唐海波
- 作品数：11 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- Viperin抑制狂犬病病毒机理的研究
- Viperin是一种干扰素诱导蛋白,可通过完全不同的机制对多种病毒发挥抗病毒活性。我们的研究发现,狂犬病病毒在巨噬细胞RAW264.7中生长缓慢,病毒滴度显著地低于易感细胞(如NA细胞),viperin表达微弱或不表达,...
- 唐海波韦显凯路专灵钟一治彭可可欧阳伶宣蒋元徐素萍张扬祖刘宇明邓朝谦李晓宁罗廷荣
- 关键词：狂犬病病毒
- 文献传递
- 狂犬病病毒SYBR-GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
- 2012年
- 狂犬病病毒为不分节段单链负股的RNA病毒,属弹状病毒科狂犬病病毒属。世界上几乎所有国家都有狂犬病发生,狂犬病病毒能够使所有温血动物发病致死,死亡率高达100%。本研究根据GenBank中的狂犬病病毒M基因序列,选择保守区域设计引物,通过对SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测狂犬病病毒的SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR方法。结果显示,建立的狂犬病病毒实时荧光定量PCR方法,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点,是开展狂犬病的临床检测的有力工具。
- 陆专灵何晓霞谢琳娟梁湘唐海波罗扬罗廷荣
- 关键词：狂犬病病毒
- Viperin抑制狂犬病病毒机理的探索研究
- Viperin是一种干扰素诱导蛋白，可通过完全不同的机制对多种病毒发挥抗病毒活性。先前的研究没有viperin抑制狂犬病病毒(RABV)复制的报道。通常狂犬病病毒在其易感细胞中生长良好，具有较高的病毒滴度。最近我们的研究...
- 唐海波
- 关键词：干扰素诱导蛋白狂犬病病毒蛋白表达量抗病毒活性
- 小鼠TLR3基因双敲除打靶载体构建及巨噬细胞RAW264.7^(TLR3-/-)细胞系的建立被引量：1
- 2018年
- 【目的】建立Toll样受体3(TLR3)基因缺失的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞系,为探索狂犬病毒感染机体过程中TLR3在固有免疫反应中的作用机制提供理论依据。【方法】采用Golden Gate Kit试剂盒组装转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)打靶载体p TALEN-TLR3,经酶切和测序验证其连接正确后,通过脂质体瞬时转染RAW264.7细胞,转染后提取细胞DNA,用T7核酸内切酶酶切验证TALEN质粒剪切活性。【结果】TALENs左右臂分两部分连接,首先完成A、B部分的各自连接,然后分别将T1LA与T1LB、T1RA与T1RB、T2LA与T2LB、T2RA与T2RB连接,TALEN模块经过两次连接后的PCR鉴定结果显示,T1L、T1R和T2L的4个克隆均呈阳性,T2R有3个克隆呈阳性。T2L和T2R质粒共转染RAW264.7细胞后提取DNA为模板,经PCR扩增后用T7核酸内切酶进行酶切,酶切后的DNA电泳结果显示TALEN2剪切活性较强,共获得3条条带(931、555和376 bp)。TALEN打靶载体p TALEN-TLR3转染RAW264.7细胞24 h后用胰酶进行消化,并加入800μg/m L G418进行筛选,7 d后获得细胞单克隆;挑选阳性细胞克隆进行T7核酸内切酶酶切鉴定及测序,结果发现4-1和4-40号细胞克隆为双敲细胞系,均缺失7 bp的核苷酸碱基,为非3整数倍碱基缺失,可造成后续基因移码突变,使细胞基因功能失活。【结论】通过TALEN技术可成功构建TLR3基因双敲除的小鼠巨噬细胞RAW264.7TLR3-/-细胞系,且可用于狂犬病毒感染细胞后细胞因子和TLR3间的关系研究。
- 韦显凯韦显凯祝健唐海波祝健李晓宁唐海波
- 关键词：狂犬病毒RAW264.7细胞
- Viperin抑制狂犬病病毒机理的研究
- Viperin是一种干扰素诱导蛋白,可通过完全不同的机制对多种病毒发挥抗病毒活性.我们的研究发现,狂犬病病毒在巨噬细胞RAW264.7中生长缓慢,病毒滴度显著地低于易感细胞(如NA细胞),viperin表达微弱或不表达,...
