宋力
- 作品数：21 被引量：23H指数：4
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金中国医学科学院放射医学研究所基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- Ad-Rb94联合γ射线照射对食管癌细胞生长的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨人视网膜母细胞瘤94基因重组腺病毒载体（Ad-Rb94）联合γ射线对人食管癌细胞体外生长的抑制作用.方法 采用随机数字表法将培养细胞分为空白对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体（Ad-LacZ）对照组、Ad-Rb94组、γ射线照射组和Ad-Rb94联合γ射线照射组（联合组）,Ad-LacZ和Ad-Rb94于体外转染人食管癌EC109细胞系,转染6 h后进行4 Gy 137Csγ射线照射,用噻唑蓝法检测细胞的生长抑制率.结果 Ad-Rb94组、γ射线照射组和联合组对EC109细胞生长均具有抑制作用,其中,联合组抑制率最高（40.30±4.2）%,明显高于Ad-Rb94组（18.3±0.4）%和γ射线照射组（27.40±2.9）%（x2=7.91,x2=5.82,P＜0.05）;γ射线照射组与Ad-Rb94组比较差异具有统计学意义（x2=5.12,P＜0.05）.结论 Ad-Rb94联合γ射线照射对食管癌细胞的抑瘤作用具有协同效应,能有效地抑制肿瘤细胞的生长.
- 陈凤华李进谭志军姜恩海宋力王欣茹王芹
- 关键词：食管肿瘤基因疗法放射疗法
- IL-21基因对肝癌细胞抑瘤效应的辐射增敏作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨外源性IL-21基因联合放射对肝癌HepG2细胞抑瘤效应的辐射增敏作用。方法:将Ad-IL-21腺病毒颗粒转染HepG2细胞系,进行6Gy 137 Csγ射线照射,将细胞分为4组,包括空白对照组、Ad-IL-21组、照射组以及联合组,观察HepG2细胞的生长、细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:与Ad-IL-21组和照射组比较,联合组HepG2细胞的抑制效应最显著,转染48h的抑制率明显高于转染24h和72h的抑制率。联合组HepG2细胞阻滞在G2期最多,凋亡细胞所占比例最高,转染24h和48h的凋亡率分别达到29.1%和33.1%。结论:IL-21基因联合放射对肝癌细胞的抑瘤效应具有辐射增敏作用,明显地抑制肝癌细胞的生长。
- 王芹孙元明王彦孙志娟宋力刘晓秋徐畅杜利清樊赛军樊飞跃刘强
- 关键词：肝癌腺病毒照射
- 人白介素21基因联合γ射线照射对食管癌EC109细胞周期的影响
- 2011年
- 目的研究含有IL-21基因的重组腺病毒表达载体(Ad-IL-21)联合γ射线照射对食管癌细胞EC109生长的抑制作用,为肿瘤的基因-放射治疗提供实验依据。方法将Ad-IL-21于体外转染食管癌细胞株EC109,用MTT比色法和流式细胞术观察基因联合照射后EC109细胞的生长曲线和细胞周期的变化。结果 Ad-IL-21基因组、单纯照射组和Ad-IL-21基因联合照射组EC109细胞生长均明显受到抑制,与Ad-lacZ组和空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。其中联合照射组EC109细胞生长最为缓慢,与Ad-IL-21基因组和单纯照射组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ad-IL-21基因组、单纯照射组和联合治疗组大量的EC109细胞停留在G1期,而G2期和S期细胞明显减少,联合治疗组细胞停留在G1期最多。结论腺病毒介导的白介素21基因转移能显著抑制食管癌EC109细胞的生长,使细胞产生G1期阻滞,与放射治疗联合应用具有相加和协同效应。
- 张鸿艳赵欣然曹永珍李进王芹陈凤华宋力邵盈
- 关键词：食管癌腺病毒载体
