谢俊岭
- 作品数：14 被引量：15H指数：2
- 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>
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- 一株新基因型猪圆环病毒Ⅱ型的鉴定
- 2014年
- 为了解新近出现的猪圆环病毒II型（PCV2）的基因变异及其基因型信息。用PcR技术从新近发生断奶后多系统消耗综合征的病猪组织中扩增和克隆出一株PCV2全基因组序列，并进行了遗传变异分析。结果显示：该PCV2毒株基因组全长为1767bp，与部分其他PCV2毒株的核苷酸同源性达94．0％以上，并显示出一定的地域、
- 谢俊岭陈晓平孟凡伟
- 关键词：多系统消耗综合征全基因组序列PCV2遗传变异分析
- 猪圆环病毒Ⅱ型和伪狂犬病弱毒疫苗体外共接种对猪外周血单个核细胞调节性细胞因子mRNA表达的影响被引量：4
- 2012年
- 为分析猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对伪狂犬病弱毒苗(PRV)免疫反应的影响。用Real-time PCR技术检测了仔猪外周血单个核细胞(PBMC)体外单接种和共接种PCV2与PRV后调节性细胞因子IL-4、IL-10、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达水平。结果表明:PRV能引起IL-4、IL-12p40与IFN-γ的mRNA表达上调,PCV2能引起IL-4、IL-10与IL-12p40的mRNA表达上调;而且,PCV2能抑制PRV诱导IL-4、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达上调,其中对IFN-γmRNA表达的抑制效果最为显著(P<0.05),提示PCV2可能会对PRV的细胞免疫反应产生不利影响。
- 高峰谢俊岭贾超伟周双海任慧英
- 关键词：细胞因子免疫反应
- DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体被引量：1
- 2012年
- 为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体,并为ORF3功能研究奠定基础,用PCR方法扩增PCV2ORF3基因,对其PCR产物用EcoRI与XhoI进行酶切,并对真核表达载体pCDNA3.1(+)进行同样酶切,连接2种目的酶切产物后转化E.coliDH5a感受态,菌落PCR和序列测定结果显示成功构建出重组质粒pCDNA3.1-PCV2ORF3。将该重组质粒接种BALB/c小鼠,用间接免疫荧光(IFA)检测小鼠血清PCV2ORF3抗体的特异性及其效价。IFA结果证实经PCV2ORF3重组质粒接种所制备的小鼠血清是PCV2ORF3的特异性抗体,小鼠血清PCV2ORF3抗体效价在经过4次接种后均达到1:25以上,抗体检测结果表明成功制备了具有较高效价的PCV2ORF3抗体。研究结果提示:可以通过质粒DNA免疫方法来快速、简便地制备PCV2ORF3抗体,为PCV2ORF3抗体制备提供了一种新的有效途径。
- 谢俊岭耿美鸽吴迪卻小宁周双海
- 关键词：DNA免疫小鼠效价
- 嵌合猪圆环病毒对仔猪致病性与免疫原性的研究
- 将嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)接种30日龄健康仔猪,测定其对仔猪的致病性与免疫原性。结果显示,仔猪接种PCV1-2后未出现可见的临床症状和大体病理变化,仔猪增重和饲料转化效率未受影响。血清中猪圆环病毒2型(PCV2)O...
