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慢病毒介导的CAV1过表达对HL-60细胞增殖与凋亡的影响被引量：2: 2013年; 本研究旨在探讨慢病毒介导的CAV1过表达对HL-60细胞增殖与凋亡的影响。构建慢病毒重组表达载体pcDNA-EF1-CAV1,并与pPACK包装质粒混合物共转染至293TN细胞后,收集病毒液感染HL-60细胞,使CAV1基因在细胞中稳定转染并高表达。采用Western blot方法评价转染后HL-60 CAV1蛋白表达情况。采用CCK-8法、流式细胞术分别检测转染前后HL-60细胞的增殖活性和凋亡情况。结果表明:PCR阳性克隆筛选及核苷酸测序结果证实CAV1基因正确插入表达载体pcDNA-EF1-GFP中。重组慢病毒颗粒Lv-CAV1成功转染HL-60细胞,转染率达90%。Western blot检测结果显示,转染后48 h HL-60细胞中CAV1蛋白表达明显增高。CCK-8检测结果显示转染后48 h HL-60细胞增殖活性降低(P<0.05),流式细胞仪检测结果显示转染后HL-60细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:CAV1过表达对HL-60细胞具有抑制细胞的增殖活性、促进细胞凋亡的作用。; 马微王迪迪王昭朱贵明张鹏霞; 关键词：HL-60 慢病毒细胞增殖

黄芪甲甙对衰老HELF细胞端粒酶活性及klotho表达的影响被引量：8: 2010年; 目的探讨黄芪甲甙对衰老人胚肺成纤维细胞(HELF)端粒酶活性及抗衰老基因klotho mRNA表达的影响。方法体外培养HELF,实验组从50代开始加入黄芪甲甙,倒置显微镜观察细胞形态,MTT方法检查细胞活力,Dimiri氏法检测β-半乳糖苷酶活性,TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测klotho mRNA表达。结果与青年组比较:衰老组细胞活力和klotho mRNA表达均降低(P<0.01)、β-半乳糖苷酶活性升高(P<0.01);与衰老组相比:黄芪甲甙可降低β-半乳糖苷酶活性(P<0.01)、提高细胞活力、端粒酶活性和klotho mRNA表达(P<0.01)。结论黄芪甲甙可以通过改变细胞端粒酶活性、klotho基因的表达而发挥其抗HELF细胞衰老的作用。; 郭蕾魏晓东欧芹王昭朱贵明; 关键词：黄芪甲甙端粒酶 KLOTHO

Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡被引量：4: 2012年; 目的研究白花败酱草总皂苷对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其机制。方法采用MTT法观察白花败酱草水提液和总皂苷对Hela细胞生长增殖的抑制作用;光镜和透射电镜观察总皂苷和水提物诱导Hela细胞发生凋亡的情况;观察总皂苷和水提物对Hela细胞半胱天冬酶(Caspase-3)活性的影响。结果白花败酱草总皂苷在体外剂量依赖性地抑制Hela细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,并通过对凋亡关键酶Caspase-3的激活,实现其促进Hela细胞凋亡的作用,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。结论 Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡的作用。; 张涛田黎明朱贵明任继秋张宇田丽华; 关键词：白花败酱草皂苷细胞凋亡 CASPASE-3

RPL30基因哺乳动物表达载体的构建及其初步表达分析被引量：1: 2012年; 目的克隆RPL30基因并构建其哺乳动物表达载体,然后将该基因导入人肝癌细胞系HepG2进行初步表达分析,并考察RPL30的超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。方法应用RT-PCR方法扩增出目的基因的全长编码区,并利用双酶切连接法将其连入哺乳动物表达载体pcDNA3.1(+)。采用脂质体转染法转染HepG2细胞后应用RT-PCR法检测RPL30基因的表达以及其超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。同时在转染细胞中添加无机硒后研究其对RPL30和硒蛋白P基因转录水平的调控。结果成功地构建了RPL30表达质粒pcDNA3.1-RPL30,转染HepG2细胞后实现基因的超表达,相对于GFP对照转染细胞增加了4～5倍。然而,RPL30基因的超表达并没有显著提高硒蛋白P的转录水平。硒对RPL30基因的表达基本上没有影响,但却显著提高硒蛋白P的表达水平。结论 RPL30哺乳动物表达载体的成功构建以及RPL30超表达后的初步分析为下一步深入研究硒蛋白的生物合成机制打下了基础。; 李丽朱贵明汪坤福张鹏霞; 关键词：克隆硒蛋白P

大鼠代谢笼: 本实用新型提供一种大鼠代谢笼，由鼠笼、接粪器、接尿器、上层滤网、下层滤网和把手组成，鼠笼与接粪器连接，接粪器与接尿器连接，鼠笼与接粪器之间设置有上层滤网，接粪器与接尿器之间设置有下层滤网，接粪器和接尿器上均设置有把手。本...; 鲁彦朱贵明葛堂栋苗智王长平祝丽玲王辰囡; 文献传递