- 人IL-21cDNA的克隆及重组腺病毒表达载体的构建被引量：4
- 2009年
- 目的:构建含人IL-21基因的重组腺病毒表达载体,为IL-21基因治疗肿瘤研究奠定基础。方法:从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,将其连接到进入载体pENTR1A,然后经LR重组转入到腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST中,构建含IL-21基因的腺病毒载体(Ad-IL-21),并进行测序鉴定和PCR鉴定。结果:Ad-IL-21表达载体测序结果与GenBank中IL-21基因序列一致,Ad-IL-21经PCR扩增出IL-21基因片段。结论:成功构建携带人IL-21基因的重组腺病毒表达载体。
- 王芹李进王颖嫒宋力岳井银穆传杰樊飞跃
- 关键词：基因克隆腺病毒表达载体
- 采用Gateway^(TM)系统构建人Rb94基因重组腺病毒载体被引量：6
- 2010年
- 目的采用GatewayTM技术构建人Rb94基因重组腺病毒载体(Ad-hRb94)。方法从人类胚胎中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA,PCR扩增Rb94目的基因片段。设计含有attB侧翼序列的引物,用于重组片段的PCR扩增,在BP重组酶的作用下,将含attB位点的PCR产物与受体载体pDONRTM221发生重组反应,产生入门克隆。在LR重组酶作用下,将入门克隆与带attR1、at-tR2位点的目的载体Ad/CMV/V5-DEST体外重组形成表达克隆Ad-hRb94。经PCR和测序鉴定,将Ad-hRb94线性化后转入293A细胞进行病毒的包装、扩增及病毒滴度测定。结果经PCR和测序证实目的基因Rb94片段按正确方向重组入目的载体中,带Rb94基因的目的载体在293A细胞中包装成功,获得高滴度的病毒颗粒,滴度为9.41×1010pfu/ml。结论本实验利用GatewayTM技术成功构建了Ad-hRb94,为进一步进行肿瘤基因治疗研究奠定了实验基础。
- 李进王芹宋力刘强王月英唐卫生张宁王蕾
- 关键词：重组腺病毒
- IRM-2小鼠全长cDNA编码蛋白质分析被引量：1
- 2012年
- 目的分离和鉴定IRM-2小鼠辐射抗性相关基因。方法以IRM-2小鼠的21条表达序列标签为模板进行PCR扩增，从IRM-2小鼠全长cDNA文库中测定cDNA克隆的序列，通过与GenBank进行同源序列信息比对，对全长cDNA编码的蛋白质进行分析。结果从IRM-2小鼠全长cDNA文库中获得5条全长cDNA序列，与小鼠已知基因不同源，得到了可能编码蛋白质的氨基酸序列和蛋白质的理化性质等信息。结论通过对全长cDNA编码的蛋白质进行分析，提示IRM-2小鼠体内可能存在目前尚未发现的辐射抗性相关基因。
- 王芹刘晓秋李进杜利清孙志娟王彦刘强宋力樊飞跃
- 关键词：文库数据库核酸
- 白细胞介素21基因联合不同剂量γ射线照射对乳腺癌细胞生长的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究人白细胞介素21基因重组腺病毒载体（Ad—IL-21）联合不同剂量叮射线照射对人乳腺癌细胞体外生长的抑制作用。方法采用随机数字表法设立空白对照组、β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒载体（Ad—LacZ）对照组、Ad．IL．21组、γ射线照射组和Ad—IL-21联合γ射线照射组（联合照射组），将Ad—IL-21于体外转染人乳腺癌MCF-7细胞，转染6h后进行0～10GymCs1射线照射，用噻唑蓝法检测MCF-7细胞的生长抑制率。结果Ad—IL-21转染MCF-γ细胞后，MCF-γ细胞生长受到的抑制效应显著高于Ad—lacZ组（F=26．34，P〈0．05），单独照射组和联合照射组的抑制率均显著高于Ad—IL-21组（F=23．51，F=27．55，P均〈0．05），随着照射剂量的增大，细胞抑制率逐渐增高。同一照射剂量中，联合照射组对MCF-γ细胞的抑制作用均显著高于γ射线照射组，联合照射组抑制率最高，与Ad—IL-21组和γ射线照射组比较，差异具有统计学意义（F=35．68，F=38．67，P均〈0．05）。结论IL-21基因联合吖射线照射对乳腺癌细胞的抑瘤作用具有协同效应，有效地抑制肿瘤细胞的生长。
