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角蛋白18在33和52位丝氨酸磷酸化水平的变化及与肝纤维化的关系被引量：1: 2015年; 目的探讨角蛋白18(keratin18,K18)在33和52位丝氨酸(Ser)磷酸化水平变化的作用及其与肝纤维化的关系。方法 6周龄Balb/C小鼠30只,分为3组(对照组和2个实验组),每组10只。对照组腹腔内注射橄榄油;实验组腹腔内注射四氯化碳(CCl4)和橄榄油的混合液(1∶9),10 ml/kg,每周2次,连续4周,分别在2周和4周处死小鼠。应用组织化学免疫荧光法检测正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织中K18及其磷酸化Ser33和Ser52的表达及其相对亚细胞定位;免疫印迹法(Western blotting)检测正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织的K18及其磷酸化Ser33和Ser52水平。结果组织化学免疫荧光结果显示,K18在正常对照小鼠和肝纤维化小鼠肝组织中均有表达,但在小鼠肝纤维化不同阶段无明显差异;在正常对照小鼠肝组织中表达比较弱,而随着肝纤维化的进展表达增强。West-ern blotting结果,肝纤维化小鼠肝组织中的Ser33和Ser52磷酸化的K18表达水平显著增加,尤其是Ser33表达增加更为明显。; 常远王珊珊欧阳雅博寇卜心陈德喜林明华; 关键词：肝纤维化

ASPP2在人肝星状细胞活化中的作用被引量：1: 2015年; 目的探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis-stimulating protein of p53-2,ASPP2)对人肝星状细胞活化的调节作用及机制。方法人永生的肝星状细胞系LX-2在孵箱中培养,转染ASPP2腺病毒和单荧光自噬指示体系(GFP-LC3)质粒,免疫印迹法检测ASPP2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、自噬基因表达相关蛋白(Beclin-1)的表达水平。免疫荧光检测,LX-2细胞共转染ASPP2腺病毒和GFP-LC3质粒后,ASPP2过表达对LX-2细胞自噬的影响,M30染色检测ASPP2过表达对LX-2细胞凋亡的影响。结果转染ASPP2腺病毒后LX-2细胞内ASPP2蛋白表达明显增加;与转染对照空载腺病毒的LX-2细胞相比,转染ASPP2腺病毒的LX-2细胞自噬和α-SMA的表达明显减少,肝星状细胞的活化受到抑制;转染ASPP2腺病毒后LX-2细胞的凋亡水平增加明显。结论 ASPP2过表达在体外具有抑制肝星状细胞活化的作用。; 常远林明华欧阳雅博王珊珊寇卜心刘芳陈德喜; 关键词：肝星状细胞自噬

抗Procollagena1(Ⅲ)单克隆抗体的制备和实验研究: 2014年; 肝纤维化和肝硬化是肝脏损伤后的修复反应,其病理特征主要表现为细胞外基质的过度沉积,Ⅲ型前胶原蛋白[procollagen a1（Ⅲ）,cola1（Ⅲ）]是细胞外基质的主要成分。通过检测血液或肝组织的表达量的变化可以观察肝纤维化及肝硬化的进展情况,指导临床诊疗和基础研究工作。因此,制备cola1（Ⅲ）单克隆抗体（mAb）对于肝纤维化和肝硬化的特异性检测具有重要意义。我们于2012年9月至2013年9月应用小鼠淋巴细胞杂交瘤技术．制备2株抗colal（Ⅲ）分子不同表位的单克隆抗体（mAb），报告如下。; 常远郑荣领刘道洁陈德喜林明华; 关键词：单克隆抗体肝纤维化细胞外基质肝脏损伤

