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小G蛋白Rad基因对心肌肥大的影响: 2014年; 目的研究Rad基因对心肌细胞肥大的影响,为心肌肥大早期干预提供理论基础。方法针对Rad基因序列构建Rad过表达和低表达腺病毒载体,体外培养乳鼠心肌细胞,分为8组:空白对照组,Ad-GFP组,Ad-RNA干扰(RNAi)组,Ad-Rad组,肥大模型组(心肌营养素1诱导),肥大+Ad-GFP组,肥大+Ad-RNAi组,肥大+Ad-Rad组,48h后检测Rad、心房利钠因子(ANF)mRNA和蛋白表达水平。结果肥大模型组ANF蛋白表达较空白对照组明显升高;肥大+Ad-Rad组ANF蛋白表达较肥大+Ad-GFP组明显降低,肥大+Ad-RNAi组ANF蛋白表达较肥大+Ad-GFP组明显升高(P<0.05)。肥大模型组Rad mRNA和蛋白表达较空白对照组明显降低;Ad-Rad组Rad mRNA和蛋白表达较Ad-GFP组明显增加,Ad-RNAi组Rad mRNA和蛋白表达较Ad-GFP组明显降低(P<0.05)。结论 Rad基因可抑制在细胞水平心肌营养素1诱导的心肌细胞肥大反应。; 胡保奎牛丽丽耿召华刘玉峰; 关键词：肌细胞

Rad对心肌营养素1诱导心肌细胞肥大负性调控作用的基础研究: 目的探讨小G蛋白?Rad对心肌营养素1(cardiotrophin-1?CT-1)诱导心肌细胞肥大的影响。方法通过构建携带Rad基因的腺病毒载体,转染原代培养的乳鼠心肌细胞,用CT-1作为心肌肥大刺激因子,检测心肌细胞内...; 耿召华牛丽丽刘玉峰胡保奎王江

新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定: :探讨新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,培养存活率高和纯度高的心肌细胞.方法:无菌条件下取出出生1～2d的SD大鼠心脏,用2.5g/L胰蛋白酶和2.0 g/LⅡ型胶原酶等量混合液在37C条件下分次消化心肌组织.以差速贴壁并...; 胡保奎耿召华祝善俊刘玉峰; 关键词：心肌细胞原代培养纯度鉴定动物实验

新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定: 目的:探讨新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,培养存活率高和纯度高的心肌细胞。方法:无菌条件下取出出生1~2 d的SD大鼠心脏,用2.5 g/L胰蛋白酶和2.0 g/LⅡ型胶原酶等量混合液在37℃条件下分次消化心肌组织。以差...; 胡保奎耿召华祝善俊刘玉峰; 关键词：细胞培养心肌细胞; 文献传递

Rad蛋白对心肌营养素1致大鼠心肌肥大的保护作用及机制: 目的心肌肥大是一种常见的病理现象，是心肌适应不良的一种病理代偿形式,可导致心脏体积增大,因此早期干预心肌肥大是防治心力衰竭的关键。本实验采用腺病毒介导Rad基因在体外培养的大鼠心肌细胞中过表达和低表达，用心肌营养素1诱导...; 胡保奎; 关键词：心肌营养素1 腺病毒载体 ANF; 文献传递

小G蛋白Rad的研究进展: 2013年; Rad蛋白是三磷酸鸟苷酸酶(GTPases)的Ras超家族成员之一,是新发现的小G蛋白。Rad蛋白在多种细胞中表达,参与心脏功能的维持,调控心肌细胞凋亡,抑制血管平滑肌迁移,Rad蛋白表达的异常与人类的肿瘤发生发展密切相关。Rad蛋白在生物学和医学中都有重要作用,本文就Rad蛋白的研究进展做一综述。; 胡保奎牛丽丽耿召华; 关键词：小G蛋白心肌肥大肿瘤

新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定被引量：2: 2013年; 目的:探讨新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,培养存活率高和纯度高的心肌细胞。方法:无菌条件下取出出生1～2 d的SD大鼠心脏,用2.5 g/L胰蛋白酶和2.0 g/LⅡ型胶原酶等量混合液在37℃条件下分次消化心肌组织。以差速贴壁并将时间延长至90 min纯化心肌细胞,48 h后换液。结果:将心肌细胞24 h贴壁生长,于2～3 d心肌细胞伸出伪足,形成细胞簇,同步搏动,频率约80～130次/min,存活率为(93.9±2.8)%,纯度为(91.9±2.2)%。结论:以本实验的方法培养的心肌细胞存活率高、纯度高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。; 胡保奎耿召华祝善俊刘玉峰; 关键词：细胞培养心肌细胞

心肌营养素1血浆水平对慢性心力衰竭诊断的临床价值研究被引量：3: 2013年; 目的探讨检测心肌营养素1(CT-1)血浆水平对慢性心力衰竭(CHF)诊断的临床价值。方法选择74例CHF患者作为病例组,按NYHA心功能分级分组:心功能Ⅱ级24例,心功能Ⅲ28例,心功能Ⅳ22例。25例健康体检者作为对照组。对所有的研究对象用酶标免疫分析方法测定血浆CT-1浓度,酶联免疫吸附法测定脑钠肽(BNP)血浆浓度,分析CT-1和BNP血浆浓度与CHF心功能的关系。结果病例组血浆CT-1和BNP浓度明显高于对照组,病例组血浆CT-1和BNP浓度随着NYHA分级增高而逐级升高,差异有统计学意义(P<0.01)。CT-1和BNP血浆浓度与左心室射血分数呈负相关性(CT-1:r=-0.755;BNP:r=-0.684,均P<0.01)。结论血浆CT-1浓度可能是反映CHF严重程度的指标。联合测定CT-1和BNP血浆浓度对CHF的早期筛查诊断具有重要的临床价值。; 刘玉峰牛丽丽胡保奎; 关键词：心肌营养素1 慢性心力衰竭

小G蛋白基因重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞实验研究: 2013年; 目的研究含有小G蛋白基因Rad重组腺病毒在体外转染乳鼠心肌细胞后的转染效率及表达。方法构建Rad腺病毒载体,分别以感染复数5、10、15和20转染体外培养的乳鼠心肌细胞,48h后,采用荧光显微镜观察转染后荧光强度,流式细胞仪检测转染率。以感染复数为20转染后分3组:空白对照组,阴性对照组和Rad过表达组,3d后,采用RT-PCR、Western blot检测Rad基因表达情况。结果感染复数5、10、15和20对应转染率分别为29.84%、69.69%、77.20%和84.81%。腺病毒转染3d后,Rad过表达组心肌细胞Rad基因mRNA和蛋白表达水平较空白对照组和阴性对照组显著增加(P<0.05)。结论外源性Rad基因可在乳鼠心肌细胞中稳定表达。; 胡保奎牛丽丽耿召华刘玉峰; 关键词：肌细胞心脏转染

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胡保奎