯合子家族性高胆固醇血症患者外显子７发生点突变，克隆测序证实密码子３０８位发生错义突变：ＴＡＣ→ＴＧＣ，导致半胱氨酸→酪氨酸；２例杂合子患者外显子４的３’部分ＳＳＣＰ出现相同异常带型。查阅文献，测序证实的突变皆是新的突变。 结论：建立的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法可用于高胆固醇血症患者ＬＤＬＲ基因点突变的筛检。研究结果从基因水平证实中国家族性高胆固醇血症患者ＬＤＬ－Ｒ基因突变具有多样性的特点。
- 朱大明陈在嘉陈保生陆宗良寇文镕徐义枢吕新跃曾武威杨跃进陈纪林高润霖杜怀明马咸成
- 关键词：高胆固醇血症基因突变低密度脂蛋白
- 载脂蛋白基因克隆技术的研究进展
- 1999年
- 动脉粥样硬化的形成受遗传和环境多因素的影响，某些载脂蛋白的基因或基因变异与动脉粥样硬化的发病有关。近年来有关基因克隆技术及其在克隆载脂蛋白基因方面的应用进展迅速。这些技术基本可分为三大类，即功能克隆、定位克隆和候选克隆。
- 吕新跃暴晓梅
- 关键词：载脂蛋白基因克隆动脉粥样硬化
- 北京鸭载脂蛋白AⅠ cDNA的克隆及其组织表达被引量：1
- 1998年
- 分离提取北京鸭肝组织ｍＲＮＡ，以此为模板，反转录构建了鸭肝组织ｃＤＮＡ文库．利用制备的兔抗鸭载脂蛋白ＡⅠ（ａｐｏＡⅠ）多抗血清为探针筛选该文库，获得１０个阳性克隆．测序及序列分析表明：克隆得到了完整的鸭ａｐｏＡⅠｃＤＮＡ序列，它由１０５０个核苷酸构成，包括１８ｂｐ、２４０ｂｐ组成的５′和３′非翻译区，７９２ｂｐ组成的一个完整开放阅读框架，编码２６４个氨基酸的鸭ａｐｏＡⅠ前体，含１８个氨基酸构成的信号肽、６个氨基酸的原肽片段和２４０肽的成熟蛋白．推译出的成熟肽与鸭ａｐｏＡⅠ氨基酸的直接测序结果完全一致．该新基因已被ＧｅｎＢａｎｋ接受．Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ显示鸭ａｐｏＡⅠｍＲＮＡ不仅主要在肝和小肠组织表达；而且不同于人和哺乳动物，亦可少量在脑、肾、肌肉组织分布．结果为进一步研究不易感动脉粥样硬化动物北京鸭ａｐｏＡⅠ基因组结构、功能奠定了基础．
- 吕新跃陈保生王克勤
- 关键词：北京鸭载脂蛋白AICDNA动物模型
- 藏族人载脂蛋白B基因信号肽多态性与血脂水平被引量：1
- 1999年
- 目的：了解正常藏族人群载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ） 基因多态性及其血脂特点。方法：随机选取１００ 例正常成年藏族受试者，男女各半，年龄１８ ～６０ 岁。测定其血清甘油三脂（ＴＧ） 、总胆固醇（ＴＣ） 、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ Ｃ） 、高密度脂蛋白胆固醇（ ＨＤＬ－ Ｃ） 、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＢ 和脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］ 的浓度；并采用ＰＣＲ 方法检测其ａｐｏＢ 基因信号肽插入／缺失（ｉｎｓ／ｄｅｌ） ＤＮＡ 片段的多态性，计算各等位基因的分布频率。结果：藏族人群中以ｉｎｓ 等位基因分布为主（０－７４５） ，ｄｅｌ等位基因频率占０－２５５ ，两种等位基因分布无明显的性别差异。组成的三种基因型分别为ｉｎｓ／ｉｎｓ ５６ 例、ｉｎｓ／ｄｅｌ ３７ 例、ｄｅｌ／ｄｅｌ ７ 例。与汉族人群比较，藏族ｉｎｓ／ｄｅｌ 等位基因的频率与其相近，但ｄｅｌ 等位基因频率显著低于西方高加索人种（０－３４０ ，Ｐ＜ ０－０５） 。藏族人群中男女各年龄段（１８ ～３９ 岁、４０ ～６０ 岁） 的各项血脂指标变化不大，但ＴＣ、ＬＤＬ－ Ｃ 和ａｐｏＢ的含量显著低于汉族和西方人群，Ｌｐ（ａ） 的水平与后者接近。ｄｅｌ 等位基因的个体其ＬＤＬ－ Ｃ 的浓度高于ｉｎｓ 者。
- 吕新跃暴晓梅赵原力陈保生
- 关键词：藏族载脂蛋白B基因多态性