慢性乙型肝炎及肝硬化患者血清血管生成素1、2及其比值变化与HBV DNA和ALT的相关性分析: 2024年; 目的分析血清血管生成素(Ang)1、2及其比值变化与慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化患者HBV DNA和ALT的相关性。方法选取2018年3月—2019年10月首都医科大学附属北京佑安医院收治的CHB患者99例,肝硬化患者59例,收集临床资料和血清标本;另选同期46例健康体检者作为对照组。所有患者均采用PCR法检测血清HBV DNA;采用酶联免疫吸附法检测血清Ang-1和Ang-2水平,比较各组血清Ang-1和Ang-2及Ang-1/Ang-2的差异。非正态分布的计量资料多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Bonferroni法;采用Spearman方法分析Ang-1、Ang-2、Ang-1/Ang-2与HBV DNA、ALT的相关性。结果与对照组(671.0 pg/mL)相比,CHB组(479.0 pg/mL)和肝硬化组(208.4 pg/mL)Ang-1水平显著降低(P值均<0.05);与CHB组相比,肝硬化组Ang-1水平显著降低(P<0.001)。与对照组(198.0 pg/mL)相比,CHB组(286.1 pg/mL)和肝硬化组(438.4 pg/mL)Ang-2水平显著升高(P值均<0.001);与CHB组相比,肝硬化组Ang-2水平显著升高(P<0.001)。与对照组(3.4)相比,CHB组(1.6)和肝硬化组(0.5)Ang-1/Ang-2比值显著降低(P值均<0.001);与CHB组相比,肝硬化组Ang-1/Ang-2比值显著降低(P<0.001)。Spearman分析显示,CHB组Ang-1与HBV DNA及ALT均呈负相关(r值分别为−0.400、−0.394,P值均˂0.001);Ang-2与HBV DNA及ALT均呈正相关(r值分别为0.365、0.351,P值均˂0.001);Ang-1/Ang-2与HBV DNA及ALT均呈负相关(r值分别为−0.463、−0.473,P值均˂0.001);而肝硬化组Ang-1、Ang-2及Ang-1/Ang-2均与HBV DNA和ALT无相关性(P值均˃0.05)。结论CHB、肝硬化患者血清Ang-1、Ang-2及Ang-1/Ang-2有显著改变,其中肝炎组Ang-1、Ang-2及Ang-1/Ang-2在一定程度上反映CHB患者肝损伤的程度。; 林明华常远刘芳黄雁翔徐航飞; 关键词：血管生成素1 血管生成素2 肝硬化丙氨酸转氨酶

血管生成在肝纤维化中的研究进展被引量：1: 2014年; 血管生成是指在原有的血管结构基础上，内皮细胞以出芽方式，伴随内皮细胞的迁移、扩增、管腔化，形成新的血管的过程。血管生成可分为生理性和病理性两类，病理性血管生成见于以广泛、持续的炎症坏死和纤维化为特征的各种慢性肝脏疾病，包括：慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、自身免疫性肝炎和原发性胆汁性肝硬化。新血管的形成与不同病因引起的慢性肝病纤维化发展模式紧密相关[1]，最终导致肝硬化组织异常血管结构的逐步形成。因此，在现代疾病进展的评价和治疗靶点的研究中，纤维化和血管生成的关系至关重要[2]。血管生成的程度可能会对疾病是否进展到肝硬化产生重要影响，并且是决定纤维化可否逆转的关键因素。; 林明华石英谢放刘道洁陈德喜; 关键词：肝纤维化原发性胆汁性肝硬化慢性肝脏疾病自身免疫性肝炎慢性丙型肝炎

表达谱基因芯片筛选肝癌细胞中ATRA下游基因的应用研究被引量：1: 2016年; 目的全反式维甲酸(All Trans-Retinoic acid,ATRA)处理肝癌细胞系HepG2细胞后进行表达谱基因芯片技术分析,探索其对肝癌细胞基因表达谱的影响。方法 80μmol/L的全反式维甲酸处理HepG2细胞24 h后,提取细胞的mRNA,应用基因表达谱芯片技术对差异表达的mRNA进行检测和分析,以等体积无水乙醇处理作为对照组。结果全反式维甲酸处理HepG2细胞后,共筛选出661个差异表达基因,这些差异基因与肿瘤细胞的信号转导、增殖分化等都有密切的关系。结论成功的应用表达谱芯片技术筛选出ATRA处理细胞后的差异表达基因,为进一步探讨ATRA对肝癌细胞的作用机制奠定了基础,也为临床应用ATRA诱导肝癌分化提供理论依据。; 王珊珊林明华欧阳雅博乔录新陈德喜李刚; 关键词：全反式维甲酸基因芯片

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林明华

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