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草鱼MYH mRNA表达量分析中采用的内参基因稳定性比较被引量：13: 2009年; 本研究分别以β-actin、18SrRNA和GAPDH为内参基因,采用实时荧光定量PCR对草鱼早期发育时期肌球蛋白重链(myosin heavy light,MYH)基因的mRNA表达量进行分析,并比较不同内参基因对MYH基因mRNA表达水平检测结果的准确性。研究结果表明,以β-actin和GAPDH作为内参,MYH基因mRNA表达水平完全一致,其表达量从原肠到仔鱼阶段逐次递增,仔鱼与原肠期阶段相比表达量差异显著;当采用18S rRNA作为内参时,MYH基因mRNA在发育阶段的表达量呈不稳定状态。因此,β-actin和GAPDH均可作为内参基因,用于草鱼早期发育中MYH基因mRNA的相对定量研究;而18S rRNA作为内参时,可能会对检测结果造成偏差。本研究不仅准确的揭示了草鱼MYH基因mRNA的表达特征,并且为荧光定量PCR技术在鱼类基因表达研究方面提供了有价值的参考。; 周瑞雪蒙涛赵发兰成嘉宾石玉张建社褚武英; 关键词：草鱼肌球蛋白重链 Β-ACTIN RRNA GAPDH

鳜碱性肌球蛋白轻链基因cDNA的克隆及其发育表达分析被引量：9: 2010年; 肌球蛋白轻链是构成鱼类肌纤维主要组成部分,在鱼类肌肉生长和收缩过程中具有重要作用。鳜鱼具有生长快、肉质细嫩、味道鲜美、营养成分高等优良的性状。研究通过构建鳜肌肉组织cDNA文库分离到两个碱性肌球蛋白轻链基因,即MLC1和MLC3基因。序列分析显示MLC1和MLC3基因cDNA序列全长分别为1237bp和1070bp,分别编码192和150个氨基酸,除去MLC1N端多出的42个氨基酸残基,MLC1与MLC3氨基酸序列同源性为80.3%。通过PROSITEtools软件预测显示两种轻链都具有两个保守的EF-手相结构,其中第二个EF-hand结构除前三个氨基酸外同源性达100%。鱼类MLC3轻链N端没有高等脊椎动物MLC3特有标志序列。采用实时荧光定量PCR方法对鳜鱼MLC1和MLC3发育性表达分析表明,在原肠期开始有低量表达,与原肠期、尾芽期和肌肉效应期相比,心搏期和仔鱼期MLC1和MLC3表达量显著升高。研究结果首次提供了鳜肌肉组织肌球蛋白主要结构基因的分子生物学信息以及它们在鳜肌肉组织发生和功能的相关性。; 周瑞雪黄斌蒙涛褚武英成嘉赵发兰陈敦学宾石玉张建社; 关键词：克隆 CDNA文库发育表达

鳜肌球蛋白轻链2基因cDNA的克隆及其发育表达分析被引量：12: 2009年; 通过构建肌肉组织cDNA文库分离到鳜肌球蛋白轻链2基因(MLC2),基因登录号为FJ428249.MLC2基因cDNA序列全长1206bp,编码区长度为579bp.MLC2基因开放阅读框编码170个氨基酸,具有EF-手相家族蛋白全部4个EF-手相结构.与已报道的其他动物MLC2相比较,所推导氨基酸序列同源性在66.3%～97.6%,其中与Ca2+结合区域非常保守,7种鱼氨基酸序列同源性为100%.采用实时荧光定量PCR方法对鳜MLC2发育表达分析表明,MLC2在原肠期开始有低量表达,与原肠期相比,尾芽期、肌肉效应期和仔鱼阶段MLC2表达量随发育阶段渐进而升高.; 周瑞雪蒙涛褚武英成嘉李志英宾石玉张建社; 关键词：CDNA克隆发育表达

鳜鱼与鲢鱼肌球蛋白轻链2启动子的克隆及其序列比较分析被引量：4: 2011年; 采用PCR方法从鳜鱼(Siniperca chuasti)基因组DNA中分离得到了鳜鱼肌球蛋白轻链2基因启动子序列,其大小为890 bp,包含1个TATA框、3个MEF2结合位点和5个与b HLH转录因子相结合的E-框(CANNTG).用同样的方法从鲢鱼基因组DNA中分离得到鲢鱼肌球蛋白轻链2基因启动子序列,其大小为870bp,包含了1个TATA框、1个MEF2结合位点和3个与bHLH转录因子相结合的E-框.鳜鱼比鲢鱼肌球蛋白轻链2基因启动子转录调控元件更加丰富.; 赵发兰周瑞雪成嘉陈敦学农小献蒙涛张建社褚武英; 关键词：鳜鱼鲢鱼启动子

淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法: 本发明为淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、Taq酶、上游引物、下游...; 张建社褚武英周瑞雪蒙涛赵发兰陈敦学

淡水鱼类肌球蛋白重链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法: 本发明为淡水鱼类肌球蛋白重链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法。试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、氯化镁、dNTP、Taq酶、重链基因和内参基因特异性上、下游...; 褚武英张建社蒙涛周瑞雪赵发兰陈敦学

翘嘴鳜肌球蛋白轻链3b基因(MLC3b)的分子克隆和特征分析被引量：2: 2010年; 翘嘴鳜以其优良肉质性状近期已成为中国极具商品价值和大力推广的人工养殖名贵鱼类之一。为了解其控制优良肉质性状的遗传基础,本文采用同源克隆RT-PCR方法,获得该鱼肌球蛋白轻链MLC3b基因cDNA序列,该基因cDNA序列为453bp,编码150个氨基酸残基,通过PROSITE tools软件预测显示,该轻链具有两个保守的EF-手相结构和一个C-末端保守序列,且该MLC3轻链N端没有高等脊椎动物特有标志序列。MLC3b基因cDNA序列与MLC3a编码区的同源性达97.7%。本研究结果将为名贵鱼类肉质结构基因及功能的研究提供分子生物学基础。; 农小献赵发兰陈敦学周瑞雪蒙涛成嘉张建社褚武英; 关键词：翘嘴鳜克隆

淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法: 本发明为淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、Taq酶、上游引物、下游...; 张建社褚武英周瑞雪蒙涛赵发兰陈敦学; 文献传递

鳜肌肉组织cDNA文库构建及其ESTs分析被引量：3: 2009年; 以鳜(Siniperca chutasi)肌肉为实验材料,采用非均一化引物定向克隆技术构建了鳜肌肉组织cDNA文库,并进行大规模EST测序和序列分析。结果显示,cDNA文库的库容量为2.3×105,重组率达96.5%,平均插入片段长度为1.2 kb。随机挑选5456个克隆,成功测序5191个,其中高质量序列5063个,达97.5%。利用PHRAP程序聚类拼接后,得到1625条非冗余序列,包括443个重叠群(Contigs),1182个单拷贝(Singlets)。使用BLAST软件将这些序列同GenBank等数据库进行比对、注释,发现1625个非冗余序列与鳜肌肉结构和发生相关,而其中991条序列与NCBI数据库中的其它物种已知序列存在显著的相似性,剩余的634条非冗余序列(占所有非冗余序列的39%)为在鳜中新发现的未找到同源序列的序列。740个基因为能够注释到Gene ontology(Go)中的序列数目。; 蒙涛丁峰褚武英周瑞雪宾石玉胡松年张建社; 关键词：肌肉 CDNA文库 EST

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周瑞雪