林清芳
- 作品数:6 被引量:43H指数:3
- 供职机构:内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项内蒙古自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 沙冬青细胞与分子生物学研究进展被引量:25
- 2010年
- 沙冬青是我国西北荒漠区唯一的常绿阔叶灌木,具有极强的抗逆性和特殊的医疗保健作用。本文从细胞学与遗传多样性、抗逆性分子基础与基因克隆和药用成分及作用机制方面对沙冬青的研究进展进行了综述,并提出了今后的重点研究方向。
- 林清芳王茅雁刘佳杰赵欢欢王存芳
- 关键词:沙冬青抗逆基因药用成分
- 蒙古沙冬青干旱诱导表达SMART cDNA文库的构建及序列分析
- 沙冬青是我国西北荒漠区特有的唯一常绿早生阔叶灌木,具有很强的抗寒和抗旱等抗逆特性。目前对于沙冬青抗逆性分子机理和抗逆基因的分离鉴定集中于抗寒性方面,有关其抗旱基因的分离和鉴定尚未见报道。本论文以蒙古沙冬青(Ammopip...
- 林清芳
- 关键词:沙冬青干旱胁迫
- 文献传递
- 玉米ZmCBL6基因的克隆及其植物表达载体构建被引量:3
- 2009年
- 类钙调磷酸酶B蛋白(calcineurin B-like proteins,CBLs)是植物中1类重要的Ca2+结合蛋白,由其所介导的Ca2+信号途径广泛参与植物对多种非生物胁迫和某些生长发育信号的应答反应。本论文以水稻OsCBL6序列在GenBank数据库进行TBLASTN查询,获得其在玉米中推测的同源基因ZmCBL6的全长cDNA序列,然后用RT-PCR方法对ZmCBL6基因的编码框cDNA进行了克隆,用生物信息学方法对其编码蛋白的功能域、系统进化和亚细胞定位等进行了分析,并构建了其植物表达载体,为进一步研究其亚细胞定位和通过转基因植物等验证其功能奠定了基础。
- 高大中林清芳王存芳魏建民王茅雁
- 关键词:玉米CBL基因克隆
- 蒙古沙冬青总RNA提取与mRNA分离方法的研究被引量:10
- 2011年
- 蒙古沙冬青是分布于我国西北荒漠区的常绿旱生阔叶灌木,因其富含多糖和多酚等次生代谢物质,用常规RNA提取方法难以从中获得高质量总RNA。本研究通过在热酚法的RNA提取液中加入高浓度的KAc和β-巯基乙醇,从该植物的不同样品中提取到高质量总RNA,并用筛选到的合适试剂盒分离到高纯度的mRNA。所得到的总RNA和mRNA已被成功应用于基因克隆和SMART全长cDNA文库的构建。
- 林清芳王存芳赵欢欢刘佳杰王茅雁
- 关键词:总RNA提取
- 蒙古沙冬青冷冻胁迫SMART cDNA文库的构建及序列分析被引量:11
- 2011年
- 以强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)为材料,用SMART技术构建了其在冷冻胁迫下的全长cD-NA文库。原始文库滴度为9.44×106pfu/ml,重组率为98.3%,插入片段长度在0.5~2.5kb,平均达到1kb。扩增文库滴度为1.98×1010pfu/ml。从原始文库中随机挑取480个阳性克隆进行序列分析,获得348个Unigene,其中有些是逆境应答相关基因和新基因。此外,以扩增文库为模板,经PCR方法克隆到读码框为1083bp的沙冬青类RD22基因。结果表明所建文库质量较高,可以满足后续研究的要求。
- 刘佳杰林清芳李连国白薇王茅雁
- 关键词:沙冬青CDNA文库
- 蒙古沙冬青干旱胁迫全长cDNA文库构建及序列分析被引量:3
- 2012年
- 为了规模化分离强抗逆植物蒙古沙冬青Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.)Cheng f.的抗旱基因并探讨其抗旱性分子机理,用SMART(Switching mechanism at 5′-end of RNA transcript)技术构建了其在干旱胁迫下的全长cDNA文库。原始文库滴度为1.6×107PFU/mL,重组率为97.7%,插入片段长度多数接近和超过1 kb。对3 000个阳性克隆进行了5′端测序和序列分析,共获得1 450条Unigene序列。在Nt、Nr和Swissprot等数据库中进行Blast搜索,结果有919条(占63.4%)与已知或推测功能的基因具有同源性,其余531条(占36.6%)为功能未知的新基因。将Unigene进行Gene Ontology(GO)功能分类,其中与生理过程、细胞过程、结合、催化活性和细胞组分相关的基因所占比例较高,其次是与细胞器、蛋白复合体、运输和结构分子活性相关的基因,与刺激应答、基因表达调节、生理生化调节和信号转导相关的基因也占相当比例。许多有功能注释的Unigene属于抗逆相关基因,用半定量RT-PCR方法分析其中6个基因的表达变化,证明其均参与对干旱胁迫的应答反应。为进一步开展表达谱分析和克隆、鉴定抗旱基因奠定了基础。
- 林清芳王学峰李记园赵鸿彬王茅雁
- 关键词:沙冬青干旱CDNA文库