- 唐海波韦显凯路专灵钟一治彭可可欧阳伶宣蒋元徐素萍张扬祖刘宇明邓朝谦李晓宁罗廷荣
- 关键词：狂犬病病毒
- 狂犬病病毒ERA株P蛋白的可溶性表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 扩增狂犬病病毒ERA株的P基因并定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，获得阳性P基因重组质粒pET-P，转化原核表达宿主菌BL21(DE3)，用IPTG诱导并优化诱导条件，使其在大肠杆菌中以可溶性表达为主。SDS...
- 孟先明潘艳蔡新斌陆专灵梁湘唐海波杨剑张红普罗廷荣
- 文献传递
- 基于拯救重组狂犬病弱毒的新型中和抗体检测方法
- 本发明公开了一种基于拯救重组狂犬病弱毒的新型中和抗体检测方法，发明人利用反向遗传学技术拯救出带有绿色荧光蛋白的重组病毒rRV-eGFP，并运用该重组病毒改进了国际公认的检测抗狂犬病毒中和抗体效价的RFFIT法，从而建立了...
- 罗廷荣唐海波钟一治韦显凯陆专灵李晓宁廖素环梁晶晶
- 文献传递
- 广西流行狂犬病毒糖蛋白基因的遗传性分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】通过测定广西流行狂犬病毒糖蛋白(G)基因的全序列,了解广西狂犬病的流行趋势和遗传变异规律,为制定广西狂犬病的防控策略提供科学依据。【方法】2000年10月～2007年10月,从广西14个市采集1569份动物脑组织,经RT-PCR检测及小白鼠脑内接种试验分离狂犬病毒,然后对狂犬病毒G基因进行测序分析。【结果】从广西各地共分离获得26株狂犬病毒野毒株,其中犬23份,牛、猪、猫各1份。狂犬病毒G基因核苷酸全长2067bp,开放阅读框1575bp,编码524个氨基酸。根据G基因核苷酸同源性及遗传进化树分析结果,可将广西流行的狂犬病毒株分成3个群,Ⅰ群15株,其核苷酸同源性为97.7%～99.9%;Ⅱ群10株,其核苷酸同源性为98.0%～99.9%;Ⅲ群只有1株。通过氨基酸变异分析,了解了26株野毒株G基因编码蛋白的氨基酸突变位点。【结论】广西存在3个群的狂犬病毒野毒株,且以Ⅰ群和Ⅱ群流行为主,3个群的氨基酸变异均呈现明显的特异性。
- 杨健张红普章民李晓宁何晓霞谢琳娟陆专灵韦显凯唐海波罗廷荣
- 关键词：狂犬病毒G基因
- 小鼠抗病毒基因viperin的原核表达及其抗原性探索被引量：6
- 2014年
- Viperin是一种由Ⅰ型和Ⅱ型干扰素诱导的宿主蛋白,在进化上高度保守。本研究以小鼠脑组织为原材料,通过RT-PCR扩增得到包括完整open reading frame(ORF)的1 155 bp的viperin基因序列,成功亚克隆并构建了原核表达载体pET-32a-vip,将其转化到大肠杆菌Rosetta中进行原核表达。结果表明:原核表达的重组蛋白viperin主要以包涵体的形式表达,用镍离子亲和层析法获得纯度较高的viperin蛋白,为探讨原核表达的viperin抗原特性,将纯化的viperin蛋白免疫4周龄昆明小鼠,制备得到抗viperin多克隆抗体。经Western blot和IFA检测,该抗体能与真核细胞自然表达的viperin反应,特异性良好且效价高,表明原核表达的viperin具有良好的抗原性。获得的多克隆抗体为进一步研究viperin的抗病毒生物学功能奠定了良好的基础。
- 唐海波钟桃珍罗扬邢杏伟钟一治廖芳马净李晓宁廖素环梁晶晶罗廷荣
- 关键词：原核表达抗原性小鼠
- Viperin抑制狂犬病病毒机理的研究
- Viperin是一种干扰素诱导蛋白,可通过完全不同的机制对多种病毒发挥抗病毒活性。我们的研究发现,狂犬病病毒在巨噬细胞RAW264.7中生长缓慢,病毒滴度显著地低于易感细胞(如NA细胞),viperin表达微弱或不表达,...
- 唐海波韦显凯路专灵钟一治彭可可欧阳伶宣蒋元徐素萍张扬祖刘宇明邓朝谦李晓宁罗廷荣
- 关键词：狂犬病病毒
