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席娜
作品数:
4
被引量:11
H指数:2
供职机构:
吉林农业大学动物科学技术学院
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发文基金:
中国博士后科学基金
公益性行业(农业)科研专项
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相关领域:
农业科学
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合作作者
吴东来
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
杨涛
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
刘二战
吉林农业大学动物科学技术学院
孙恩成
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
徐青元
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所...
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作者
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席娜
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吴东来
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杨涛
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蓝舌病病毒VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位的初步鉴定
被引量:3
2014年
为鉴定蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb)所识别的VP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位,本研究采用噬菌体展示技术对BTVVP7蛋白构象抗原表位氨基酸进行筛选,通过质粒定点突变技术对编码筛选获得的氨基酸区域的基因进行突变,同时利用ELISA法验证该氨基酸区域突变后对BTVvP7蛋白抗原性的影响。结果表明被BTVMAb4H7所识别的BTVVP7蛋白竞争抑制群特异性构象抗原表位由175FQG177、185YL186和278WH279组成,其中aal75~aal77和aal85~aal86为该抗原表位的关键性氨基酸,本研究初步阐明了BTvVP7蛋白竞争抑制特异性的分子基础,对VP7蛋白功能研究和建立BTV群特异性检测方法具有重要意义。
魏天
徐青元
耿宏伟
冯瑜菲
杨涛
孙恩成
席娜
刘二战
钱爱东
邸英华
吴东来
关键词:
蓝舌病病毒
VP7蛋白
蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定
被引量:8
2014年
为制备蓝舌病病毒03TV)8型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)TL鉴定其抗原表位,本研究采用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白免疫BALB/c小鼠,三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,并以纯化的重组VP2蛋白为包被抗原,通过间接ELISA筛选出两株能够稳定分泌抗BTV8VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株(2G4和387)。间接免疫荧光结果表明:2G4和387与BTV8均呈阳性反应,与BTV1~7、BTV9-24、茨城病毒、中山病毒以及赤羽病毒均呈阴性反应。Westernblot结果显示,2G4和387均能够识别BTV8及BTV8重组VP2蛋白。Ig亚类鉴定2G4和387均为IgG1/κ链。利用原核表达的96条覆盖VP2全长的麦芽糖结合蛋白(MBP)融合短肽对MAbs的抗原表位进行鉴定,结果表明:MAb2G4识别的抗原表位为捌LCRLLSTIGRKMCNTE^296。本研究结果为BTV8型特异性检测方法的建立及VP2蛋白结构和功能的研究奠定了基础。
席娜
赵国辉
孙恩成
秦永丽
孙亮
魏天
徐青元
杨涛
孙晶
刘二战
钱爱东
吴东来
关键词:
VP2蛋白
真核表达
单克隆抗体
抗原表位
西尼罗病毒NS1与E基因重组腺病毒的构建及免疫原性研究
被引量:1
2014年
为构建串联表达西尼罗病毒(WNV)NS1和E基因的重组腺病毒,本研究利用口蹄疫病毒具有自我切割功能的2A蛋白的编码序列将NS1和E基因串联,构建穿梭载体p Shuttle-WNV-NS1-2A-E,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,经脂质体转染AD293细胞,在细胞内完成病毒粒子的组装制备重组腺病毒。通过间接免疫荧光和western blot检测表明:重组腺病毒中的外源基因表达的融合蛋白NS1-2A-E可以自我裂解为NS1和E蛋白。将构建的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明该重组病毒可以诱导机体产生良好的体液免疫应答。本实验为WNV重组腺病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。
刘二战
赵国辉
孙恩成
崔焕忠
杨涛
徐青元
孙晶
孙亮
席娜
魏天
吴东来
关键词:
西尼罗病毒
NS1
重组腺病毒
体液免疫
蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测
目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BT...
席娜
王文世
冯瑜菲
李俊平
吴东来
孙恩成
孙亮
魏天
杨涛
徐青元
刘二战
孙晶
魏鹏
关键词:
动物医学
蓝舌病病毒
重组蛋白
真核表达
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