荆鑫鑫
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
- 供职机构:佳木斯大学基础医学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省研究生创新科研项目国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- PTD4-Apoptin融合蛋白可溶性表达及其对Hela细胞的抑制作用被引量:2
- 2015年
- 目的构建PTD4-Apoptin融合蛋白的原核表达载体并表达蛋白,检测其对Hela细胞的生长抑制作用。方法人工合成Apoptin序列和PTD4序列,构建p GEX-6p-1-PTD4-Apoptin原核表达载体,使其在E.coli BL21(DE3)中表达。使用GST亲和层析柱纯化融合蛋白,并使用超滤管浓缩纯化后的目的蛋白,得到高浓度的融合蛋白。向Hela细胞中加入融合蛋白,检测其对Hela细胞的生长抑制作用。结果 PTD4-Apoptin融合蛋白在大肠杆菌中可溶性表达成功,对Hela细胞生长具有抑制作用,PTD4-Apoptin对Hela细胞抑制率达82.34%。结论成功构建PTD4-Apoptin融合蛋白表达载体,并表达可溶性的融合蛋白,PTD4-Apoptin对Hela细胞具有明显的抑制作用。
- 荆鑫鑫刘鸿飞张涛张强葛堂栋王明富王跃新
- 关键词:APOPTINHELA
- 高效重组穿膜肽-vp3的筛选及其对Hela细胞的抑制作用
- 目的:构建可溶性表达PTD4-apoptin、R9-apoptin、hC-SOD3-apoptin三种融合蛋白的原核表达载体,检测其对Hela癌细胞的凋亡作用,并筛选出抑制效果最强的,具有高活性和强细胞渗透性的穿膜肽-a...
- 荆鑫鑫
- 关键词:肿瘤细胞融合蛋白基因表达
- 文献传递
- 脂肪酸合成酶系多基因表达载体的构建被引量:3
- 2013年
- 目的利用独立表达盒法构建脂肪酸去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体进一步研究多基因表达载体中各个基因表达的相互影响。方法利用基因工程的方法扩增2个脂肪酸去饱和酶基因和2个延长酶基因,然后连接到pcDNA3.1(-)哺乳动物表达载体上,之后转化、筛选、酶切鉴定。最后脂质体法瞬时转染HK293T细胞,提取RNA检测这四个基因的表达情况。结果成功构建了含脂肪去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体pcDNA3.1-EF,并在HK293T细胞中成功表达。结论四基因表达载体pcDNA3.1-EF在HK293T细胞中成功表达,单个基因在表达载体中的次序对基因的表达没有明显影响。
- 汪坤福朱贵明张莉张涛荆鑫鑫江旭东王明富
- 关键词:多不饱和脂肪酸多基因表达载体脂肪酸去饱和酶