- 周双海邵小雪谢俊岭
- 关键词：猪圆环病毒2型免疫原性
- 文献传递
- 嵌合猪圆环病毒对仔猪的致病性与免疫原性研究被引量：2
- 2012年
- 为分析嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)对仔猪的致病性与免疫原性,检测了健康普通仔猪接种PCV1-2后的临床症状、病理变化、血清与组织中的病毒含量及血清学变化。结果显示:仔猪接种PCV1-2后增重和饲料转化效率未受影响,未出现可见的临床症状和大体病理变化,仅部分出现轻微的组织病理变化。血清中猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白抗体在接种后第14天出现阳转,第28天时抗体阳性率达到100%,表明PCV1-2诱发仔猪快速产生了针对PCV2ORF2蛋白抗原的特异性抗体反应。荧光定量PCR结果显示,血清中PCV1-2DNA含量在接种后逐渐上升,第28天时达到最高,之后迅速下降;第35天宰杀时组织中病毒含量以肺门淋巴结中最高,心脏中最低;而常规PCR难以检出血清和组织中的PCV1-2DNA,表明PCV1-2接种后只引起仔猪的轻微感染。研究数据表明,PCV1-2对仔猪具有良好的免疫原性,其致病性明显减弱。
- 邵小雪高峰谢俊岭周双海
- 关键词：猪圆环病毒2型免疫原性
- 一株新基因型猪圆环病毒Ⅱ型的鉴定被引量：2
- 2013年
- 为了解新近出现的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的基因变异及其基因型信息。用PCR技术从新近发生断奶后多系统消耗综合征的病猪组织中扩增和克隆出一株PCV2全基因组序列,并进行了遗传变异分析。结果显示:该PCV2毒株基因组全长为1767bp,与部分其他PCV2毒株的核苷酸同源性达94.0%以上,并显示出一定的地域、时间相关性。病毒ORF2基因系统发育进化分析显示:该PCV2毒株与已有PCV2基因型的遗传距离均大于0.035,因而被划入到一个新的PCV2基因型,暂命名为PCV2d,属于在中国新近出现的一种PCV2基因型。研究结果表明,克隆鉴定了一株新基因型PCV2。
- 谢俊岭陈晓平孟凡伟王保有周双海王志军
- 关键词：猪圆环病毒II型基因变异进化分析基因型
- 猪圆环病毒2型感染性克隆构建方法的比较
- 危害养猪业的猪圆环病毒2型(PCV2)的致病机制仍不太清楚,而感染性克隆是研究病毒致病机制的有效工具。本研究用基因重组技术构建了pMD-PCV2、pSK-PCV2和pSK-2PCV2三种DNA分子克隆,并比较了其在PK-...
- 周双海谢俊岭
- 关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆转染效率
- 猪圆环病毒Ⅱ型感染性DNA克隆的构建被引量：2
- 2012年
- 为了构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染性DNA克隆,并为PCV2的突变体构建及其致病机理研究建立基础。用PCR方法从PCV2 DNA质粒中扩增出PCV2全基因组片段,将其插入到pBluescript-SK载体中,构建出单拷贝PCV2 DNA克隆,并进一步构建了双拷贝PCV2 DNA克隆,将PCV2 DNA克隆转染PK-15细胞,以获得PCV2拯救病毒,并初步测定了拯救病毒的体外增殖能力。结果显示:成功获得了PCV2拯救病毒,并能够在PK-15细胞中进行稳定传代,其TCID50在连传5代后达到10-6.05/mL,与其亲本病毒相近,显示出较高的感染滴度。研究结果表明,成功构建了具有较高感染性的PCV2感染性克隆,为PCV2的生物学特性及致病机理研究奠定了基础。
- 谢俊岭邵小雪孟凡伟周双海
- 关键词：增殖能力
- 嵌合猪圆环病毒对仔猪的免疫保护研究
- 将10头28日龄普通健康仔猪随机平均分成2组,一组免疫106.05TCID50嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)作为免疫组,另一组不予免疫作为对照.在免疫后28天,所有仔猪均予以106.95TCID50 PCV2野毒攻击,以...
- 邵小雪周双海谢俊岭高峰
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒感染仔猪免疫保护嵌合基因
- 嵌合猪圆环病毒对仔猪的免疫保护研究
- 将10头28日龄普通健康仔猪随机平均分成2组,一组免疫10TCID嵌合猪圆环病毒(PCV1-2)作为免疫组,另一组不予免疫作为对照。在免疫后28天,所有仔猪均予以10TCIDPCV2野毒攻击,以测定PCV1-2免疫对仔猪...
- 邵小雪谢俊岭高峰周双海
- 关键词：猪圆环病毒2型仔猪免疫保护
- 文献传递
