柯文
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：十堰市太和医院更多>>
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- 过表达性别决定区Y框蛋白7基因对骨肉瘤细胞生长及免疫逃逸相关因子表达的影响
- 2021年
- 目的:探讨过表达性别决定区Y框蛋白7(SOX7)基因对骨肉瘤MG-63细胞活力、周期、凋亡、Wnt/β-catenin信号及免疫逃逸相关VEGF和TGF-β1表达的影响。方法:将人骨肉瘤MG-63细胞分为空白组、pcDNA3.1组和pcDNA3.1-SOX7组,pcDNA3.1转染参照Lipofectamine 2000试剂盒说明书。通过CCK-8法检测pcDNA3.1-SOX7转染MG-63细胞24~72 h的细胞活力;流式细胞仪检测pcDNA3.1-SOX7转染MG-63细胞48 h的细胞周期和凋亡率。Western Blot检测SOX7、β-catenin、cyclinD1、Survivin、VEGF和TGF-β1蛋白表达。结果:pcDNA3.1-SOX7转染MG-63细胞后,细胞中SOX7蛋白表达明显高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,pcDNA3.1-SOX7组细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,G_(0)/G_(1)期细胞百分比明显升高,G_(2)/M期和S期百分比明显降低,β-catenin、CyclinD1、Survivin、VEGF和TGF-β1蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:过表达SOX7基因可抑制骨肉瘤MG-63细胞活力,阻碍细胞周期进程,诱导细胞凋亡,抑制免疫逃逸相关VEGF和TGF-β1表达,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
- 于云祥龚泰芳刘小涛柯文李彬彬廉凯徐进
- 关键词：骨肉瘤免疫逃逸
- 转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2 shRNA的人骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡能力观察被引量：1
- 2020年
- 目的观察转染三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)shRNA的骨肉瘤细胞株U2-OS增殖、凋亡的变化。方法以qRT-PCR法和Western blotting法分别检测人骨肉瘤细胞(U2-OS、MG-63、SaOS-2)和人正常成骨细胞(h FOB1.19)中ATAD2 mRNA、蛋白。在U2-OS细胞中转染ATAD2 shRNA慢病毒载体,采用qRT-PCR法和Western blotting法检测转染效果,CCK8方法检测细胞增殖变化,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数目,碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期,膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/PI双染法检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-Caspase-3)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(C-Caspase-9)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白。结果骨肉瘤细胞中ATAD2 mRNA、蛋白表达水平高于正常成骨细胞(P均<0.05)。ATAD2 shRNA慢病毒载体转染后的骨肉瘤细胞中ATAD2表达水平下降(P<0.05)。转染ATAD2 shRNA后的骨肉瘤细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达升高,CDK2、CyclinD1蛋白表达降低(P均<0.05)。结论转染ATAD2 shRNA可抑制U2-OS细胞增殖,并诱导细胞凋亡。
- 于云祥龚泰芳刘小涛柯文李彬彬
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖能力
- Rigidfix系统固定重建前交叉韧带的疗效比较
- 2011年
- 目的探讨关节镜下应用Rigidfix系统及挤压螺钉固定重建前交叉韧带(ACL)的临床效果及自体与同种异体肌腱重建的疗效比较。方法 2005年7月～2008年5月对该院共42例关节镜下确诊的ACL断裂的患者行双骨道单束自体肌腱或同种异体肌腱韧带重建治疗,应用Rigidfix系统及挤压螺钉对重建韧带进行固定,术后完成相关随访,随访主要包括关节活动度,膝关节查体,MRI影象等,功能评定采用Lysholm评分系统。结果所有患者随访1.5～4.0年,平均2.8年。其中1例出现术后感染的患者膝关节屈曲受限外,余患者末次随访所有膝关节伸-3°～0°,屈110°～130°,2例患者前抽屉试验、Lachman试验为阳性,Lysholm评分由术前(34.6±4.36)分提高至术后(89.4±5.42)分。采用自体肌腱重建患者Lysholm评分由术前(32.4±6.95)分提高至术后(91.3±5.51)分,同种异体肌腱重建患者由术前(35.6±4.49)分提高至术后(90.2±6.32)分,两组患者功能比较差异无显著性(P>0.05)。结论关节镜下应用Rigidfix系统及挤压螺钉固定自体及同种异体肌腱重建前交叉韧带均可获得较为满意的临床疗效。
- 柯文肖骏
- 关键词：前交叉韧带同种异体自体
- 改良股骨近端锁定钢板治疗老年A2型股骨转子间骨折的疗效分析被引量：5
- 2015年
- 目的分析改良股骨近端锁定钢板治疗老年A2型股骨转子间骨折的疗效。方法 2012年2月~2013年7月间收治76例股骨转子间骨折患者,符合研究入选标准40例,随机分成两组,研究组和对照组,研究组给予改良股骨近端锁定钢板内固定治疗,对照组给予普通股骨近端锁定钢板内固定治疗。以Harris髋关节评分标准评价疗效及对疗效进行统计学分析。结果 40例患者均获随访,平均10.5月(5~18月),研究组Haris评分(89±7.24)分,对照组Haris评分(76±6.84)分,=5.837,<0.01。结论对于老年A2型股骨转子间骨折,改良股骨近端锁定钢板与普通股骨近端锁定钢板相比,能够有效增加固定的可靠性,降低并发症的发生率,疗效满意。
- 刘小涛龚泰芳孙景东柯文
- 关键词：股骨转子间骨折股骨近端锁定钢板老年
- 微小RNA-335-3p靶向小鼠双微体基因调控骨髓瘤细胞的增殖和凋亡
- 2021年
- 目的探讨微小RNA(miR)-335-3p对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法2018年5月至2019年1月,培养正常骨髓细胞MNC和骨髓瘤细胞KM3和U266,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-335-3p表达水平。将KM3细胞分为miR-NC组(转染模拟对照序列)、miR-335-3p组[转染miR-335-3p模拟物(miR-335-3p mimics)]、pcDNA3.1+miR-335-3p组(共转染空载体和miR-335-3p mimics)和pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组[共转染小鼠双微体基因(MDM2)过表达载体和miR-335-3p mimics],MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证KM3细胞中miR-335-3p与MDM2调控关系。结果骨髓瘤细胞KM3和U266中miR-335-3p表达水平分别为0.24±0.01、0.38±0.02,显著低于正常骨髓细胞MNC中的miR-335-3p表达水平0.77±0.03(均P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.60±0.03)比(0.99±0.06);72 h:(0.82±0.05)比(1.67±0.07)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均降低(均P<0.05),细胞凋亡率[(24.31±0.99)%比(8.13±0.83)%]、细胞中P21和Bax蛋白表达均升高(均P<0.05)。miR-335-3p在KM3细胞中负调控MDM2表达。与pcDNA3.1+miR-335-3p组比较,pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.80±0.05)比(0.63±0.04);72 h:(1.28±0.06)比(0.88±0.05)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05),凋亡率[(15.34±0.66)%比(23.98±1.41)%]、细胞中P21、Bax蛋白表达均降低(均P<0.05)。结论miR-335-3p可能通过下调MDM2表达抑制骨髓瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。
- 于云祥龚泰芳刘小涛柯文李彬彬
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞增殖细胞凋亡