KLK7蛋白及E-钙黏蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义被引量：7: 2013年; 目的:本实验通过研究E-钙黏蛋白及KLK7蛋白在子宫内膜癌中的表达,探讨其表达与子宫内膜癌的关系及临床意义。方法:将实验分为3组:16例增生期子宫内膜为正常组,30例不典型增生子宫内膜,35例子宫内膜癌,应用免疫组化SP染色方法检测E-Cad蛋白及KLK7蛋白在子宫内膜癌的表达及两者的关系。结果:与正常组比较,KLK7蛋白在不典型增生内膜及子宫内膜癌中的表达逐渐增高(P<0.05)。E-cad蛋白在不典型增生内膜及子宫内膜癌中的表达逐渐降低(P<0.05)。结论:通过本实验研究可知:KLK7蛋白和E-cad蛋白在子宫内膜癌的表达呈夫相关性,与子宫内膜癌的发生,发展密切相关,并为临床诊断及预后提出理论基础。; 佟丽波王晶王春敏朱贵明姚海涛卢北燕佟秀凤张燕; 关键词：子宫内膜癌 E-钙黏蛋白免疫组化

家蝇抗菌肽基因MAF-1的表达模式及响应微生物刺激分析: 2021年; Musca domestica antifungal peptide-1(MAF-1)是家蝇体(Musca domestica)内组成型表达的一种独特且具有良好抑菌效果的抗真菌肽。本研究利用实时荧光定量PCR技术分析MAF-1在家蝇不同发育时期、不同组织器官及家蝇3龄幼虫经微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌)刺激后的表达特征。结果显示,MAF-1在家蝇各个发育时期的相对表达量依次为:2龄幼虫>1龄幼虫>3龄幼虫>雄蝇成虫>卵>雌蝇成虫>蛹;MAF-1在家蝇3龄幼虫各组织器官的相对表达量依次为:脂肪体>唾液腺>气管>肠道>体壁。通过超微量显微注射法向家蝇3龄幼虫体内注入病原微生物,其中金黄色葡萄球菌刺激后MAF-1的表达量呈下降趋势;大肠杆菌刺激后MAF-1的表达量先降低后升高再降低;白色念珠菌刺激后MAF-1的表达量先升高然后逐渐下降。本研究从RNA水平上说明了MAF-1的表达随着家蝇幼虫的生长发育阶段变化,对不同微生物刺激的响应具有不同的特征。同时MAF-1还是家蝇抵抗病原微生物感染的重要天然免疫分子,这为进一步研究其参与家蝇天然免疫防御过程提供了基础。; 姚杨王兵王兵宋朝蓉万珊万珊朱贵明; 关键词：家蝇抗菌肽

原核表达家蝇Phormicin蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌活性分析被引量：1: 2020年; 家蝇Phormicin是一类具有广普抗菌活性的抗菌肽,属于防御素家族。本研究采用原核表达法纯化并获得家蝇Phormicin A、Phormicin B蛋白,将其作用于金黄色葡萄球菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为0.625 mmol/L和0.469 mmol/L。进一步绘制了二者对金黄色葡萄球菌的时间杀菌曲线,并利用牛津杯法进一步验证了二者的抗菌效果。结果显示,二者对金黄色葡萄球菌都具有一定的抑菌效果。本研究为进一步探索Phormicin在家蝇天然免疫和防御中的机制提供理论参考。; 王兵杜兵韦鹏威黄伟康姚杨伍仕梅万珊万珊朱贵明; 关键词：抗菌肽家蝇

脂肪酸合成酶系多基因表达载体的构建被引量：3: 2013年; 目的利用独立表达盒法构建脂肪酸去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体进一步研究多基因表达载体中各个基因表达的相互影响。方法利用基因工程的方法扩增2个脂肪酸去饱和酶基因和2个延长酶基因,然后连接到pcDNA3.1(-)哺乳动物表达载体上,之后转化、筛选、酶切鉴定。最后脂质体法瞬时转染HK293T细胞,提取RNA检测这四个基因的表达情况。结果成功构建了含脂肪去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体pcDNA3.1-EF,并在HK293T细胞中成功表达。结论四基因表达载体pcDNA3.1-EF在HK293T细胞中成功表达,单个基因在表达载体中的次序对基因的表达没有明显影响。; 汪坤福朱贵明张莉张涛荆鑫鑫江旭东王明富; 关键词：多不饱和脂肪酸多基因表达载体脂肪酸去饱和酶

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响被引量：6: 2013年; 目的研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt表达的影响。方法 OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt的mRNA表达。结果 OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt的mRNA表达下调(P<0.01)。结论 OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt的表达有关。; 王迪迪朱贵明张鹏霞; 关键词：齐墩果酸 HL-60 PI3K AKT

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朱贵明

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