- 王芹刘晓秋李进荣庆林宋力刘强张恒樊飞跃
- 关键词：基因白细胞介素21放射疗法基因疗法
- 人白细胞介素21基因重组复制缺陷型腺病毒的制备与鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备表达绿色荧光蛋白的含人白细胞介素21(IL-21)基因的重组复制缺陷型腺病毒,为IL-21基因治疗肿瘤的研究奠定基础。方法从人外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IL-21基因片段,PCR产物和pDC316-mCMV-EGFP载体分别经限制性内切酶NotI与HindIII双酶切,然后将酶切产物连接、转化,构建pDC316-IL21-EGFP重组质粒。重组质粒经酶切和测序鉴定后,与腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3CreF35共转染293细胞,包装产生Ad5F35-IL21-EGFP重组腺病毒,并测定病毒滴度。观察Ad5F35-IL21-EGFP腺病毒转染后食管癌细胞EC-9706的生长曲线和细胞周期的变化。结果 pDC316-IL21-EGFP重组质粒经酶切和测序证实,IL-21基因片段正确插入pDC316-mCMV-EGFP载体中且与GenBank中IL-21基因序列一致。Ad5F35-IL21-EGFP重组腺病毒载体在293细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,经鉴定有IL-21基因和绿色荧光蛋白的表达。测得Ad5F35-IL21-EGFP病毒颗粒滴度为9×1011VP/ml,感染性滴度为5×1010IU/ml。Ad5F35-IL21-EGFP转染后,EC-9706细胞的生长缓慢(P<0.05),G1期细胞增加,而G2期和S期细胞减少。结论成功制备了表达绿色荧光蛋白的人IL-21基因的重组腺病毒,且病毒滴度较高。腺病毒介导的外源性IL-21基因可有效转染EC-9706细胞,并对其生长有抑制作用。
- 王芹李进赵欣然宋力刘强岳井银樊飞跃
- 关键词：绿色荧光蛋白腺病毒基因治疗
- 抗辐射小鼠cDNA文库的全长cDNA功能鉴定
- 2013年
- 目的 鉴定IRM-2小鼠cDNA文库的全长cDNA功能.方法 以IRM-2小鼠的21条表达序列标签为引物进行PCR,从IRM-2小鼠全长cDNA文库中测定cDNA克隆的序列.观察小鼠胚胎成纤维细胞经6.5 Gy γ射线照射后全长cDNA的表达和全长cDNA转染对辐射敏感细胞共济失调性毛细血管扩张症（AT）5B1VA细胞生长的影响.结果 小鼠胚胎成纤维细胞经照射后,IRM-2小鼠4号、5号和2号cDNA表达水平均高于其亲本ICR小鼠和615小鼠.将全长cDNA转染AT5B1VA细胞,经照射后4号、5号和2号cDNA细胞存活率较高.结论 IRM-2小鼠4号、5号和2号全长cDNA具有较强的抗辐射功能.
- 王芹刘晓秋徐畅杜利清孙志娟王彦刘强宋力李进
- 关键词：寡核苷酸序列分析基因文库
- 辐射抗性小鼠与其亲代差异基因的表达序列标签被引量：4
- 2009年
- 目的寻找IRM-2小鼠体内存在的与辐射抗性相关的基因。方法提取IRM-2小鼠和其亲代小鼠脾细胞总RNA,利用mRNA差异显示技术挑选差异表达片段,对每一条差异带进行特异PCR扩增、克隆和测序。结果获得IRM-2小鼠独有而亲代小鼠均无的cDNA差异带75条,经测序获得52条差异cDNA序列。与GenBank基因库同源性比较,得到21条与小鼠已知基因不同源的表达序列标签(EST)。结论21条EST提示IRM-2小鼠体内可能存在辐射抗性相关基因,为进一步分离和鉴定辐射抗性相关基因奠定了基础。
- 王芹岳井银李进宋力刘强穆传杰吴红英
- 关键词：辐射抗性MRNA差异显示表达序列标签
