李焕改
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：东京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- Gateway技术快速构建百合双价抗病毒RNAi表达载体被引量：6
- 2011年
- 为获得适合转化百合的双价RNAi表达载体,以感病百合叶片的总RNA为模板,分别扩增400bp左右的LSV和LMoVCP基因。通过重叠延伸PCR技术获得长约800bp的LSV-LMoV融合基因。利用Gateway技术,通过BP反应及LR反应将LSV-LMoV融合基因克隆到双元载体pH7GWIWG2(Ⅱ),成功构建了含2种病毒基因的RNAi表达载体pH7GWIWG2(Ⅱ)-LSV-LMoV。将构建好的双价表达载体导入农杆菌EHA105,PCR和测序表明所构建的载体及获得的工程菌与预期的完全一致。
- 徐品三白建芳刘纪文李焕改
- 关键词：百合无症病毒百合斑驳病毒RNAI载体重叠延伸PCRGATEWAY技术
- 百合主要病毒基因组的克隆及感病生理研究
- 百合病毒病导致切花品质低下、种球退化严重,给百合种植业带来严重的危害,目前已成为急待解决的世界性难题。本研究通过设计交叉重叠引物,获得LSV和LMoV全基因组序列,利用生物信息学手段对病毒序列进行分析;对CMV和LMoV...
- 李焕改
- 文献传递
- 百合斑驳病毒大连分离物基因组全序列测定及其分析被引量：6
- 2013年
- 根据GenBank上已登录的百合斑驳病毒(LMoV)基因组序列设计7对交叉重叠的引物,利用RT-PCR技术对铁炮百合白天堂进行检测,并经克隆测序获得百合斑驳病毒大连分离物(LMoV-DL)基因组全序列。序列分析表明:LMoV基因组由长度为9 648 bp的线状单链正义RNA组成,包括一个poly(A)尾巴,编码一个由3 096个氨基酸组成的分子量为351 kDa的多聚蛋白。同时多聚蛋白系统发育分析说明LMoV隶属于Potyvirus属一个较大的分支,在进化关系上与BYMV和ClYVV最近。
- 徐品三孙冰轮姜旭李焕改
- 关键词：百合斑驳病毒RT-PCR基因序列系统发育分析
- 百合无症病毒大连分离物全基因组克隆及其序列分析被引量：3
- 2012年
- 百合无症病毒（Lily symptomless virus，LSV）属于香石竹潜隐病毒属（Carlavirus），是严重影响百合生长的主要病毒之一。LSV由美国Brierley和Smith首次从俄勒冈州带有坏死斑点的百合中分离得到。此后，在世界各地均有报道，我国江南、江北以及东北各地也有发生。LSV不会引起百合植株产生明显症状，但会使鳞茎变小，严重退化。
- 徐品三吕文霞夏秀英李焕改贾娟
- 关键词：百合无症病毒全基因组克隆分离物VIRUSSMITH潜隐病毒
