肖小珺 作品数:25 被引量:136 H指数:5 供职机构: 扬州大学动物科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
鸡胚原始生殖细胞诱导分化为神经元样细胞的研究 被引量:1 2005年 Primordial germ cells(PGCs) isolated from gonads of stage 19 by Ficoll density gradient centrifugation were cultured in DMEM medium in vitro.Then the second passage PGCs were induced to differentiate into neuron-like cells by different induction media.Specific markers and structures were detected by histochemistry method.The results showed that induction medium RA and IBMX were the best ways to induce PGCs into neuron-like cells,and almost 80%-85% cells exhibited typical neuron-like phenotype after induction.Special Nissl body was found by histochemistry.The effect of induction medium RA+IBMS,RA+BHA+DMSO and RA+BHA+DMSO+IBMX were better than that of induction medium BHA+DMSO.Under the same induction medium,about 80%-85% neuron-like cells could be detected no matter what PGCs were cultured 24 h,48h or 72 h in vitro. 蔡琳琳 秦洁 李碧春 肖小珺 陈国宏 吴信生 吴圣龙关键词:原始生殖细胞 分化 神经元样细胞 第二十八期鸡胚原始生殖细胞的冷冻保存 被引量:1 2003年 采用Ficoll密度梯度离心 ,提取第 2 8期 (孵化 13 2h)性腺中的PGCs ,对其应用不同的冷冻保护剂和不同的平衡方法进行冷冻保存 ,并于复苏后进行体外培养。复苏后的PGCs用台盼蓝染色检测其存活率 ,结果发现 :从第 2 8期性腺中获取的PGCs在同一种冷冻保护液下 ,采用不同的平衡方法进行冷冻 ,对PGCs的存活率有显著影响 (P <0 .0 5 ) ;平衡方法相同 ,在不同冷冻保护液条件下 ,冷冻保护液III的冻存效果最好 ,与其他保护液之间存在显著 (P <0 .0 5 )或极显著 (P <0 .0 1)差异。冷冻保护液V和冷冻保护液VI二者对PGCs的冻存效果次之。冷冻保护液I、冷冻保护液II和冷冻保护液IV三者对PGCs的冻存效果最差。PGCs经体外培养 2 4小时后再进行冷冻保存 ,复苏后其存活率、体外培养存活时间均极 (P <0 .0 1)显著短于分离后直接冷冻的PGCs。 肖小珺 秦洁 李碧春关键词:原始生殖细胞 冷冻保存 体外培养 肉用种鸡的饲养与管理措施 2003年 肖小珺关键词:肉用种鸡 饲养 卫生环境 雏鸡 疾病 表达序列标签(ESTs)及其数据库 被引量:3 2003年 表达序列标签(EST)是在生物体中表达基因的一段cDNA序列,它已成为基因定位、基因克 隆、基因表达序列分析的有力工具。本文主要介绍了EST的制备方法,EST数据库,同时分析了EST在应 用中应解决的问题,并展望了其应用前景。 徐琪 肖小珺 刘博 盛浩伟关键词:表达序列标签 EST数据库 CDNA 基因定位 基因克隆 冷冻保护剂和平衡方法对鸡胚原始生殖细胞冷冻保存效果的影响 被引量:4 2004年 采用Ficoll密度梯度离心,提取第19期(孵化72h)和第28期(孵化132h)性腺中的原始生殖细胞(PGCs),应用不同的冷冻保护剂和平衡方法进行冷冻保存。PGCs解冻后用DMEM培养液进行体外培养,并采用苔盼蓝染色法鉴定复苏后PGCs的存活情况。结果表明:1从第19期或第28期性腺中获取的PGCs在同一种冷冻保护剂下,平衡方法对PGCs的存活率有显著或极显著影响,平衡方法1的冷冻保护效果优于平衡方法2。2采用相同的平衡方法,冷冻保护剂C的冻存效果与其他保护剂之间存在显著或极显著差异,冷冻保护剂E和F对PGCs的冻存效果次之,冷冻保护剂A、B和D对PGCs的冻存效果最差。复苏后PGCs进行体外培养,其存活时间与分离后PGCs直接培养相比未出现显著缩短现象。 肖小珺 秦洁 蔡琳琳 李碧春关键词:原始生殖细胞 冷冻保存 鸡胚盘细胞的研究进展 2005年 鸡胚盘细胞存在于未孵化的新鲜种蛋中,是一种具有多潜能性的胚胎干细胞。通过胚盘细胞移植法可制备体细胞或种系细胞嵌合体。如果将外源基因转入受体胚盘,受体胚后代则可能成为转基因鸡。利用胚盘细胞作为转基因载体,生产转基因鸡是研究禽类转基因的一种理想方法。作者就胚盘细胞及其研究进展给予综述。 蔡琳琳 肖小珺 秦洁 李碧春关键词:胚盘细胞 体外培养 嵌合体 转基因 第28期鸡胚原始生殖细胞的冷冻保存与体外培养研究 被引量:2 2005年 利用Ficoll密度梯度离心,提取鸡胚第28期(孵化132h)性腺中的原始生殖细胞(PGCs),用不同的冷冻保护液,对PGCs采用分离后直接冷冻保存和体外培养24h后冷冻保存2种方法,以筛选合适的冷冻保护体系。结果发现,分离提纯后直接进行冷冻保存的PGCs,存活率最高为(87.07±1.29)%;体外培养24h后进行冷冻的PGCs,存活率最高为(44.08±1.19)%。对复苏后的PGCs进行体外培养结果发现,分离提纯后直接进行冷冻的PGCs,在体外培养过程中具有形成细胞克隆的能力,且可传代和进行体外分化;而体外培养24h后进行冷冻的PGCs,复苏后在体外培养过程中不能形成细胞克隆,且在体外培养40h左右死亡。 肖小珺 蔡琳琳 秦洁 李碧春关键词:原始生殖细胞 冷冻保存 体外培养 家畜体外受精技术研究新进展 被引量:5 2003年 体外受精技术是由卵母细胞成熟、精子获能、受精、受精卵体外培养、胚胎移植等程序组成的完整系统。笔者较详细地综述了该技术近年来的研究现状、进展,并对其发展前景进行了探讨。 徐琪 肖小珺 刘博 盛浩伟关键词:体外受精 卵母细胞 家畜 鸡胚胎生殖嵴中原始生殖细胞的分离培养研究 被引量:3 2004年 在鸡胚孵化的 19期以Ficoll密度梯度离心和酶解离两种方法分离生殖嵴中的原始生殖细胞 (PGCs)。探索在生殖嵴中PGCs分离、培养的适宜方法 ,以获得较多数量 ,较高活力的PGCs作介导生产转基因鸡。在倒置显微镜下进行形态观察 ,台盼兰染色比较存活时间 ,PAS特异染色法识别鉴定PGCs。结果表明两种分离方法均能分离到一定数量的PGCs细胞。与Ficoll密度梯度离心法相比 ,酶解离法分离到的PGCs的相对数量较多 ,存活时间较长 ,是一种较可行的分离方法。在鸡胚孵化的第 19期 ,PGCs大量聚集在肢体后端的生殖嵴原基处 ,此时的生殖嵴大小已达一定程度 ,分离其中的PGCs操作简便 ,有较强的可操作性 ; 秦洁 肖小珺 李碧春关键词:畜牧学 原始生殖细胞 鸡胚不同发育时期原始生殖细胞的分离方法 被引量:22 2003年 采用Ficoll密度梯度离心法和EDTA 胰酶酶解法两种方法 ,分别提取第 14期 (孵化 5 3h)血液、第 19期 (孵化 72h)和第 2 8期 (孵化 132h)生殖腺中的PGCs,以比较两种分离方法对 3个发育时期的鸡胚原始生殖细胞在相同体外培养条件下存活时间的差异。结果发现 ,两种分离方法均能分离到一定数量的原始生殖细胞 ,但是酶解法分离到的原始生殖细胞的相对数量较Ficoll密度梯度离心法的多 ,存活时间较长 ,是一种适宜的分离方法 ;对鸡胚发育第 14、 19、 2 8期 3个时期提取的原始生殖细胞进行体外培养 ,存活时间分别为 :72h、 88h和 80h ,三者之间差异显著。结果表明 :在鸡胚孵化的第 19期 ,因原始生殖细胞大量聚集在肢体后端的生殖嵴原基处 ,因而较容易收集 ,体外培养较为适宜 。 李碧春 秦洁 肖小珺 陈国宏 吴信生 吴圣龙关键词:原始生殖细胞 存活时间